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苏云金芽胞杆菌对家蚕杀虫活性中肠道菌MB1的增效作用

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
缩略语第11-12页
1 前言第12-28页
    1.1 苏云金芽胞杆菌简介第12页
    1.2 苏云金芽胞杆菌的分类第12-13页
    1.3 苏云金芽胞杆菌Cry蛋白第13-15页
        1.3.1 Cry蛋白及其多样性第13-14页
        1.3.2 Cry蛋白的结构第14-15页
    1.4 苏云金芽胞杆菌的杀虫机制第15-18页
        1.4.1 Cry蛋白的受体第15-16页
        1.4.2 Cry蛋白的作用机制第16-18页
    1.5 苏云金芽胞杆菌的增效途径第18-24页
        1.5.1 苏云金芽胞杆菌的增效物质第18-22页
            1.5.1.1 丝氨酸蛋白酶抑制剂第18-19页
            1.5.1.2 几丁质酶第19页
            1.5.1.3 Cyt蛋白第19-20页
            1.5.1.4 营养期杀虫蛋白第20页
            1.5.1.5 钙黏蛋白受体肽CR12-MPED第20-21页
            1.5.1.6 辅助蛋白P19、P20、P21第21-22页
        1.5.2 cry基因的修饰改造第22-24页
            1.5.2.1 定点突变第22页
            1.5.2.2 Cry蛋白杂交第22-23页
            1.5.2.3 引入特异的蛋白酶酶切位点第23页
            1.5.2.4 去除Cry蛋白的部分小区域第23-24页
    1.6 昆虫肠道共生菌第24-27页
        1.6.1 昆虫肠道共生菌对昆虫的作用第25页
        1.6.2 昆虫肠道共生菌对Bt杀虫活性的影响第25-27页
            1.6.2.1 昆虫肠道共生菌对Bt杀虫活性的增效作用第26页
            1.6.2.2 昆虫肠道共生菌对Bt杀虫活性的抑制作用第26-27页
    1.7 研究目的及意义第27-28页
2 材料与方法第28-38页
    2.1 材料第28-30页
        2.1.1 菌株第28页
        2.1.2 PCR引物第28页
        2.1.3 培养基及人工饲料第28-29页
        2.1.4 抗生素及其工作浓度第29页
        2.1.5 供试昆虫第29页
        2.1.6 试剂第29页
        2.1.7 仪器第29-30页
    2.2 实验方法第30-38页
        2.2.1 家蚕幼虫的饲养第30页
        2.2.2 无菌家蚕品系的建立第30-31页
            2.2.2.1 家蚕的抗生素饲喂第30页
            2.2.2.2 蚕卵体表消毒第30-31页
        2.2.3 无菌家蚕肠道微生物的检测第31-32页
            2.2.3.1 可培养方法检测第31页
            2.2.3.2 不可培养方法检测第31-32页
        2.2.4 对Bt杀虫活性具有增效作用的家蚕肠道菌的筛选第32-35页
            2.2.4.1 Cry原毒素的制备第32-33页
            2.2.4.2 Cry活化蛋白的制备第33页
            2.2.4.3 Cry蛋白的浓度测定第33页
            2.2.4.4 Cry蛋白的SDS-PAGE检测第33-34页
            2.2.4.5 对Bt杀虫活性具有增效作用的肠道菌筛选第34-35页
        2.2.5 肠道菌MB1和Bt芽胞对Cry蛋白协同作用的测定第35-36页
        2.2.6 肠道菌MB1对Bt杀虫活性增效作用机制第36-38页
            2.2.6.1 肠道菌在家蚕体内的定殖第36页
            2.2.6.2 肠道菌MB1对Cry活化蛋白杀虫活性影响的生物测定第36-37页
            2.2.6.3 血淋巴液中肠道菌MB1和BMB171的体外增殖第37页
            2.2.6.4 注射肠道菌MB1和BMB171对家蚕的影响第37-38页
3 结果与讨论第38-53页
    3.1 无菌家蚕品系的建立第38-39页
    3.2 对Cry蛋白杀虫活性具有增效作用的肠道菌筛选第39-47页
        3.2.1 Cry蛋白样品的测定第39-40页
        3.2.2 肠道菌对Cry蛋白杀虫活性的影响第40-42页
        3.2.3 抗生素对Cry蛋白杀虫活性的影响第42-44页
        3.2.4 肠道菌对Bt胞晶混合物杀虫活性的影响第44-45页
        3.2.5 肠道菌MB1和Bt芽胞对Cry蛋白杀虫活性的协同作用第45-47页
    3.3 肠道菌MB1对Bt杀虫活性增效作用机制第47-51页
        3.3.1 肠道菌在家蚕体内的定殖第47-48页
        3.3.2 肠道菌MB1对Cry活化蛋白杀虫活性的影响第48-49页
        3.3.3 血淋巴液中肠道菌MB1和BMB171的体外增殖第49页
        3.3.4 注射肠道菌MB1和BMB171对家蚕的影响第49-51页
    3.4 讨论第51-53页
参考文献第53-62页
致谢第62页

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