摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
图目录 | 第13-14页 |
英文縮略表 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-23页 |
1.1 植物对植食性昆虫的防御反应 | 第15-17页 |
1.1.1 植物的防御反应类型 | 第15-16页 |
1.1.2 昆虫激发子的种类及作用 | 第16-17页 |
1.2 昆虫对植物防御反应的适应 | 第17页 |
1.3 植物多酚氧化酶的研究进展 | 第17-22页 |
1.3.1 PPO的生化作用 | 第18-19页 |
1.3.2 植物中的PPO及其诱导抗虫性 | 第19-21页 |
1.3.3 PPO的防御性功能已在转基因植物中得到证明 | 第21页 |
1.3.4 PPO对昆虫的活性:作用机制及局限 | 第21-22页 |
1.3.5 棉花PPO对昆虫取食的应答反应 | 第22页 |
1.4 研究目的、意义及研究内容 | 第22-23页 |
第二章 机械损伤对棉花叶片PPO表达量及活性的影响 | 第23-31页 |
2.1 材料与方法 | 第23-27页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 处理方法 | 第23页 |
2.1.3 仪器设备、试剂及试剂盒 | 第23页 |
2.1.4 总RNA提取 | 第23-25页 |
2.1.5 RNA纯度及浓度检测 | 第25页 |
2.1.6 cDNA合成 | 第25页 |
2.1.7 引物合成 | 第25-26页 |
2.1.8 荧光定量PCR反应 | 第26-27页 |
2.1.9 荧光定量数据处理 | 第27页 |
2.1.10 PPO酶活性测定 | 第27页 |
2.2 结果与分析 | 第27-30页 |
2.2.1 RNA的提取 | 第27-28页 |
2.2.2 探针可靠性检测 | 第28页 |
2.2.3 机械损伤对PPO表达量的影响 | 第28-29页 |
2.2.4 机械损伤对PPO活性的影响 | 第29-30页 |
2.3 讨论 | 第30-31页 |
第三章 棉铃虫幼虫取食对棉花叶片PPO表达量及酶活影响 | 第31-36页 |
3.1 材料与方法 | 第31-32页 |
3.1.1 植物材料 | 第31页 |
3.1.2 处理方法 | 第31页 |
3.1.3 仪器设备、试剂 | 第31页 |
3.1.4 总RNA提取 | 第31页 |
3.1.5 RNA纯度及浓度检测 | 第31页 |
3.1.6 cDNA合成 | 第31-32页 |
3.1.7 引物合成 | 第32页 |
3.1.8 荧光定量PCR反应 | 第32页 |
3.1.9 PPO酶活性测定 | 第32页 |
3.2 结果与分析 | 第32-34页 |
3.2.1 棉铃虫幼虫取食对PPO表达量的影响 | 第32-33页 |
3.2.2 棉铃虫幼虫取食对PPO活性的影响 | 第33-34页 |
3.2.3 不同龄期幼虫取食对PPO表达量及活性的影响 | 第34页 |
3.3 讨论 | 第34-36页 |
第四章 口腔分泌物对棉花PPO表达量及酶活性影响 | 第36-40页 |
4.1 材料与方法 | 第36-38页 |
4.1.1 昆虫材料 | 第36页 |
4.1.2 口腔反吐液的收集 | 第36页 |
4.1.3 植物材料 | 第36页 |
4.1.4 处理方法 | 第36-37页 |
4.1.5 仪器设备 | 第37页 |
4.1.6 总RNA提取 | 第37页 |
4.1.7 RNA浓度及纯度检测 | 第37页 |
4.1.8 cDNA合成 | 第37页 |
4.1.9 引物合成 | 第37页 |
4.1.10 荧光定量PCR反应 | 第37页 |
4.1.11 PPO酶活性测定 | 第37-38页 |
4.2 结果与分析 | 第38页 |
4.3 讨论 | 第38-40页 |
第五章 对茉莉酸信号途径的影响 | 第40-54页 |
5.1 材料与方法 | 第40-43页 |
5.1.1 总RNA提取 | 第40页 |
5.1.2 AOS和COI1基因的来源 | 第40-41页 |
5.1.3 PCR产物纯化 | 第41页 |
5.1.4 连接T载体 | 第41-42页 |
5.1.5 转化 | 第42页 |
5.1.6 阳性重组子鉴定 | 第42页 |
5.1.7 测序 | 第42页 |
5.1.8 定量引物 | 第42-43页 |
5.1.9 荧光定量PCR反应 | 第43页 |
5.2 结果与分析 | 第43-52页 |
5.2.1 AOS和COI1基因验证 | 第43页 |
5.2.2 序列比对 | 第43-50页 |
5.2.3 棉铃虫取食对GhAOS和GhGOl 1基因表达量的影响 | 第50-52页 |
5.3 讨论 | 第52-54页 |
第六章 多酚氧化酶的体外表达 | 第54-60页 |
6.1 材料与方法 | 第54-57页 |
6.1.1 供试材料 | 第54页 |
6.1.2 试剂配制 | 第54-55页 |
6.1.3 原核表达载体构建 | 第55-56页 |
6.1.4 GhPPO的诱导表达 | 第56页 |
6.1.5 SDS-PAGE检测 | 第56-57页 |
6.2 结果与分析 | 第57-59页 |
6.2.1 原核表达载体构建 | 第57-58页 |
6.2.2 重组载体的原核表达 | 第58-59页 |
6.3 讨论 | 第59-60页 |
第七章 全文总结 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简历 | 第71页 |