英文缩略词及中文对照表 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-31页 |
1.1 辣椒疫霉研究进展 | 第12-14页 |
1.1.1 辣椒疫霉的发生规律 | 第12-13页 |
1.1.2 辣椒疫霉病害的综合防治 | 第13-14页 |
1.2 辣椒疫霉基因组研究 | 第14-15页 |
1.3 植物防御反应 | 第15页 |
1.4 卵菌效应分子研究 | 第15-22页 |
1.4.1 卵菌效应分子的种类和研究 | 第16-22页 |
1.5 蛋白表达纯化 | 第22-24页 |
1.5.1 表达系统的研究 | 第22页 |
1.5.2 蛋白质纯化 | 第22-23页 |
1.5.3 蛋白分子量和纯度的测定 | 第23-24页 |
1.6 蛋白质晶体学和结构生物学研究 | 第24-29页 |
1.6.1 蛋白晶体生长 | 第24-25页 |
1.6.2 晶体培养的方法 | 第25-26页 |
1.6.3 蛋白质晶体结构解析 | 第26-29页 |
1.7 农杆菌介导的瞬时表达 | 第29-30页 |
1.8 试验目的及意义 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-41页 |
2.1 试验材料 | 第31-33页 |
2.1.1 菌株和载体 | 第31页 |
2.1.2 生化试剂 | 第31页 |
2.1.3 所需溶液的配置 | 第31-33页 |
2.1.4 试验仪器 | 第33页 |
2.2 试验方法 | 第33-41页 |
2.2.1 辣椒疫霉菌株SD33总RNA提取和cDNA合成 | 第33-34页 |
2.2.2 目的基因的克隆 | 第34-35页 |
2.2.3 BL21感受态的制备 | 第35-36页 |
2.2.4 农杆菌感受态制备和转化 | 第36页 |
2.2.5 重组基因的蛋白表达 | 第36-38页 |
2.2.6 纯化方法优化 | 第38-39页 |
2.2.7 晶体筛选和优化 | 第39页 |
2.2.8 Se-Met衍生物蛋白质分离纯化和晶体筛选 | 第39-40页 |
2.2.9 胰蛋白酶(Trypsin)酶切的研究 | 第40-41页 |
3 试验结果 | 第41-57页 |
3.1 RXLR23生物信息学分析 | 第41-42页 |
3.2 RXLR23蛋白表达纯化 | 第42-44页 |
3.3 硒代蛋白的表达纯化 | 第44页 |
3.4 RXLR23蛋白晶体筛选和优化 | 第44-46页 |
3.5 硒代蛋白的晶体筛选和优化 | 第46-47页 |
3.6 胰酶酶切蛋白后的纯化 | 第47-49页 |
3.7 N端截短后晶体筛选 | 第49-50页 |
3.8 筛选RXLR23和PI3P复合物晶体 | 第50-51页 |
3.9 RXLR23蛋白数据收集和结构解析 | 第51-56页 |
3.9.1 母体蛋白和硒代蛋白数据收集处理 | 第51-52页 |
3.9.2 相位求解 | 第52页 |
3.9.3 模型搭建 | 第52-54页 |
3.9.4 结构解析和精修 | 第54-56页 |
3.10 RXLR23亚细胞定位 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-61页 |
4.1 RXLR23蛋白二级结构预测以及与其他RXLR效应分子的比对 | 第57-58页 |
4.2 RXLR23克隆和载体选择 | 第58页 |
4.3 RXLR23蛋白表达纯化分析 | 第58页 |
4.4 RXLR23蛋白晶体优化 | 第58-59页 |
4.5 数据收集与处理 | 第59页 |
4.6 RXLR23蛋白晶体初始结构分析 | 第59-60页 |
4.7 RXLR23亚细胞定位分析 | 第60-61页 |
5 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-71页 |
致谢 | 第71页 |