| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩写词表 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-19页 |
| 1. 材料、仪器及试剂 | 第19-23页 |
| 1.1 细胞株与质粒 | 第19页 |
| 1.2 主要仪器 | 第19-20页 |
| 1.3 主要试剂 | 第20-23页 |
| 2. 实验方法 | 第23-45页 |
| 2.1 细胞培养 | 第23-24页 |
| 2.1.1 细胞复苏 | 第23页 |
| 2.1.2 细胞的传代 | 第23页 |
| 2.1.3 细胞冻存 | 第23-24页 |
| 2.2 质粒的构建 | 第24-34页 |
| 2.2.1 主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2.2.2 质粒的转化 | 第25页 |
| 2.2.3 质粒的提取 | 第25-27页 |
| 2.2.4 构建p Lenti-U6-EF1a-cop GFP-P2A-Puro | 第27-31页 |
| 2.2.5 构建p Lenti-U6-XRCC4-EF1a-cop GFP-P2A-Puro | 第31-34页 |
| 2.3 稳定细胞系的建立 | 第34-42页 |
| 2.3.1 慢病毒包埋 | 第34-35页 |
| 2.3.2 感染与嘌呤霉素筛选 | 第35-36页 |
| 2.3.3 蛋白免疫印迹验证 | 第36-41页 |
| 2.3.4 细胞免疫组化 | 第41-42页 |
| 2.3.5 组织免疫组化 | 第42页 |
| 2.4 沉默XRCC4基因对TNBC细胞增殖的影响 | 第42-43页 |
| 2.4.1 主要试剂的配制 | 第42-43页 |
| 2.4.2 MTT | 第43页 |
| 2.4.3 克隆集落形成实验 | 第43页 |
| 2.5 统计学处理 | 第43-45页 |
| 3. 结果 | 第45-57页 |
| 3.1 XRCC4在TNBC患者癌组织和癌旁组织中的表达 | 第45-46页 |
| 3.2 构建PLENTI-U6-EF1A-COPGFP-P2A-PURO | 第46-48页 |
| 3.2.1 PCR扩增cop GFP片段及酶切 | 第46页 |
| 3.2.2 p Lenti-U6-EF1a-cop GFP-P2A-Puro阳性克隆筛选和酶切鉴定 | 第46页 |
| 3.2.3 p Lenti-U6-EF1a-cop GFP-P2A-Puro测序结果 | 第46-47页 |
| 3.2.4 p Lenti-U6-EF1a-cop GFP-P2A-Puro功能鉴定 | 第47-48页 |
| 3.3 构建PLENTI-U6-XRCC4-EF1A-COPGFP-P2A-PURO | 第48-49页 |
| 3.3.1 酶切p Lenti-U6-EF1a-cop GFP-P2A-Puro | 第48页 |
| 3.3.2 p Lenti-U6-XRCC4-EF1a-cop GFP-P2A-Puro筛选阳性克隆 | 第48页 |
| 3.3.3 p Lenti-U6-XRCC4-EF1a-cop GFP-P2A-Puro测序结果 | 第48-49页 |
| 3.4 XRCC4沉默表达TNBC稳定细胞系的建立 | 第49-53页 |
| 3.4.1 慢病毒包装 | 第49-50页 |
| 3.4.2 XRCC4沉默表达TNBC稳定细胞系的建立 | 第50-52页 |
| 3.4.3 稳定细胞系的鉴定 | 第52-53页 |
| 3.5 XRCC4基因沉默对TNBC细胞增殖的影响 | 第53页 |
| 3.6 XRCC4基因沉默对TNBC细胞放射敏感性的影响 | 第53-57页 |
| 讨论 | 第57-61页 |
| 结论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 综述 | 第67-73页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第75-76页 |
