| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 前言 | 第17-18页 |
| 文献回顾 | 第18-27页 |
| 第一部分 Ran在结直肠癌病理组织和细胞系中的表达、定位 | 第27-38页 |
| 1 材料 | 第27-29页 |
| 1.1 细胞系 | 第27页 |
| 1.2 组织芯片 | 第27页 |
| 1.3 主要实验试剂 | 第27-28页 |
| 1.4 主要实验仪器 | 第28-29页 |
| 2 方法 | 第29-34页 |
| 2.1 细胞培养 | 第29页 |
| 2.2 免疫组织化学染色 | 第29-31页 |
| 2.3 Western Blot | 第31-33页 |
| 2.4 免疫荧光 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-36页 |
| 3.1 Ran在结直肠癌组织原发灶与转移灶中的表达 | 第34-35页 |
| 3.2 Ran在结直肠癌细胞系核蛋白中表达 | 第35页 |
| 3.3 Ran在结直肠癌细胞中的亚细胞定位 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 第二部分 慢病毒表达载体的构建和Ran功能获得与缺失模型的建立 | 第38-46页 |
| 1 材料 | 第38-40页 |
| 1.1 Oligo siRNA-Ran的设计合成 | 第38页 |
| 1.2 慢病毒包装 | 第38-39页 |
| 1.3 主要试剂 | 第39-40页 |
| 1.4 主要实验仪器 | 第40页 |
| 2 方法 | 第40-42页 |
| 2.1 细胞培养 | 第40页 |
| 2.2 细胞瞬时转染及干扰效果验证 | 第40-41页 |
| 2.3 慢病毒干扰细胞系及转染效率验证 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-45页 |
| 3.1 Oligo siRNA-Ran瞬时转染效果验证 | 第42-43页 |
| 3.2 功能缺失模型的建立 | 第43-44页 |
| 3.3 功能获得模型的建立 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-46页 |
| 第三部分 Ran对结直肠癌细胞转移能力的影响 | 第46-53页 |
| 1 材料 | 第46-47页 |
| 1.1 功能缺失和功能获得的细胞模型 | 第46页 |
| 1.2 主要试剂 | 第46页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第46-47页 |
| 1.4 实验动物 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-48页 |
| 2.1 细胞培养 | 第47页 |
| 2.2 Transwell迁移实验 | 第47页 |
| 2.3 Transwell侵袭实验 | 第47-48页 |
| 2.4 裸鼠尾静脉转移实验 | 第48页 |
| 2.5 统计学分析 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-50页 |
| 3.1 Transwell法检测Ran对结直肠癌细胞体外系迁移和侵袭能力的影响 | 第48-49页 |
| 3.2 裸鼠尾静脉转移实验检测Ran对结直肠癌细胞系体内转移能力的影响 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 第四部分 Ran促进结直肠癌细胞侵袭转移的机制研究 | 第53-65页 |
| 1 材料 | 第53-55页 |
| 1.1 细胞系 | 第53页 |
| 1.2Nanostring | 第53页 |
| 1.3 基因芯片 | 第53页 |
| 1.4 主要试剂 | 第53-54页 |
| 1.5 主要仪器 | 第54-55页 |
| 2 方法 | 第55-57页 |
| 2.1 细胞培养 | 第55页 |
| 2.2 下游靶分子验证 | 第55-56页 |
| 2.3 细胞RNA样本送检Nanostring | 第56页 |
| 2.4 细胞RNA样本送检基因芯片 | 第56-57页 |
| 3 结果 | 第57-63页 |
| 3.1 下游靶分子验证 | 第57-59页 |
| 3.2 Nanostring | 第59-61页 |
| 3.3 表达谱芯片 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 个人简历和研究成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
