| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-31页 |
| 1.1 绿色荧光蛋白 | 第12-18页 |
| 1.1.1 绿色荧光蛋白简介 | 第12页 |
| 1.1.2 绿色荧光蛋白结构与性质 | 第12-13页 |
| 1.1.3 绿色荧光蛋白发光机理 | 第13-14页 |
| 1.1.4 绿色荧光蛋白应用及突变体 | 第14-15页 |
| 1.1.5 超电荷绿色荧光蛋白及其应用 | 第15-16页 |
| 1.1.6 H_(39)GFP及其应用 | 第16-18页 |
| 1.2 分子逻辑门 | 第18-20页 |
| 1.2.1 分子逻辑门概念 | 第18-19页 |
| 1.2.2 分子逻辑门应用 | 第19-20页 |
| 1.3 基因输送 | 第20-26页 |
| 1.3.1 基因输送简介 | 第20-21页 |
| 1.3.2 基因输送载体 | 第21-23页 |
| 1.3.3 基因输送应用 | 第23-26页 |
| 1.4 药物输送 | 第26-30页 |
| 1.4.1 药物输送简介 | 第26页 |
| 1.4.2 阿霉素给药系统 | 第26-30页 |
| 1.5 本文构思 | 第30-31页 |
| 第2章 智能响应型载体H_(39)GFP与核酸自组装性质研究 | 第31-43页 |
| 2.1 前言 | 第31-32页 |
| 2.2 实验部分 | 第32-33页 |
| 2.2.1 实验试剂及仪器 | 第32页 |
| 2.2.2 质粒和菌株 | 第32-33页 |
| 2.2.3 培养基的配方 | 第33页 |
| 2.2.4 溶液的配置 | 第33页 |
| 2.3 实验方法 | 第33-35页 |
| 2.3.1 H_(39)GFP荧光蛋白表达 | 第33-34页 |
| 2.3.2 SDS-PAGE胶的制备 | 第34页 |
| 2.3.3 不同条件下H_(39)GFP带电量表征 | 第34-35页 |
| 2.3.4 蛋白复性实验 | 第35页 |
| 2.3.5 H_(39)GFP/DNA复合物的AFM表征 | 第35页 |
| 2.3.6 H_(39)GFP/DNA-C复合物的激光共聚焦成像表征 | 第35页 |
| 2.3.7 猝灭基团标记的DNA滴定H_(39)GFP荧光变化 | 第35页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第35-42页 |
| 2.4.1 H_(39)GFP表达及活性表征 | 第35-37页 |
| 2.4.2 微环境变化对H39GFP表面电荷的调控 | 第37-38页 |
| 2.4.3 H_(39)GFP/DNA复合体的表征 | 第38-40页 |
| 2.4.4 猝灭基团BHQ1-DNA荧光滴定H_(39)GFP | 第40页 |
| 2.4.5 H_(39)GFP与siRNA的结合表征及优化 | 第40-42页 |
| 2.5 小结 | 第42-43页 |
| 第3章 智能响应型载体H_(39)GFP构建细胞水平的逻辑门 | 第43-54页 |
| 3.1 前言 | 第43页 |
| 3.2 实验部分 | 第43-46页 |
| 3.2.1 实验试剂及仪器 | 第43-44页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第44页 |
| 3.2.3 H_(39)GFP细胞毒性实验 | 第44-45页 |
| 3.2.4 激光共聚焦显微镜成像 | 第45页 |
| 3.2.5 流式细胞实验 | 第45页 |
| 3.2.6 免疫印迹实验验证干扰效果 | 第45-46页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第46-53页 |
| 3.3.1 H_(39)GFP的生物兼容性探讨 | 第46-47页 |
| 3.3.2 H_(39)GFP穿膜“或”逻辑门的构建 | 第47-49页 |
| 3.3.3 基于H_(39)GFP携带DNA穿膜的“与”逻辑门构建 | 第49-50页 |
| 3.3.4 H_(39)GFP携带DNA穿膜“或”逻辑门的构建 | 第50-52页 |
| 3.3.5 H_(39)GFP智能携带siRNA进细胞并产生干扰效应 | 第52-53页 |
| 3.4 小结 | 第53-54页 |
| 第4章 基于H_(39)GFP为载体构建ATP引发抗癌药物释放体系 | 第54-62页 |
| 4.1 前言 | 第54-55页 |
| 4.2 实验部分 | 第55-56页 |
| 4.2.1 实验材料和仪器设备 | 第55页 |
| 4.2.2 ATP-aptamer与cDNA ATP-aptamer杂交试验 | 第55页 |
| 4.2.3 自组装体H_(39)GFP/Dox的光谱现象探究 | 第55-56页 |
| 4.2.4 Dox和ATP-Duplex结合表征及优化 | 第56页 |
| 4.2.5 体外检测ATP响应 | 第56页 |
| 4.2.6 MTT实验检测细胞凋亡情况 | 第56页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第56-61页 |
| 4.3.1 H_(39)GFP用于ATP响应释放药物机制 | 第56-58页 |
| 4.3.2 H_(39)GFP/ATP-Duplex/Dox光谱性质 | 第58页 |
| 4.3.3 体外优化ATP-Duplex/Dox比例 | 第58-59页 |
| 4.3.4 体外ATP响应实验 | 第59-60页 |
| 4.3.5 H_(39)GFP/ATP-Duplex/Dox纳米复合物进入细胞 | 第60页 |
| 4.3.6 MTT实验检测Dox释放促进细胞凋亡情况 | 第60-61页 |
| 4.4 小结 | 第61-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
