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棉花多酚氧化酶GhPPO对棉铃虫取食应答反应

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
图目录第13-14页
英文縮略表第14-15页
第一章 文献综述第15-23页
    1.1 植物对植食性昆虫的防御反应第15-17页
        1.1.1 植物的防御反应类型第15-16页
        1.1.2 昆虫激发子的种类及作用第16-17页
    1.2 昆虫对植物防御反应的适应第17页
    1.3 植物多酚氧化酶的研究进展第17-22页
        1.3.1 PPO的生化作用第18-19页
        1.3.2 植物中的PPO及其诱导抗虫性第19-21页
        1.3.3 PPO的防御性功能已在转基因植物中得到证明第21页
        1.3.4 PPO对昆虫的活性:作用机制及局限第21-22页
        1.3.5 棉花PPO对昆虫取食的应答反应第22页
    1.4 研究目的、意义及研究内容第22-23页
第二章 机械损伤对棉花叶片PPO表达量及活性的影响第23-31页
    2.1 材料与方法第23-27页
        2.1.1 植物材料第23页
        2.1.2 处理方法第23页
        2.1.3 仪器设备、试剂及试剂盒第23页
        2.1.4 总RNA提取第23-25页
        2.1.5 RNA纯度及浓度检测第25页
        2.1.6 cDNA合成第25页
        2.1.7 引物合成第25-26页
        2.1.8 荧光定量PCR反应第26-27页
        2.1.9 荧光定量数据处理第27页
        2.1.10 PPO酶活性测定第27页
    2.2 结果与分析第27-30页
        2.2.1 RNA的提取第27-28页
        2.2.2 探针可靠性检测第28页
        2.2.3 机械损伤对PPO表达量的影响第28-29页
        2.2.4 机械损伤对PPO活性的影响第29-30页
    2.3 讨论第30-31页
第三章 棉铃虫幼虫取食对棉花叶片PPO表达量及酶活影响第31-36页
    3.1 材料与方法第31-32页
        3.1.1 植物材料第31页
        3.1.2 处理方法第31页
        3.1.3 仪器设备、试剂第31页
        3.1.4 总RNA提取第31页
        3.1.5 RNA纯度及浓度检测第31页
        3.1.6 cDNA合成第31-32页
        3.1.7 引物合成第32页
        3.1.8 荧光定量PCR反应第32页
        3.1.9 PPO酶活性测定第32页
    3.2 结果与分析第32-34页
        3.2.1 棉铃虫幼虫取食对PPO表达量的影响第32-33页
        3.2.2 棉铃虫幼虫取食对PPO活性的影响第33-34页
        3.2.3 不同龄期幼虫取食对PPO表达量及活性的影响第34页
    3.3 讨论第34-36页
第四章 口腔分泌物对棉花PPO表达量及酶活性影响第36-40页
    4.1 材料与方法第36-38页
        4.1.1 昆虫材料第36页
        4.1.2 口腔反吐液的收集第36页
        4.1.3 植物材料第36页
        4.1.4 处理方法第36-37页
        4.1.5 仪器设备第37页
        4.1.6 总RNA提取第37页
        4.1.7 RNA浓度及纯度检测第37页
        4.1.8 cDNA合成第37页
        4.1.9 引物合成第37页
        4.1.10 荧光定量PCR反应第37页
        4.1.11 PPO酶活性测定第37-38页
    4.2 结果与分析第38页
    4.3 讨论第38-40页
第五章 对茉莉酸信号途径的影响第40-54页
    5.1 材料与方法第40-43页
        5.1.1 总RNA提取第40页
        5.1.2 AOS和COI1基因的来源第40-41页
        5.1.3 PCR产物纯化第41页
        5.1.4 连接T载体第41-42页
        5.1.5 转化第42页
        5.1.6 阳性重组子鉴定第42页
        5.1.7 测序第42页
        5.1.8 定量引物第42-43页
        5.1.9 荧光定量PCR反应第43页
    5.2 结果与分析第43-52页
        5.2.1 AOS和COI1基因验证第43页
        5.2.2 序列比对第43-50页
        5.2.3 棉铃虫取食对GhAOS和GhGOl 1基因表达量的影响第50-52页
    5.3 讨论第52-54页
第六章 多酚氧化酶的体外表达第54-60页
    6.1 材料与方法第54-57页
        6.1.1 供试材料第54页
        6.1.2 试剂配制第54-55页
        6.1.3 原核表达载体构建第55-56页
        6.1.4 GhPPO的诱导表达第56页
        6.1.5 SDS-PAGE检测第56-57页
    6.2 结果与分析第57-59页
        6.2.1 原核表达载体构建第57-58页
        6.2.2 重组载体的原核表达第58-59页
    6.3 讨论第59-60页
第七章 全文总结第60-61页
参考文献第61-70页
致谢第70-71页
作者简历第71页

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