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马流产沙门氏菌鞭毛蛋白fljB的原核表达及免疫原性分析

摘要第4-5页
Abstract第5页
英文缩略词表第9-10页
第1章 绪论第10-22页
    1.1 沙门氏菌的介绍第10-11页
    1.2 马流产沙门氏菌病的症状及流行病学特点第11-12页
    1.3 马流产沙门氏菌特征第12页
    1.4 马流产沙门氏菌毒力和致病性第12-15页
        1.4.1 毒力岛第12-14页
        1.4.2 内毒素和外毒素第14页
        1.4.3 菌毛第14-15页
    1.5 沙门氏菌鞭毛蛋白第15-17页
    1.6 鞭毛蛋白的免疫原性第17-19页
    1.7 马流产沙门氏菌病的预防和控制第19-21页
    1.8 研究意义第21-22页
第2章 马流产沙门氏菌鞭毛蛋白fljB的克隆及序列分析第22-30页
    2.1 材料第22-23页
        2.1.1 菌种与质粒第22页
        2.1.2 主要试剂第22-23页
        2.1.3 主要仪器第23页
    2.2 实验方法第23-27页
        2.2.1 细菌的培养第23页
        2.2.2 分离菌基因组的提取第23-24页
        2.2.3 引物的合成第24页
        2.2.4 聚合酶链式反应(PCR)第24页
        2.2.5 fljB的PCR产物回收第24-25页
        2.2.6 载体质粒的提取第25页
        2.2.7 pET-28a-fljB表达载体构建第25-26页
        2.2.8 细菌的转化第26页
        2.2.9 pET-28a-fljB重组质粒的鉴定第26页
        2.2.10 XJMS-97株fljB基因序列分析第26-27页
    2.3 实验结果第27-28页
        2.3.1 fljB基因的PCR扩增第27页
        2.3.2 重组质粒pET-28a-fljB双酶切鉴定第27页
        2.3.3 不同沙门氏菌fljB的同源性分析和遗传进化分析第27-28页
    2.4 讨论第28-30页
第3章 马流产沙门氏菌鞭毛蛋白fljB的原核表达与纯化第30-36页
    3.1 材料第30页
        3.1.1 菌株与质粒第30页
        3.1.2 主要试剂第30页
    3.2 实验方法第30-33页
        3.2.1 fljB重组体的转化第30-31页
        3.2.2 fljB蛋白的诱导表达、纯化及诱导时间的优化第31页
        3.2.3 fljB重组蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第31-32页
        3.2.4 fljB目的蛋白的纯化第32页
        3.2.5 Western blotting第32-33页
    3.3 实验结果第33-35页
        3.3.1 fljB重组蛋白表达产物的SDS-PAGE检测结果第33页
        3.3.2 目的蛋白的纯化结果第33-34页
        3.3.3 Western blotting分析结果第34-35页
    3.4 讨论第35-36页
第4章 马流产沙门氏菌鞭毛蛋白fljB多克隆抗体的制备第36-41页
    4.1 材料第36-37页
        4.1.1 蛋白及实验动物第36页
        4.1.2 主要试剂第36页
        4.1.3 主要仪器第36-37页
    4.2 实验方法第37-38页
        4.2.1 抗原乳化第37页
        4.2.2 实验动物免疫第37页
        4.2.3 免疫小鼠血清中fljB抗体的检测第37-38页
    4.3 实验结果第38-39页
    4.4 讨论第39-41页
第5章 结论第41-42页
参考文献第42-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页

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