中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
前言 | 第9-13页 |
一.急性髓细胞白血病(Acute myeloid leukemia, AML)及其多药耐药(multidrug resistance, MDR) | 第9页 |
二. 鞘糖脂(glycosphingolipids)与急性髓细胞白血病 | 第9-11页 |
三. 几个鞘糖脂及糖基转移酶与多药耐药 | 第11-12页 |
四. 鞘糖脂参与的耐药分子机制 | 第12-13页 |
材料与方法 | 第13-24页 |
一、 实验材料 | 第13-15页 |
二、 实验方法 | 第15-24页 |
1. 细胞培养 | 第15页 |
2. 总鞘糖脂的提取 | 第15页 |
3. 鞘糖脂的酸中性分离 | 第15-16页 |
4. 鞘糖脂的甲基化处理 | 第16页 |
5. 鞘糖脂的薄层层析(TLC)分析 | 第16页 |
6. 鞘糖脂的质谱分析 | 第16页 |
7. 提取细胞RNA | 第16-17页 |
8. 逆转录反应 | 第17页 |
9. 实时荧光定量PCR反应 | 第17-18页 |
10. 过表达质粒构建 | 第18-19页 |
11. 普通PCR反应 | 第19页 |
12. 割胶回收 | 第19页 |
13. PCR产物纯化回收 | 第19-20页 |
14. 感受态细菌DH5α的制备 | 第20页 |
15. 连接液或质粒转化 | 第20页 |
16. 质粒DNA的小量抽提 | 第20-21页 |
17. 质粒DNA的中量制备 | 第21页 |
18. 过表达质粒或si RNA电转染耐药细胞HL60/ADR | 第21-22页 |
19. 台盼蓝拒染法检测细胞的活性 | 第22页 |
20. CCK-8 检测细胞增殖 | 第22页 |
21. 蛋白质印迹 | 第22-23页 |
22. 免疫荧光实验 | 第23页 |
23. 统计学分析方法 | 第23-24页 |
实验结果 | 第24-39页 |
1) 鞘糖脂及糖基转移酶在耐药细胞HL60/ADR与非耐药细胞HL60 中表达 | 第24-30页 |
2) 糖基转移酶在耐药细胞HL60/ADR与非耐药细胞HL60 中表达 | 第30-31页 |
3) 在耐药细胞中调控鞘糖脂的表达改变耐药性 | 第31-35页 |
4) 调控鞘糖脂变化改变耐药性以影响GEM形成及下游PI3K/Akt及 β-catenin信号通路实现的 | 第35-39页 |
讨论 | 第39-42页 |
小结 | 第42-43页 |
特色与创新 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
综述 鞘脂类在肿瘤耐药中的作用 | 第49-60页 |
参考文献 | 第53-60页 |
附录 | 第60-61页 |
硕士期间发表的论文和专利 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |