中文摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
符号说明 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-17页 |
1.1 金黄色葡萄球菌 | 第11-12页 |
1.1.1 金黄色葡萄球菌的危害 | 第11页 |
1.1.2 c-di-AMP在金黄色葡萄球菌中的研究 | 第11-12页 |
1.2 细菌c-di-AMP相关的介绍 | 第12-15页 |
1.2.1 c-di-AMP的发现 | 第12-13页 |
1.2.2 c-di-AMP的合成 | 第13-14页 |
1.2.3 c-di-AMP的降解 | 第14页 |
1.2.4 c-di-AMP的受体 | 第14-15页 |
1.3 课题研究的意义 | 第15-17页 |
第二章 GdpP蛋白的表达、纯化及结晶 | 第17-39页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第17-19页 |
2.1.1 菌株及载体 | 第17页 |
2.1.2 材料及服务 | 第17-18页 |
2.1.3 主要仪器 | 第18页 |
2.1.4 常用试剂 | 第18-19页 |
2.2 蛋白理化性质分析 | 第19-24页 |
2.2.1 GdpP全长蛋白分析 | 第19-22页 |
2.2.2 GdpP-C蛋白的分析 | 第22-24页 |
2.3 实验方法 | 第24-30页 |
2.3.1 表达载体的构建 | 第24-28页 |
2.3.2 GdpP全长蛋白的表达纯化 | 第28-29页 |
2.3.3 GdpP-C蛋白的表达纯化 | 第29-30页 |
2.3.4 GdpP-C晶体的筛选及优化 | 第30页 |
2.4 实验结果 | 第30-38页 |
2.4.1 GdpP蛋白的表达纯化结果 | 第30-32页 |
2.4.2 GdpP-C蛋白的表达纯化结果 | 第32-34页 |
2.4.3 硒代蛋白的表达纯化结果 | 第34-35页 |
2.4.4 GdpP-C蛋白的晶体 | 第35-38页 |
2.5 本章小结 | 第38-39页 |
第三章 GdpP-C蛋白晶体结构的解析 | 第39-47页 |
3.1 材料及仪器 | 第39页 |
3.1.1 实验试剂 | 第39页 |
3.1.2 实验仪器 | 第39页 |
3.2 结构的解析 | 第39-41页 |
3.2.1 衍射数据的收集 | 第39-40页 |
3.2.2 数据的处理 | 第40页 |
3.2.3 相位的确定 | 第40页 |
3.2.4 结构模型的建立 | 第40-41页 |
3.2.5 结构的修正 | 第41页 |
3.3 实验结果 | 第41-45页 |
3.3.1 GdpP-C蛋白结构修正的结果 | 第41-42页 |
3.3.2 GdpP-C硒代蛋白结构修正的结果 | 第42-43页 |
3.3.3 GdpP蛋白复合物结构的解析结果 | 第43-45页 |
3.4 本章小结 | 第45-47页 |
第四章 GdpP及复合物的结构分析及酶活测定 | 第47-59页 |
4.1 材料及仪器 | 第47页 |
4.1.1 主要试剂 | 第47页 |
4.1.2 实验仪器及服务 | 第47页 |
4.2 实验方法 | 第47-50页 |
4.2.1 GdpP-C突变体的克隆表达 | 第47-49页 |
4.2.2 CD的测定 | 第49页 |
4.2.3 酶活的测定 | 第49-50页 |
4.3 实验结果 | 第50-58页 |
4.3.1 GdpP-C蛋白结构的描述 | 第50-52页 |
4.3.2 GdpP-C三种小分子复合物结构的描述 | 第52-54页 |
4.3.3 CD的测定结果 | 第54-55页 |
4.3.4 GdpP-C蛋白酶活的测定 | 第55-58页 |
4.4 本章小结 | 第58-59页 |
第五章 DHH-DHHA1家族蛋白的统一催化机制 | 第59-69页 |
5.1 实验材料及方法 | 第59页 |
5.2 GdpP-C降解c-di-AMP机制的研究 | 第59-62页 |
5.3 Rv2837c和GdpP一样具有相同的翻转机制 | 第62-64页 |
5.4 DHH-DHHA1家族蛋白的G位点特异性识别环二核苷酸 | 第64-65页 |
5.5 讨论 | 第65-69页 |
全文总结 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-75页 |
致谢 | 第75-77页 |
硕士期间发表的学术论文 | 第77-79页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第79页 |