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辣椒疫霉效应分子RXLR23的表达、纯化与晶体结构初步研究

英文缩略词及中文对照表第4-8页
中文摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
1 前言第12-31页
    1.1 辣椒疫霉研究进展第12-14页
        1.1.1 辣椒疫霉的发生规律第12-13页
        1.1.2 辣椒疫霉病害的综合防治第13-14页
    1.2 辣椒疫霉基因组研究第14-15页
    1.3 植物防御反应第15页
    1.4 卵菌效应分子研究第15-22页
        1.4.1 卵菌效应分子的种类和研究第16-22页
    1.5 蛋白表达纯化第22-24页
        1.5.1 表达系统的研究第22页
        1.5.2 蛋白质纯化第22-23页
        1.5.3 蛋白分子量和纯度的测定第23-24页
    1.6 蛋白质晶体学和结构生物学研究第24-29页
        1.6.1 蛋白晶体生长第24-25页
        1.6.2 晶体培养的方法第25-26页
        1.6.3 蛋白质晶体结构解析第26-29页
    1.7 农杆菌介导的瞬时表达第29-30页
    1.8 试验目的及意义第30-31页
2 材料与方法第31-41页
    2.1 试验材料第31-33页
        2.1.1 菌株和载体第31页
        2.1.2 生化试剂第31页
        2.1.3 所需溶液的配置第31-33页
        2.1.4 试验仪器第33页
    2.2 试验方法第33-41页
        2.2.1 辣椒疫霉菌株SD33总RNA提取和cDNA合成第33-34页
        2.2.2 目的基因的克隆第34-35页
        2.2.3 BL21感受态的制备第35-36页
        2.2.4 农杆菌感受态制备和转化第36页
        2.2.5 重组基因的蛋白表达第36-38页
        2.2.6 纯化方法优化第38-39页
        2.2.7 晶体筛选和优化第39页
        2.2.8 Se-Met衍生物蛋白质分离纯化和晶体筛选第39-40页
        2.2.9 胰蛋白酶(Trypsin)酶切的研究第40-41页
3 试验结果第41-57页
    3.1 RXLR23生物信息学分析第41-42页
    3.2 RXLR23蛋白表达纯化第42-44页
    3.3 硒代蛋白的表达纯化第44页
    3.4 RXLR23蛋白晶体筛选和优化第44-46页
    3.5 硒代蛋白的晶体筛选和优化第46-47页
    3.6 胰酶酶切蛋白后的纯化第47-49页
    3.7 N端截短后晶体筛选第49-50页
    3.8 筛选RXLR23和PI3P复合物晶体第50-51页
    3.9 RXLR23蛋白数据收集和结构解析第51-56页
        3.9.1 母体蛋白和硒代蛋白数据收集处理第51-52页
        3.9.2 相位求解第52页
        3.9.3 模型搭建第52-54页
        3.9.4 结构解析和精修第54-56页
    3.10 RXLR23亚细胞定位第56-57页
4 讨论第57-61页
    4.1 RXLR23蛋白二级结构预测以及与其他RXLR效应分子的比对第57-58页
    4.2 RXLR23克隆和载体选择第58页
    4.3 RXLR23蛋白表达纯化分析第58页
    4.4 RXLR23蛋白晶体优化第58-59页
    4.5 数据收集与处理第59页
    4.6 RXLR23蛋白晶体初始结构分析第59-60页
    4.7 RXLR23亚细胞定位分析第60-61页
5 结论第61-62页
参考文献第62-71页
致谢第71页

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