| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第13-23页 |
| 1.1 菊花白色锈病研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 DREB转录因子的研究进展 | 第14-19页 |
| 1.3 候选基因功能分析的方法 | 第19-21页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 菊花CmDREBa-2转录因子基因的克隆及生物信息学分析 | 第23-35页 |
| 2.1 试验材料、试剂及仪器 | 第23页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第23页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 材料处理 | 第23页 |
| 2.2.2 菊花叶片总RNA的提取 | 第23页 |
| 2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第23-24页 |
| 2.2.4 转录组序列验证 | 第24-26页 |
| 2.2.5 5’RACE试验 | 第26-28页 |
| 2.2.6 3’RACE试验 | 第28页 |
| 2.2.7 基因全长拼接,ORF预测结果以及结果验证 | 第28页 |
| 2.2.8 生物信息学分析 | 第28-29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-34页 |
| 2.3.1 菊花总RNA提取质量 | 第29页 |
| 2.3.2 CmDREBa-2基因的克隆 | 第29-30页 |
| 2.3.3 CmDREBa-2基因序列特征分析 | 第30-31页 |
| 2.3.4 CmDREBa-2基因编码蛋白的序列同源性比较 | 第31-32页 |
| 2.3.5 CmDREBa-2蛋白的二级结构与级维结构分析 | 第32-33页 |
| 2.3.6 CmDREBa-2蛋白分子的系统进化树 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 菊花CmDREBa-2基因的表达分析 | 第35-42页 |
| 3.1 试验材料、试剂与仪器 | 第35页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第35页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第35页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第35页 |
| 3.2 试验方法 | 第35-36页 |
| 3.2.1 材料处理 | 第35-36页 |
| 3.2.2 菊花总RNA的提取 | 第36页 |
| 3.2.3 cDNA第一链的合成 | 第36页 |
| 3.2.4 引物的设计与合成 | 第36页 |
| 3.2.5 实时荧光定量(qPCR) | 第36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-41页 |
| 3.3.1 CmDREBa-2基因组织特异性表达分析 | 第36-37页 |
| 3.3.2 CmDREBa-2在白色锈病病原菌诱导下表达特异性分析 | 第37页 |
| 3.3.3 CmDREBa-2在SA、MeJA和ETH诱导下表达特异性分析 | 第37-39页 |
| 3.3.4 CmDREBa-2在非生物胁迫条件下的表达分析 | 第39-41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 菊花CmDREBa-2基因相关载体的构建 | 第42-50页 |
| 4.1 试验材料、试剂与仪器 | 第42页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第42页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第42页 |
| 4.1.3 试验仪器 | 第42页 |
| 4.2 试验方法 | 第42-46页 |
| 4.2.1 菊花总RNA的提取和cDNA第一条链的合成 | 第42页 |
| 4.2.2 超表达载体构建相关引物设计 | 第42-43页 |
| 4.2.3 植物超表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 4.2.4 农杆菌感受态的制备及重组质粒的转化 | 第44-45页 |
| 4.2.5 干扰片段的克隆 | 第45页 |
| 4.2.6 植物沉默载体的构建 | 第45-46页 |
| 4.3 结果与分析 | 第46-48页 |
| 4.3.1 CmDREBa-2基因超表达载体的构建 | 第46-47页 |
| 4.3.2 过表达载体pBI121-CmDREBa-2冻融法转化农杆菌 | 第47页 |
| 4.3.3 CmDREBa-2基因干扰载体的构建 | 第47-48页 |
| 4.4 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读学位期间发表文章 | 第61-62页 |
