摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略语 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-28页 |
1.1 苏云金芽胞杆菌简介 | 第12页 |
1.2 苏云金芽胞杆菌的分类 | 第12-13页 |
1.3 苏云金芽胞杆菌Cry蛋白 | 第13-15页 |
1.3.1 Cry蛋白及其多样性 | 第13-14页 |
1.3.2 Cry蛋白的结构 | 第14-15页 |
1.4 苏云金芽胞杆菌的杀虫机制 | 第15-18页 |
1.4.1 Cry蛋白的受体 | 第15-16页 |
1.4.2 Cry蛋白的作用机制 | 第16-18页 |
1.5 苏云金芽胞杆菌的增效途径 | 第18-24页 |
1.5.1 苏云金芽胞杆菌的增效物质 | 第18-22页 |
1.5.1.1 丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第18-19页 |
1.5.1.2 几丁质酶 | 第19页 |
1.5.1.3 Cyt蛋白 | 第19-20页 |
1.5.1.4 营养期杀虫蛋白 | 第20页 |
1.5.1.5 钙黏蛋白受体肽CR12-MPED | 第20-21页 |
1.5.1.6 辅助蛋白P19、P20、P21 | 第21-22页 |
1.5.2 cry基因的修饰改造 | 第22-24页 |
1.5.2.1 定点突变 | 第22页 |
1.5.2.2 Cry蛋白杂交 | 第22-23页 |
1.5.2.3 引入特异的蛋白酶酶切位点 | 第23页 |
1.5.2.4 去除Cry蛋白的部分小区域 | 第23-24页 |
1.6 昆虫肠道共生菌 | 第24-27页 |
1.6.1 昆虫肠道共生菌对昆虫的作用 | 第25页 |
1.6.2 昆虫肠道共生菌对Bt杀虫活性的影响 | 第25-27页 |
1.6.2.1 昆虫肠道共生菌对Bt杀虫活性的增效作用 | 第26页 |
1.6.2.2 昆虫肠道共生菌对Bt杀虫活性的抑制作用 | 第26-27页 |
1.7 研究目的及意义 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-38页 |
2.1 材料 | 第28-30页 |
2.1.1 菌株 | 第28页 |
2.1.2 PCR引物 | 第28页 |
2.1.3 培养基及人工饲料 | 第28-29页 |
2.1.4 抗生素及其工作浓度 | 第29页 |
2.1.5 供试昆虫 | 第29页 |
2.1.6 试剂 | 第29页 |
2.1.7 仪器 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-38页 |
2.2.1 家蚕幼虫的饲养 | 第30页 |
2.2.2 无菌家蚕品系的建立 | 第30-31页 |
2.2.2.1 家蚕的抗生素饲喂 | 第30页 |
2.2.2.2 蚕卵体表消毒 | 第30-31页 |
2.2.3 无菌家蚕肠道微生物的检测 | 第31-32页 |
2.2.3.1 可培养方法检测 | 第31页 |
2.2.3.2 不可培养方法检测 | 第31-32页 |
2.2.4 对Bt杀虫活性具有增效作用的家蚕肠道菌的筛选 | 第32-35页 |
2.2.4.1 Cry原毒素的制备 | 第32-33页 |
2.2.4.2 Cry活化蛋白的制备 | 第33页 |
2.2.4.3 Cry蛋白的浓度测定 | 第33页 |
2.2.4.4 Cry蛋白的SDS-PAGE检测 | 第33-34页 |
2.2.4.5 对Bt杀虫活性具有增效作用的肠道菌筛选 | 第34-35页 |
2.2.5 肠道菌MB1和Bt芽胞对Cry蛋白协同作用的测定 | 第35-36页 |
2.2.6 肠道菌MB1对Bt杀虫活性增效作用机制 | 第36-38页 |
2.2.6.1 肠道菌在家蚕体内的定殖 | 第36页 |
2.2.6.2 肠道菌MB1对Cry活化蛋白杀虫活性影响的生物测定 | 第36-37页 |
2.2.6.3 血淋巴液中肠道菌MB1和BMB171的体外增殖 | 第37页 |
2.2.6.4 注射肠道菌MB1和BMB171对家蚕的影响 | 第37-38页 |
3 结果与讨论 | 第38-53页 |
3.1 无菌家蚕品系的建立 | 第38-39页 |
3.2 对Cry蛋白杀虫活性具有增效作用的肠道菌筛选 | 第39-47页 |
3.2.1 Cry蛋白样品的测定 | 第39-40页 |
3.2.2 肠道菌对Cry蛋白杀虫活性的影响 | 第40-42页 |
3.2.3 抗生素对Cry蛋白杀虫活性的影响 | 第42-44页 |
3.2.4 肠道菌对Bt胞晶混合物杀虫活性的影响 | 第44-45页 |
3.2.5 肠道菌MB1和Bt芽胞对Cry蛋白杀虫活性的协同作用 | 第45-47页 |
3.3 肠道菌MB1对Bt杀虫活性增效作用机制 | 第47-51页 |
3.3.1 肠道菌在家蚕体内的定殖 | 第47-48页 |
3.3.2 肠道菌MB1对Cry活化蛋白杀虫活性的影响 | 第48-49页 |
3.3.3 血淋巴液中肠道菌MB1和BMB171的体外增殖 | 第49页 |
3.3.4 注射肠道菌MB1和BMB171对家蚕的影响 | 第49-51页 |
3.4 讨论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-62页 |
致谢 | 第62页 |