| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 1 实验设备、试剂和材料 | 第12-18页 |
| 1.1 细胞培养 | 第12页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第12-13页 |
| 1.3 主要试剂与实验材料 | 第13-14页 |
| 1.4 主要试剂配制方法 | 第14-18页 |
| 1.4.1 细胞培养基 | 第14页 |
| 1.4.2 磷酸盐缓冲液（PBS） | 第14页 |
| 1.4.3 MTT工作液 | 第14页 |
| 1.4.4 胰酶储备液 | 第14-15页 |
| 1.4.5 胰酶工作液 | 第15页 |
| 1.4.6 30% Acr-Bis | 第15页 |
| 1.4.7 还原性 5×SDS上样缓冲液 | 第15页 |
| 1.4.8 1.0 mol/L Tris·HCl，pH 6.8 | 第15页 |
| 1.4.9 1.0 mol/L Tris·HCl，pH 8.8 | 第15页 |
| 1.4.10 10% 过硫酸铵 | 第15-16页 |
| 1.4.11 10% SDS | 第16页 |
| 1.4.12 2×转移电泳缓冲液 | 第16页 |
| 1.4.13 10×电泳缓冲液 | 第16页 |
| 1.4.14 10×TBS缓冲液 | 第16页 |
| 1.4.15 TBST缓冲液 | 第16页 |
| 1.4.16 氯喹溶液（10 mmol/L） | 第16页 |
| 1.4.17 20% Tween 20 | 第16-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-22页 |
| 2.1 MTT法检测细胞生长抑制率 | 第18页 |
| 2.2 DAPI染色检测细胞核形态变化 | 第18-19页 |
| 2.3 TUNEL法测定细胞的凋亡率 | 第19页 |
| 2.4 间接免疫荧光检测LC3在SMMC-7721细胞的表达 | 第19页 |
| 2.5 Western-Blot检测LC3与p62蛋白表达量 | 第19-21页 |
| 2.5.1 蛋白样品的制备和定量 | 第19-20页 |
| 2.5.2 SDS-PAGE及转移电泳 | 第20-21页 |
| 2.5.3 抗体杂交和发光检测 | 第21页 |
| 2.6 统计学方法 | 第21-22页 |
| 3 实验结果 | 第22-36页 |
| 3.1 11种氟喹诺酮类衍生物对SMMC-7721细胞的生长抑制作用 | 第22-24页 |
| 3.2 HGQ5对SMMC-7721细胞的生长抑制作用 | 第24-25页 |
| 3.3 DAPI染色观察细胞核形态改变 | 第25页 |
| 3.4 TUNEL法测定HGQ5诱导细胞凋亡率 | 第25-26页 |
| 3.5 间接免疫荧光法观察HGQ5对SMMC-7721细胞LC3的影响 | 第26-27页 |
| 3.6 HGQ5对SMMC-7721细胞自噬相关蛋白表达量的影响 | 第27-36页 |
| 3.6.1 HGQ5处理SMMC-7721细胞不同时间LC3与p62蛋白的表达 | 第27-29页 |
| 3.6.2 HGQ5处理SMMC-7721细胞不同时间、不同浓度p62蛋白的表达 | 第29-30页 |
| 3.6.3 自噬抑制剂氯喹对SMMC-7721细胞的生长抑制作用 | 第30-31页 |
| 3.6.4 HGQ5联合氯喹处理SMMC-7721细胞对p62蛋白表达量的影响 | 第31-32页 |
| 3.6.5 HGQ5和HGQ5联合氯喹对SMMC-7721细胞的生长抑制作用 | 第32-33页 |
| 3.6.6 HGQ5和HGQ5联合氯喹对SMMC-7721细胞的凋亡率的影响 | 第33-36页 |
| 4 讨论 | 第36-40页 |
| 5 结论 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 文献综述 拓扑异构酶Ⅱ抑制剂对肿瘤细胞凋亡与自噬的影响 | 第46-58页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 附录A 英文缩略词表 | 第58-60页 |
| 攻读学位期间科研情况 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
