中文摘要 | 第6-9页 |
ABSTRACT | 第9-13页 |
缩略词表 | 第14-16页 |
前言 | 第16-19页 |
材料与方法 | 第19-32页 |
1 实验材料 | 第19-23页 |
1.1 实验试剂 | 第19-21页 |
1.2 细胞株 | 第21页 |
1.3 主要仪器及来源 | 第21-22页 |
1.4 其他试剂及配制 | 第22-23页 |
2 Hep-G2细胞的复苏、培养、传代、冻存 | 第23-24页 |
2.1 细胞复苏 | 第23页 |
2.2 细胞培养、传代 | 第23-24页 |
2.3 细胞冻存 | 第24页 |
3 药物浓度的配置 | 第24页 |
4 CCK8实验 | 第24-25页 |
5 流式细胞术测细胞凋亡实验 | 第25-26页 |
6 流式细胞术测细胞周期实验 | 第26页 |
7 WesternBlotting实验 | 第26-29页 |
7.1 细胞总蛋白提取 | 第26-27页 |
7.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第27页 |
7.3 SDS-PAGE电泳 | 第27-28页 |
7.4 转膜 | 第28页 |
7.5 免疫反应 | 第28-29页 |
7.6 化学发光检测 | 第29页 |
7.7 凝胶图像分析 | 第29页 |
8 RT-PCR实验 | 第29-31页 |
8.1 总RNA的提取 | 第29-30页 |
8.2 cDNA第一条链的合成 | 第30页 |
8.3 反转录 | 第30-31页 |
8.4 Real-timePCR扩增 | 第31页 |
9 统计学分析 | 第31-32页 |
结果 | 第32-43页 |
1 CCK-8实验结果 | 第32-34页 |
1.1 CCK-8检测Apatinib抑制肝癌Hep-G2细胞增殖 | 第32-33页 |
1.2 CCK-8检测BBR抑制肝癌Hep-G2细胞增殖 | 第33页 |
1.3 CCK-8检测Apatinib组、BBR组、联合组抑制肝癌Hep-G2细胞增殖 | 第33-34页 |
2 流式细胞术实验结果 | 第34-39页 |
2.1 流式细胞术检测Apatinib对细胞周期的影响 | 第34页 |
2.2 流式细胞术检测BBR对细胞周期的影响 | 第34-35页 |
2.3 流式细胞术检测联合组药物对细胞周期的影响 | 第35-36页 |
2.4 Apatinib对Hep-G2细胞凋亡率的影响 | 第36-37页 |
2.5 BBR对Hep-G2细胞凋亡率的影响 | 第37-38页 |
2.6 联合组对Hep-G2细胞凋亡率的影响 | 第38-39页 |
3 WesternBlotting实验结果 | 第39-41页 |
3.1 Apatinib联合BBR对Hep-G2细胞BTG2和CyclinB1、CyclinD1蛋白表达的影响 | 第39-41页 |
4 RT-PCR实验结果 | 第41-43页 |
4.1 Apatinib联合BBR对Hep-G2细胞BTG2mRNA和CyclinB1、CyclinD1mRNA表达的影响 | 第41-43页 |
讨论 | 第43-54页 |
1 肝癌的中西医结合治疗 | 第43-47页 |
2 黄连素在抗肝癌治疗中的作用 | 第47-51页 |
3 BTG2及CyclinB1、CyclinD | 第51-52页 |
4 实验结果讨论 | 第52-54页 |
结语 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-68页 |
附录 | 第68-79页 |
附录1:综述 | 第68-78页 |
参考文献 | 第74-78页 |
附录2:发表文章 | 第78-79页 |
致谢 | 第79页 |