| 摘要 | 第4-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 第一章 构建integrinβ4沉默细胞系 | 第18-29页 |
| 1.1 材料与方法 | 第18-23页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第18-19页 |
| 1.1.2 主要的仪器和设备 | 第19页 |
| 1.1.3 永生化人支气管上皮细胞株(16HBE14o-)的培养 | 第19页 |
| 1.1.4 合成针对integrinβ4的siRNA转染到HBECs中 | 第19-20页 |
| 1.1.5 荧光显微镜观察integrinβ4 siRNA的转染效率 | 第20-21页 |
| 1.1.6 流式细胞术筛选沉默效率最高的integrinβ4 siRNA | 第21页 |
| 1.1.7 RT-PCR检测integrin p4表达水平 | 第21-22页 |
| 1.1.8 统计学处理 | 第22-23页 |
| 1.2 结果 | 第23-27页 |
| 1.2.1 Integrin β4 siRNA转染效率的鉴定 | 第23页 |
| 1.2.2 流式细胞术筛选integrinβ4有效沉默序列 | 第23-24页 |
| 1.2.3 RT-PCR检测integrinβ4的沉默效率 | 第24-26页 |
| 1.2.4 流式细胞术检测integrinβ4的沉默效率 | 第26-27页 |
| 1.3 讨论 | 第27-29页 |
| 第二章 靶向沉默integrinβ4对TLR4通路的影响 | 第29-53页 |
| 2.1 材料与方法 | 第29-34页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第29-30页 |
| 2.1.2 主要的仪器和设备 | 第30-31页 |
| 2.1.3 MTT法确定LPS的给药浓度 | 第31页 |
| 2.1.4 HBECs不同的分组处理 | 第31-32页 |
| 2.1.5 流式细胞术检测HBECs表面TLR4分子表达 | 第32页 |
| 2.1.6 Western blotting检测TLR4信号通路关键节点分子蛋白的表达 | 第32-34页 |
| 2.1.7 ELISA检测细胞上清液中炎症因子的表达 | 第34页 |
| 2.1.8 统计学处理 | 第34页 |
| 2.2 结果 | 第34-50页 |
| 2.2.1 LPS作用于HBECs最佳给药浓度确定 | 第34-35页 |
| 2.2.2 Integrinβ4沉默对HBECs表面TLR4表达的影响 | 第35-38页 |
| 2.2.3 Integrinβ4沉默对TLR4下游节点分子蛋白表达的影响 | 第38-44页 |
| 2.2.4 Integrinβ4沉默对TLR4下游炎症因子分泌的影响 | 第44-50页 |
| 2.3 讨论 | 第50-53页 |
| 第三章 integrin β4沉默对CD4~+T淋巴细胞分化的影响 | 第53-60页 |
| 3.1 材料与方法 | 第53-55页 |
| 3.1.1 主要的试剂 | 第53页 |
| 3.1.2 主要的仪器和设备 | 第53-54页 |
| 3.1.3 CD4~+T淋巴细胞的培养 | 第54页 |
| 3.1.4 HBECs与CD4~+T淋巴细胞共培养 | 第54页 |
| 3.1.5 ELISA检测细胞因子IFN-γ、IF-4、IF-17的含量 | 第54页 |
| 3.1.6 统计学处理 | 第54-55页 |
| 3.2 结果 | 第55-57页 |
| 3.2.1 ELISA检测细胞因子IFN-γ的分泌量 | 第55页 |
| 3.2.2 ELISA检测细胞因子IL-4的分泌量 | 第55-56页 |
| 3.2.3 ELISA检测细胞因子IL-17的分泌量 | 第56-57页 |
| 3.3 讨论 | 第57-60页 |
| 第四章 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 综述 | 第66-77页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 攻读硕士期间主要的研究成果 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
