摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
文献综述 | 第13-20页 |
第一章 白消安和褪黑素在精原干细胞损伤中的研究进展 | 第13-20页 |
1.1 精原干细胞与精子发生 | 第13-14页 |
1.2 白消安研究进展 | 第14-16页 |
1.2.1 白消安简介 | 第14-15页 |
1.2.2 白消安在临床中的应用 | 第15页 |
1.2.3 白消安与精子发生 | 第15-16页 |
1.2.4 白消安与氧化应激 | 第16页 |
1.3 抗白消安损伤药物的研究进展 | 第16页 |
1.4 褪黑素的研究进展 | 第16-20页 |
1.4.1 褪黑素的抗氧化作用 | 第16-17页 |
1.4.2 褪黑素受体及其信号通路 | 第17-19页 |
1.4.3 褪黑素与雄性生殖 | 第19页 |
1.4.4 褪黑素的应用 | 第19-20页 |
试验研究 | 第20-59页 |
第二章 白消安对小鼠睾丸细胞的影响 | 第20-36页 |
2.1 材料和方法 | 第20-28页 |
2.1.1 实验材料 | 第20页 |
2.1.2 实验试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 实验仪器 | 第21页 |
2.1.4 相关试剂配制方法 | 第21-23页 |
2.1.5 白消安受体鼠的制备 | 第23页 |
2.1.6 白消安处理后受体鼠睾丸形态学与睾体比的分析 | 第23页 |
2.1.7 白消安处理后受体鼠睾丸组织学分析 | 第23-24页 |
2.1.8 白消安处理后受体鼠睾丸组织特异性蛋白免疫荧光染色分析 | 第24页 |
2.1.9 不同类型睾丸细胞经白消安处理后细胞活力分析 | 第24-25页 |
2.1.10 白消安处理后受体鼠睾丸组织悬液制备 | 第25页 |
2.1.11 受体鼠睾丸悬液流式细胞术细胞周期、凋亡检测分析 | 第25页 |
2.1.12 受体鼠睾丸组织切片TUNEL凋亡检测分析 | 第25-26页 |
2.1.13 受体鼠睾丸组织定量检测分析 | 第26-27页 |
2.1.14 Western Blot检测白消安对于C18-4 的影响 | 第27-28页 |
2.1.15 稳定性分析 | 第28页 |
2.2 结果 | 第28-34页 |
2.2.1 白消安会造成小鼠睾丸萎缩、睾体比下降 | 第28页 |
2.2.2 白消安会造成小鼠精原细胞丢失 | 第28-29页 |
2.2.3 白消安对小鼠睾丸细胞活力的影响具有时间、剂量依赖性 | 第29-30页 |
2.2.4 白消安会造成小鼠睾丸细胞周期阻滞 | 第30-31页 |
2.2.5 白消安会造成小鼠睾丸内精原细胞凋亡 | 第31-32页 |
2.2.6 白消安会造成小鼠睾丸细胞应激水平增高 | 第32-33页 |
2.2.7 白消安造成细胞凋亡是通过p38-ERK通路 | 第33-34页 |
2.3 讨论 | 第34-35页 |
2.4 小结 | 第35-36页 |
第三章 褪黑素能够缓解白消安引起的小鼠睾丸细胞凋亡 | 第36-49页 |
3.1 材料和方法 | 第36-40页 |
3.1.1 实验材料 | 第36页 |
3.1.2 实验试剂 | 第36页 |
3.1.3 实验仪器 | 第36-37页 |
3.1.4 实验主要试剂配制方法 | 第37-38页 |
3.1.5 褪黑素挽救白消安损伤模型的建立 | 第38页 |
3.1.6 睾丸中褪黑素受体检测 | 第38页 |
3.1.7 褪黑素对于C18-4 细胞氧化应激相关基因的功能检测 | 第38-39页 |
3.1.8 褪黑素挽救白消安损伤模型小鼠睾丸组织学检测 | 第39页 |
3.1.9 褪黑素挽救白消安损伤模型小鼠睾丸中减数分裂检测 | 第39-40页 |
3.1.10 褪黑素缓解白消安对于C18-4 细胞毒性检测 | 第40页 |
3.1.11 数据及稳定性分析 | 第40页 |
3.2 结果 | 第40-48页 |
3.2.1 小鼠睾丸中有褪黑素受体MT1、MT2的表达 | 第40-41页 |
3.2.2 褪黑素能够促进C18-4 细胞内抗氧化基因的表达 | 第41-42页 |
3.2.3 褪黑素能够有效的挽救白消安注射1周后小鼠曲细精管中的细胞 | 第42-43页 |
3.2.4 褪黑素能够有效的挽救白消安注射2周后小鼠曲细精管中的细胞 | 第43-44页 |
3.2.5 褪黑素不能够有效的挽救白消安注射3周后小鼠曲细精管中的细胞 | 第44-45页 |
3.2.6 褪黑素能够有效的缓解白消安的细胞毒性 | 第45-46页 |
3.2.7 褪黑素能够抑制P38信号通路从而缓解白消安所导致的细胞凋亡 | 第46-48页 |
3.3 讨论 | 第48页 |
3.4 小结 | 第48-49页 |
第四章 褪黑素能够通过保护线粒体抑制ROS从而缓解白消安的细胞毒性 | 第49-59页 |
4.1 材料和方法 | 第49-52页 |
4.1.1 实验材料 | 第49页 |
4.1.2 实验试剂 | 第49页 |
4.1.3 实验仪器 | 第49页 |
4.1.4 主要实验溶液的配制 | 第49-50页 |
4.1.5 褪黑素、白消安处理后细胞内活性氧检测 | 第50页 |
4.1.6 褪黑素、白消安处理后细胞内GSH/ GSSG检测 | 第50-51页 |
4.1.7 褪黑素、白消安处理后细胞内线粒体膜电位检测 | 第51-52页 |
4.1.9 稳定性分析 | 第52页 |
4.2 结果 | 第52-57页 |
4.2.1 褪黑素能够有效的缓解白消安所导致的细胞内ROS积累 | 第52-53页 |
4.2.2 褪黑素能够有效地保护细胞内GSH的平衡 | 第53-54页 |
4.2.3 褪黑素能够有效的保护线粒体膜电位平衡 | 第54页 |
4.2.4 褪黑素通过提高SIRT1、MnSOD的表达抑制白消安毒性 | 第54-57页 |
4.3 讨论 | 第57-58页 |
4.4 小结 | 第58-59页 |
结论 | 第59页 |
创新点 | 第59页 |
进一步研究课题 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
附录 | 第67-71页 |
缩略词 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
作者简介及攻读硕士学位期间的主要研究成果 | 第73页 |