| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1. 引言 | 第9-30页 |
| 1.1 胆固醇结构及其生理功能 | 第9-10页 |
| 1.2 胆固醇在体内的代谢及代谢紊乱而带来的疾病 | 第10-15页 |
| 1.2.1 胆固醇在生物体内的合成与吸收 | 第11-14页 |
| 1.2.2 胆固醇代谢紊乱引起的疾病 | 第14-15页 |
| 1.3 低密度脂蛋白受体 | 第15-26页 |
| 1.3.1 Megalin的结构及功能 | 第15-16页 |
| 1.3.2 ApoE受体蛋白的结构及功能 | 第16页 |
| 1.3.3 VLDLR的结构及功能 | 第16页 |
| 1.3.4 LRP结构及功能 | 第16-17页 |
| 1.3.5 LDLR结构及功能 | 第17-26页 |
| 1.3.5.1 LDLR的结构 | 第17-19页 |
| 1.3.5.2 LDLR在体内的重要功能 | 第19-20页 |
| 1.3.5.3 SREBP对LDLR蛋白表达的调控 | 第20-21页 |
| 1.3.5.4 LDLR被IDOL介导发生降解的过程 | 第21页 |
| 1.3.5.5 IDOL的表达受到LXR的调控 | 第21-22页 |
| 1.3.5.6 IDOL介导LDLR蛋白降解的结构基础 | 第22-23页 |
| 1.3.5.7 IDOL介导LDLR的泛素化与降解 | 第23-24页 |
| 1.3.5.8 PCSK9介导LDLR在溶酶体中的降解 | 第24-26页 |
| 1.4 多克隆抗体的制备 | 第26-28页 |
| 1.4.1 抗原肽段的选取 | 第26-27页 |
| 1.4.2 蛋白的诱导表达以及纯化 | 第27页 |
| 1.4.3 多克隆抗体 | 第27-28页 |
| 1.5 LDLR抗体的制备目的及意义 | 第28-30页 |
| 2. 实验材料和方法 | 第30-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-34页 |
| 2.1.1 材料和试剂 | 第30页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第30页 |
| 2.1.3 细胞系和培养基 | 第30-31页 |
| 2.1.4 PCR引物序列 | 第31页 |
| 2.1.5 实验室试剂配方 | 第31-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-48页 |
| 2.2.1 分子生物学常规方法 | 第34-35页 |
| 2.2.2 感受态的制备 | 第35-36页 |
| 2.2.3 重组质粒构建体系 | 第36-38页 |
| 2.2.4 电转质粒或者连接产物 | 第38-39页 |
| 2.2.5 试剂盒胶回收与质粒小提 | 第39-40页 |
| 2.2.5.1 从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 | 第39页 |
| 2.2.5.2 质粒小提 | 第39-40页 |
| 2.2.6 目的蛋白的原核表达 | 第40-43页 |
| 2.2.6.1 His融合蛋白表达纯化 | 第40-41页 |
| 2.2.6.2 GST融合蛋白表达纯化 | 第41-43页 |
| 2.2.7 免疫动物的饲养与处理 | 第43-44页 |
| 2.2.7.1 多克隆抗体的制备 | 第43-44页 |
| 2.2.7.2 颈动脉取血 | 第44页 |
| 2.2.8 真核表达质粒的转染 | 第44-45页 |
| 2.2.9 细胞裂解液蛋白质的提取及免疫印迹检测 | 第45-46页 |
| 2.2.10 抗体的亲和纯化 | 第46-48页 |
| 3. 实验结果与讨论 | 第48-59页 |
| 3.1 LDLR抗原蛋白区段的选取 | 第48-49页 |
| 3.2 pGEX-6P-1-LDLR-C质粒的构建 | 第49-51页 |
| 3.2.1 扩增LDLR-C片段 | 第49页 |
| 3.2.2 载体、LDLR-C的双酶切与T4酶连 | 第49-51页 |
| 3.3 GST-tag的蛋白纯化 | 第51-52页 |
| 3.4 LDLR抗原蛋白的浓缩 | 第52页 |
| 3.5 LDLR抗原蛋白对免疫动物的免疫 | 第52-53页 |
| 3.6 LDLR抗体检测 | 第53-59页 |
| 4. 分析与讨论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-72页 |
| 附录 | 第72-75页 |
| 1 缩略词表 | 第72-73页 |
| 2 图表列序 | 第73-74页 |
| 3 研究生期间成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-78页 |
