| 致谢 | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-10页 |
| 中文摘要 | 第10-14页 |
| Abstract | 第14-17页 |
| 论文创新点 | 第18-19页 |
| 缩略词表 | 第19-21页 |
| 目次 | 第21-25页 |
| 辛伐他汀促进小鼠胚胎干细胞心肌分化机制研究 | 第25-45页 |
| 前言 | 第25-26页 |
| 1.1 实验仪器和实验材料 | 第26-27页 |
| 1.1.1 细胞株及药物 | 第26页 |
| 1.1.2 试剂 | 第26页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第26-27页 |
| 1.1.5 溶液配制 | 第27页 |
| 1.2 实验方法 | 第27-31页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第27-29页 |
| 1.2.2 动物合笼和胚胎取样 | 第29页 |
| 1.2.3 Western blotting蛋白表达检测 | 第29-30页 |
| 1.2.4 免疫荧光染色 | 第30-31页 |
| 1.3 实验结果 | 第31-40页 |
| 1.3.1 RhoA,Rac1和Cdc42的时效表达 | 第31-32页 |
| 1.3.2 Rho GTP酶抑制剂对小鼠ES细胞增殖的影响 | 第32-33页 |
| 1.3.3 Rho GTP酶抑制剂对小鼠ES细胞心肌分化的影响 | 第33-34页 |
| 1.3.4 SIM促进小鼠ES细胞心肌分化的量效作用 | 第34-35页 |
| 1.3.5 SIM促进小鼠ES细胞心肌分化的时效作用 | 第35-36页 |
| 1.3.6 SIM诱导的心肌细胞具有成熟肌小节结构 | 第36-37页 |
| 1.3.7 SIM减弱RhoA及下游信号转导 | 第37-38页 |
| 1.3.8 SIM抑制粘着斑激酶磷酸化 | 第38-39页 |
| 1.3.9 SIM激活P13K/Akt信号通路 | 第39-40页 |
| 1.4 讨论 | 第40-43页 |
| 1.5 结论 | 第43-45页 |
| Y27632调控小鼠胚胎干细胞自我更新机制研究 | 第45-71页 |
| 引言 | 第45-46页 |
| 2.1 实验仪器和实验材料 | 第46-48页 |
| 2.1.1 细胞株及实验动物 | 第46页 |
| 2.1.2 药物 | 第46页 |
| 2.1.3 试剂 | 第46-47页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第47页 |
| 2.1.5 溶液配制 | 第47-48页 |
| 2.2 实验方法 | 第48-54页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第48-50页 |
| 2.2.2 裸鼠畸胎瘤测试 | 第50-51页 |
| 2.2.3 Western blotting蛋白表达检测 | 第51页 |
| 2.2.4 RT-PCR基因表达检测 | 第51-53页 |
| 2.2.5 免疫荧光染色 | 第53页 |
| 2.2.6 细胞的慢病毒转染,筛选和检测 | 第53页 |
| 2.2.8 microRNA芯片检测和分析 | 第53-54页 |
| 2.3 实验结果 | 第54-66页 |
| 2.3.1 Y27632促进小鼠ES细胞增殖 | 第54-55页 |
| 2.3.2 Y27632支持小鼠ES细胞去LIF条件下的维持培养 | 第55-56页 |
| 2.3.3 Y-ES细胞表达全能性分子标志 | 第56-57页 |
| 2.3.4 Y-ES细胞具有神经元,心肌细胞和肝细胞定向分化能力 | 第57-58页 |
| 2.3.5 Y-ES细胞形成的畸胎瘤具有分别来自三胚层的组织结构 | 第58-59页 |
| 2.3.6 Y27632部分抑制RA诱导的细胞分化和ERK磷酸化 | 第59-61页 |
| 2.3.7 Y-ES细胞自我更新不依赖LIF/STAT3通路 | 第61-62页 |
| 2.3.8 TGFβ通路抑制剂SB431542抑制Y-ES细胞自我更新 | 第62-63页 |
| 2.3.9 Y27632调控全能性相关miRNA的表达 | 第63-64页 |
| 2.3.10 Y27632引起的小鼠ES细胞形态变化具有可逆性 | 第64-65页 |
| 2.3.11 Y27632培养体系替代饲养层体系的应用 | 第65-66页 |
| 2.4 讨论 | 第66-69页 |
| 2.5 结论 | 第69-71页 |
| Y27632调控小鼠胚胎干细胞自我更新的MIRNA芯片数据分析 | 第71-97页 |
| 引言 | 第71-72页 |
| 3.1 分析策略及数据库 | 第72-74页 |
| 3.1.1 数据分析策略 | 第72-73页 |
| 3.1.2 miRNA和蛋白相互作用分析数据库简介 | 第73-74页 |
| 3.2 实验方法 | 第74-79页 |
| 3.2.1 qRT-PCR检测miRNA表达 | 第74-78页 |
| 3.2.2 靶基因预测和通路分析 | 第78页 |
| 3.2.3 蛋白相互作用分析 | 第78-79页 |
| 3.2.4 蛋白免疫印迹 | 第79页 |
| 3.3 实验结果 | 第79-93页 |
| 3.3.1 Y-ES细胞、ES细胞与EB间的差异miRNA聚类分析 | 第79-82页 |
| 3.3.2 Y-ES细胞与ES细胞的miRNA差异谱比较研究和通路分析 | 第82-84页 |
| 3.3.3 细胞自我更新和分化相关的miRNA预测 | 第84-85页 |
| 3.3.4 目标miRNA的差异表达确认 | 第85-86页 |
| 3.3.5 miR-302b-5p／miR-295-5p／miR-135b-5p／miR-20b-3p／miR-18b-5p 的通路分析 | 第86-88页 |
| 3.3.6 miR-712-3p/miR-30c-1-3p/miR-1892的通路分析 | 第88-89页 |
| 3.3.7 通路分析总结 | 第89-90页 |
| 3.3.8 蛋白相互作用网络分析 | 第90-92页 |
| 3.3.9 关键靶点的蛋白表达验证 | 第92-93页 |
| 3.4 讨论 | 第93-96页 |
| 3.5 结论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-107页 |
| 综述 | 第107-123页 |
| 参考文献 | 第116-123页 |
| 作者简历及在读期间取得的科研成果 | 第123-125页 |
