| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第1章 绪论 | 第17-20页 |
| 技术路线 | 第19-20页 |
| 第2章 新抗原人B细胞表位的预测合成及10种蛋白抗原的克隆表达纯化 | 第20-57页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-26页 |
| 2.1.1 菌株及载体的来源 | 第20-21页 |
| 2.1.2 主要试剂及材料 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第22-24页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.1.5 主要生物信息学分析软件 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-37页 |
| 2.2.1 结核分枝杆菌新抗原的筛选、B细胞表位的预测优选和合成以及已知特异抗原的筛选 | 第26页 |
| 2.2.2 重组质粒的克隆表达 | 第26-34页 |
| 2.2.3 重组蛋白大量的诱导表达、鉴定与纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.4 纯化包涵体的透析复性 | 第35-36页 |
| 2.2.5 重组蛋白浓度的测定 | 第36-37页 |
| 2.3 实验结果 | 第37-51页 |
| 2.3.1 新蛋白B细胞表位的预测、筛选及多肽的合成 | 第37-38页 |
| 2.3.2 特异蛋白抗原编码基因中人T/B细胞表位的分布情况 | 第38-39页 |
| 2.3.3 目的基因的PCR扩增 | 第39页 |
| 2.3.4 重组质粒的构建 | 第39-40页 |
| 2.3.5 PCR阳性菌落的鉴定 | 第40-42页 |
| 2.3.6 重组质粒的双酶切鉴定 | 第42页 |
| 2.3.7 重组质粒目的基因的测序结果 | 第42-45页 |
| 2.3.8 重组质粒的小量诱导表达 | 第45-47页 |
| 2.3.9 大量诱导后表达形式的验证 | 第47-48页 |
| 2.3.10 10种重组蛋白的纯化 | 第48-49页 |
| 2.3.11 BCA法蛋白浓度的测定结果 | 第49-51页 |
| 2.4 讨论 | 第51-57页 |
| 第3章 蛋白抗原及多肽的血清学评价 | 第57-71页 |
| 3.1 实验材料 | 第57-58页 |
| 3.1.1 血清标本来源 | 第57页 |
| 3.1.2 试剂及材料 | 第57页 |
| 3.1.3 主要试剂的配制 | 第57-58页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第58页 |
| 3.1.5 分析软件 | 第58页 |
| 3.2 血清学验证方法 | 第58-61页 |
| 3.2.1 棋盘滴定确定目的蛋白、多肽及血清的最佳稀释度 | 第58-59页 |
| 3.2.2 确定最佳二抗稀释度 | 第59页 |
| 3.2.3 待测血清标本的检测 | 第59页 |
| 3.2.4 数据分析 | 第59-61页 |
| 3.3 实验结果 | 第61-68页 |
| 3.3.1 蛋白抗原及多肽最佳包被浓度及血清稀释度 | 第61-63页 |
| 3.3.2 二抗的最佳稀释度 | 第63页 |
| 3.3.3 蛋白抗原及多肽检测待测血清的ELISA结果 | 第63-68页 |
| 3.4 讨论 | 第68-71页 |
| 第4章 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 文献综述 B细胞抗原表位的研究及在结核分枝杆菌血清学诊断中的应用 | 第76-90页 |
| 参考文献 | 第84-90页 |
| 作者攻读学位期间的学术成果 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
