| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 图表目录 | 第14-15页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-28页 |
| 1.1 植物中参与逆境胁迫应答信号途径的蛋白激酶 | 第16-18页 |
| 1.1.1 促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK) | 第16-17页 |
| 1.1.2 钙依赖而钙调素不依赖的蛋白激酶(CDPK) | 第17-18页 |
| 1.2 14-3-3在植物生长发育中的功能 | 第18-26页 |
| 1.2.1 14-3-3蛋白种类及结构特征 | 第18-19页 |
| 1.2.2 植物14-3-3的功能多样性 | 第19-26页 |
| 1.3 本课题的研究意义及目的 | 第26-28页 |
| 第二章 岷江百合Lr14-3-3基因的克隆与表达特性分析 | 第28-42页 |
| 2.1 前言 | 第28页 |
| 2.2 材料 | 第28-29页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.2.2 菌株和载体 | 第28-29页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第29页 |
| 2.2.4 缓冲液和培养基配方 | 第29页 |
| 2.3 方法 | 第29-33页 |
| 2.3.1 5’RACE及3’RACE | 第29-31页 |
| 2.3.2 T-A克隆 | 第31页 |
| 2.3.3 全长cDNA的克隆及生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 2.3.4 基因的表达分析 | 第32-33页 |
| 2.4 结果与分析 | 第33-40页 |
| 2.4.1 Lr14-3-3全长cDNA的获得 | 第33-34页 |
| 2.4.2 Lr14-3-3的生物信息学分析 | 第34-39页 |
| 2.4.3 Lr14-3-3的表达分析 | 第39-40页 |
| 2.5 讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 Lr14-3-3的功能分析 | 第42-64页 |
| 3.1 前言 | 第42页 |
| 3.2 材料和试剂 | 第42-44页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第42页 |
| 3.2.2 菌株和载体 | 第42页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第42-43页 |
| 3.2.4 缓冲液和培养基配方 | 第43-44页 |
| 3.3 方法 | 第44-52页 |
| 3.3.1 CTAB法提取基因组DNA | 第44-45页 |
| 3.3.2 质粒提取及纯化 | 第45页 |
| 3.3.3 酶切反应 | 第45-46页 |
| 3.3.4 胶回收 | 第46页 |
| 3.3.5 DNA连接反应 | 第46页 |
| 3.3.6 制备农杆菌感受态细胞 | 第46-47页 |
| 3.3.7 CaCl2冻融法转化农杆菌感受态细胞 | 第47页 |
| 3.3.8 PCR反应 | 第47页 |
| 3.3.9 农杆菌活化 | 第47-48页 |
| 3.3.10 叶盘转化法侵染烟草叶片 | 第48页 |
| 3.3.11 转基因烟草的筛选 | 第48页 |
| 3.3.12 转基因烟草的表达分析 | 第48-49页 |
| 3.3.13 生理指标测定 | 第49-51页 |
| 3.3.14 转基因烟草的真菌抗性分析 | 第51页 |
| 3.3.15 转基因烟草对非生物胁迫的抗性分析 | 第51-52页 |
| 3.4 结果与分析 | 第52-62页 |
| 3.4.1 Lr14-3-3基因植物超表达载体的构建 | 第52-53页 |
| 3.4.2 Lr14-3-3植物超表达载体转化根癌农杆菌 | 第53页 |
| 3.4.3 转基因烟草的获得 | 第53-54页 |
| 3.4.4 转基因烟草基因组DNA的PCR检测 | 第54页 |
| 3.4.5 转基因烟草的表达分析 | 第54-56页 |
| 3.4.6 转基因烟草中的抗氧化酶活测定 | 第56页 |
| 3.4.7 转基因烟草的真菌抗性分析 | 第56-59页 |
| 3.4.8 转基因烟草对非生物胁迫的抗性分析 | 第59-62页 |
| 3.5 讨论 | 第62-64页 |
| 第四章 结论与展望 | 第64-66页 |
| 4.1 结论 | 第64-65页 |
| 4.2 展望 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录A Hoagland营养液配方 | 第74-76页 |
| 附录B 攻读硕士学位期间发表论文 | 第76页 |
| 申请专利 | 第76页 |
