| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-18页 |
| 1.1 犬乳腺肿瘤及其研究进展 | 第12页 |
| 1.2 肿瘤细胞的体外培养 | 第12-13页 |
| 1.3 肿瘤细胞凋亡及研究进展 | 第13页 |
| 1.4 细胞凋亡途径 | 第13-14页 |
| 1.5 Akt、NF-kB、Bcl-2 与肿瘤的关系研究现状 | 第14-16页 |
| 1.6 顺铂药物及研究发展 | 第16-17页 |
| 1.7 研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-27页 |
| 2.1 材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第18页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第18页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第19-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-27页 |
| 2.2.1 犬乳腺肿瘤细胞的体外培养 | 第21页 |
| 2.2.2 MTT法检测细胞活力 | 第21-22页 |
| 2.2.3 不同浓度顺铂对犬乳腺肿瘤细胞凋亡检测 | 第22页 |
| 2.2.4 不同浓度顺铂对犬乳腺肿瘤细胞周期检测 | 第22页 |
| 2.2.5 荧光定量PCR检测凋亡相关因子 | 第22-24页 |
| 2.2.6 Western Blot检测凋亡相关因子 | 第24-26页 |
| 2.2.7 实验数据统计与分析 | 第26-27页 |
| 3 实验结果 | 第27-43页 |
| 3.1 顺铂对犬乳腺肿瘤细胞体外增值抑制检测 | 第27-30页 |
| 3.1.1 MTT法犬乳腺肿瘤细胞IC50值检测 | 第27-28页 |
| 3.1.2 MTT比色法检测顺铂对CHMm和CHMp肿瘤细胞活性影响 | 第28-30页 |
| 3.2 顺铂诱导犬乳腺肿瘤细胞凋亡的检测 | 第30-37页 |
| 3.2.1 犬乳腺肿瘤细胞CHMm形态学观察 | 第30-31页 |
| 3.2.2 犬乳腺肿瘤细胞CHMp形态学观察 | 第31-32页 |
| 3.2.3 顺铂作用后CHMm流式细胞凋亡检测 | 第32-33页 |
| 3.2.4 顺铂作用后CHMp细胞流式细胞凋亡检测 | 第33-35页 |
| 3.2.5 CHMm流式细胞周期检测 | 第35-36页 |
| 3.2.6 CHMp流式细胞周期检测 | 第36-37页 |
| 3.3 顺铂对犬乳腺肿瘤中Akt、Nfκb、bcl-2 基因表达影响 | 第37-41页 |
| 3.3.1 顺铂对CHMm中Akt、Nfκb、bcl-2 基因表达影响 | 第37-39页 |
| 3.3.2 顺铂对CHMp中Akt、Nfκb、bcl-2 基因表达影响 | 第39-41页 |
| 3.4 顺铂作用后犬乳腺肿瘤中Akt、Nfκb、bcl-2 蛋白表达检测 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-48页 |
| 4.1 顺铂对犬乳腺肿瘤细胞的细胞毒性作用 | 第43页 |
| 4.2 顺铂对犬乳腺肿瘤细胞的形态影响 | 第43-44页 |
| 4.3 顺铂对犬乳腺肿瘤细胞凋亡和周期的影响 | 第44-45页 |
| 4.4 顺铂对乳腺肿瘤细胞凋亡相关因子的影响 | 第45-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第56页 |