| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 Homeobox基因及其功能的多样性 | 第11-15页 |
| 1.1 Homeobox基因的由来 | 第11页 |
| 1.2 Homeobox基因的结构和进化 | 第11-12页 |
| 1.3 Homeobox基因在不同物种中的功能 | 第12-15页 |
| 1.3.1 动物中的Homeobox基因 | 第12-13页 |
| 1.3.2 植物中的Homeobox基因 | 第13-14页 |
| 1.3.3 菌物中的Homeobox基因 | 第14-15页 |
| 2 禾谷镰刀菌研究概况 | 第15-19页 |
| 2.1 禾谷镰刀菌引起严重的小麦赤霉病 | 第15-16页 |
| 2.2 禾谷镰刀菌的特征和生活史 | 第16页 |
| 2.3 禾谷镰刀菌分子遗传学的研究进展 | 第16-19页 |
| 2.3.1 毒素合成过程中的分子生物学研究 | 第16-17页 |
| 2.3.2 功能基因组学的研究 | 第17-19页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-36页 |
| 1 实验材料 | 第21-25页 |
| 1.1 供试菌株 | 第21页 |
| 1.2 致病性鉴定材料 | 第21页 |
| 1.3 质体载体 | 第21-24页 |
| 1.4 各类培养基、抗生素及生化试剂 | 第24-25页 |
| 1.4.1 培养基 | 第24-25页 |
| 1.4.2 各类抗生素 | 第25页 |
| 1.4.3 生化试剂 | 第25页 |
| 2 实验方法 | 第25-36页 |
| 2.1 禾谷镰刀菌中Homeobox基因的生物信息学分析 | 第25-26页 |
| 2.1.1 禾谷镰刀菌中Homeobox蛋白序列的获得 | 第25-26页 |
| 2.1.2 Homeodomain蛋白不同结构域的分析 | 第26页 |
| 2.1.3 同源异型盒结构域序列的比对 | 第26页 |
| 2.1.4 蛋白质理化性质、空间结构和在生物体中的定位分析 | 第26页 |
| 2.1.5 真核生物中Homeodomain蛋白的演化关系分析 | 第26页 |
| 2.2 禾谷镰刀菌基因组DNA的快速提取及质量检测 | 第26-27页 |
| 2.3 DNA琼脂糖电泳 | 第27页 |
| 2.4 PCR扩增 | 第27-28页 |
| 2.5 PCR产物的胶回收 | 第28页 |
| 2.6 PCR产物的TA克隆 | 第28页 |
| 2.7 Escherichia coli DH5α感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| 2.8 感受态细胞的转化 | 第29页 |
| 2.9 质粒DNA的提取 | 第29页 |
| 2.10 质粒酶切与连接 | 第29-30页 |
| 2.11 禾谷镰刀菌中13个Homeobox基因敲除载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.12 FgHTF8互补载体的构建 | 第31页 |
| 2.13 FgHTF5-GFP和FgHTF13-GFP融合互补载体的构建 | 第31页 |
| 2.14 禾谷镰刀菌原生质体制备和转化 | 第31-32页 |
| 2.15 稻瘟病菌原生质体制备和转化 | 第32页 |
| 2.16 FgHTF5和FgHTF8基因的双敲除 | 第32-33页 |
| 2.17 菌落生长速度测定 | 第33页 |
| 2.18 产孢量统计 | 第33页 |
| 2.19 孢子和菌丝形态观察 | 第33-34页 |
| 2.20 孢子萌发率测定 | 第34页 |
| 2.21 禾谷镰刀菌有性交配 | 第34页 |
| 2.22 小麦离体水培单花注射接种 | 第34-35页 |
| 2.23 拟南芥喷雾接种 | 第35页 |
| 2.24 小麦胚芽鞘接种 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-61页 |
| 1 生物信息学结果及分析 | 第36-42页 |
| 1.1 禾谷镰刀菌Homeobox基因的获得及蛋白结构域分析 | 第36-37页 |
| 1.2 禾谷镰刀菌Homeodomain蛋白的同源异型盒结构域比较分析 | 第37-39页 |
| 1.3 禾谷镰刀菌Homeodomain蛋白的理化特性分析 | 第39-40页 |
| 1.4 禾谷镰刀菌Homeodomain蛋白的系统进化分析 | 第40-42页 |
| 2 禾谷镰刀菌中Homeobox基因的功能分析 | 第42-59页 |
| 2.1 禾谷镰刀菌Fghtf基因敲除突变体的筛选与鉴定 | 第42-43页 |
| 2.2 Fghtf基因缺失突变体对禾谷镰刀菌营养生长、产孢、有性生殖及致病性的影响 | 第43-46页 |
| 2.3 Fghtf8突变体菌丝的分枝增多,但不影响致病性 | 第46-49页 |
| 2.4 FgHtf8互补菌株的筛选及其表型分析 | 第49-50页 |
| 2.5 Fghtf5突变体无法从分生孢子梗上分化出分生孢子,所产生的分生孢子多为畸形 | 第50-55页 |
| 2.6 FgHtf5互补菌株的筛选及其表型分析 | 第55-56页 |
| 2.7 FgHTF8和FgHTF5基因的双敲除鉴定和表型分析 | 第56-57页 |
| 2.8 FgHtf13不同时间段的细胞核定位观察 | 第57-59页 |
| 3 禾谷镰刀菌Homeobox基因异源互补稻瘟病菌突变体分析 | 第59-61页 |
| 3.1 FgHTF8能够异源互补稻瘟病菌Mohox1的生长缺陷 | 第59-61页 |
| 第四章 全文总结讨论及后续研究 | 第61-65页 |
| 1 全文总结讨论 | 第61-63页 |
| 2 后续研究 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 附录1 本研究中所采用的引物序列及其用途 | 第75-80页 |
| 附录2 攻硕期间发表的论文 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
