| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 外文缩略词 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 第一部分 党参多糖对EA.hy926衰老细胞的氧化应激影响 | 第16-38页 |
| 引言 | 第16页 |
| 1 实验材料 | 第16-17页 |
| 1.1 实验细胞及药物 | 第16页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第16-17页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第17页 |
| 2 实验方法 | 第17-21页 |
| 2.1 EA.hy926细胞株培养 | 第17页 |
| 2.2 过氧化氢衰老模型的建立 | 第17页 |
| 2.3 党参多糖干预H_2O_2诱导的EA.hy926衰老细胞 | 第17-18页 |
| 2.4 MTT检测EA.hy926细胞的存活率 | 第18页 |
| 2.5 倒置显微镜下EA.hy926细胞的形态学观察 | 第18页 |
| 2.6 SA-β-半乳糖苷酶染色法检测各组的衰老情况 | 第18页 |
| 2.7 流式细胞术检测细胞周期 | 第18-19页 |
| 2.8 酶学比色法测定SOD、MDA、NO | 第19页 |
| 2.9 酶联免疫吸附法测定ET-1、iNOS、eNOS | 第19-20页 |
| 2.10 荧光显色检测细胞内活性氧的荧光强度 | 第20页 |
| 2.11 统计学分析 | 第20-21页 |
| 3 结果 | 第21-36页 |
| 3.1 MTT检测细胞的增殖活力 | 第21-22页 |
| 3.2 各组细胞的形态学观察 | 第22-25页 |
| 3.3 各组细胞SA-β-半乳糖苷酶的表达 | 第25-27页 |
| 3.4 各组细胞的G1期比例 | 第27-30页 |
| 3.5 SOD、MDA、NO、iNOS、eNOS、ET-1含量测定 | 第30-35页 |
| 3.6 细胞内活性氧的荧光强度 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 第二部分 党参多糖对EA.hy926衰老细胞的表观遗传学改变 | 第38-61页 |
| 引言 | 第38页 |
| 1 实验材料 | 第38-40页 |
| 1.1 实验细胞及药物 | 第38页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第38-40页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-51页 |
| 2.1 EA.hy926细胞株培养与分组 | 第40-41页 |
| 2.2 印迹法DNA甲基化定量试剂盒检测提取DNA的甲基化水平 | 第41-42页 |
| 2.2.1 实验原理 | 第41页 |
| 2.2.2 实验步骤 | 第41-42页 |
| 2.3 蛋白印迹法Westernblot检测表观遗传相关蛋白DNMT1、JMJD3、EZH2、Bmi- | 第42-46页 |
| 2.3.1 实验原理 | 第42-43页 |
| 2.3.2 蛋白质提取 | 第43页 |
| 2.3.3 BCA法测蛋白含量的原理 | 第43页 |
| 2.3.4 实验步骤 | 第43-46页 |
| 2.4 实时定量PCR检测表观遗传相关基因DNMT1、JMJD3、EZH2、Bmi-1mRNA的表达 | 第46-50页 |
| 2.4.1 引物设计与合成 | 第46页 |
| 2.4.2 引物的配制 | 第46-47页 |
| 2.4.3 提取细胞总RNA | 第47-48页 |
| 2.4.4 反转录合成cDNA | 第48-49页 |
| 2.4.5 RT-PCR扩增反应 | 第49-50页 |
| 2.4.6 目的基因的表达量的结果判断 | 第50页 |
| 2.5 统计学分析 | 第50-51页 |
| 3 结果 | 第51-58页 |
| 3.1 DNA甲基化的水平 | 第51-52页 |
| 3.2 表观遗传相关蛋白DNMT1、JMJD3、EZH2、Bmi-1的表达量 | 第52-55页 |
| 3.3 表遗传相关基因DNMT1、JMJD3、EZH2、Bmi-1mRNA表达 | 第55-58页 |
| 4 讨论 | 第58-61页 |
| 结语 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 附录 | 第66-70页 |
| 综述 衰老过程中的表观遗传修饰的改变 | 第70-78页 |
| 参考文献 | 第75-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读硕士学位期间的研究工作与成果 | 第79页 |
