| 英文缩略词对照(Abbreviation) | 第8-10页 |
| 中文摘要 | 第10-16页 |
| Abstract | 第16-23页 |
| 一、前言 | 第24-25页 |
| 二、实验 | 第25-61页 |
| 实验一 TNF-α、Ang Ⅱ单用及联合使用对人脐静脉内皮细胞和成纤维样滑膜细胞的作用及CP-25的作用 | 第25-45页 |
| 1 实验材料 | 第25-26页 |
| 1.1 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、成纤维滑膜细胞(FLS) | 第25页 |
| 1.2 药物与试剂 | 第25-26页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第26页 |
| 2 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.1 细胞的培养 | 第26-27页 |
| 2.1.1 HUVEC的培养 | 第26-27页 |
| 2.1.2 FLS的培养 | 第27页 |
| 2.1.3 HUVEC与FLS共培养系统 | 第27页 |
| 2.2 CCK8法检测细胞的增殖 | 第27-28页 |
| 2.2.1 不同浓度TNF-α、刺激不同时间对HUVEC增殖的作用 | 第27页 |
| 2.2.2 不同浓度Ang Ⅱ对HUVEC、FLS增殖的作用 | 第27-28页 |
| 2.2.3 TNF-α和Ang Ⅱ单独或联合使用对HUVEC、FLS增殖的作用 | 第28页 |
| 2.2.4 CP-25对TNF-α和Ang Ⅱ联合诱导的HUVEC、FLS增殖的作用 | 第28页 |
| 2.3 划痕实验和transwell小室法检测HUVEC与FLS及两种细胞共培养下的迁移能力 | 第28-29页 |
| 2.4 Transwell小室检测FLS的侵袭 | 第29页 |
| 2.5 HUVEC的成管实验 | 第29页 |
| 2.6 统计学方法 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-44页 |
| 3.1 TNF-α、Ang Ⅱ单用及联合使用对HUVEC增殖、迁移、成管的影响 | 第30-33页 |
| 3.1.1 TNF-α、Ang Ⅱ单用及联合使用对HUVEC增殖的影响 | 第30-31页 |
| 3.1.2 TNF-α、Ang Ⅱ单用及联合使用对HUVEC迁移的影响 | 第31-32页 |
| 3.1.3 TNF-α、Ang Ⅱ单用及联合使用对HUVEC成管的影响 | 第32-33页 |
| 3.2 TNF-α、Ang Ⅱ单用及联合使用对人FLS增殖、迁移、侵袭的影响 | 第33-36页 |
| 3.2.1 TNF-α、Ang Ⅱ单用及联合使用对FLS增殖的影响 | 第33-34页 |
| 3.2.2 TNF-α、Ang Ⅱ单用及联合使用对FLS迁移和侵袭能力的影响 | 第34-36页 |
| 3.3 共培养系统中FLS对HUVEC迁移与成管的影响 | 第36-37页 |
| 3.4 共培养系统中HUVEC对FLS迁移的影响 | 第37-38页 |
| 3.5 CP-25对TNF-α和Ang Ⅱ联合诱导的HUVEC和FLS功能的影响 | 第38-42页 |
| 3.5.1 CP-25对TNF-α和Ang Ⅱ联合诱导的HUVEC增殖、迁移、成管的影响 | 第38-41页 |
| 3.5.2 CP-25对TNF-α和Ang Ⅱ联合诱导的FLS增殖、迁移、侵袭的影响 | 第41-42页 |
| 3.6 CP-25对共培养系统中TNF-α和Ang Ⅱ联合诱导的HUVEC与FLS的作用 | 第42-44页 |
| 4 小结 | 第44-45页 |
| 实验二 TNF-α和Ang Ⅱ对HUVEC和FLS AT1R信号的影响 | 第45-61页 |
| 1 实验材料 | 第45-48页 |
| 1.1 细胞来源 | 第45页 |
| 1.2 药物与试剂 | 第45-47页 |
| 1.3 仪器与设备 | 第47-48页 |
| 2 实验方法 | 第48-52页 |
| 2.1 细胞的培养 | 第48页 |
| 2.2 激光共聚焦或免疫荧光检测TNF-α和Ang Ⅱ诱导HUVEC 和FLS ATlR和AT2R的表达 | 第48-49页 |
| 2.3 流式细胞术检测TNF-α和Ang Ⅱ诱导的HUVEC AT1R和AT2R表达 | 第49页 |
| 2.4 Western blot法检测HUVEC和FLS Ang Ⅱ通路相关蛋白表达情况 | 第49-51页 |
| 2.5 免疫共沉淀法检测HUVEC TRAF2与GRK2、GRK2与AT1R共表达情况 | 第51-52页 |
| 2.6 统计方法 | 第52页 |
| 3 结果 | 第52-60页 |
| 3.1 TNF-α、Ang Ⅱ单用及联合使用对HUVEC、FLS Ang Ⅱ受体信号通路的变化 | 第52-57页 |
| 3.1.1 TNF-α、Ang Ⅱ单用及联合使用对HUVEC Ang Ⅱ受体表达的影响 | 第52-53页 |
| 3.1.2 TNF-α、Ang Ⅱ单用及联合使用对HUVEC的GRK2表达水平的影响 | 第53-54页 |
| 3.1.3 Ang Ⅱ和TNF-α对FLS Ang Ⅱ受体表达的影响 | 第54-56页 |
| 3.1.4 Ang Ⅱ和TNF-α对FLS的GRK2表达水平的影响 | 第56页 |
| 3.1.5 TNF-α,、Ang Ⅱ单用及联合使用对HUVEC ERK信号通路的变化 | 第56-57页 |
| 3.2 TNF-α对HUVEC内TRAF2与GRK2、GRK2与AT1R共表达水平的影响 | 第57-58页 |
| 3.3 CP-25对Ang Ⅱ和TNF-α诱导的人HUVEC AT1R、ERK 信号通路的影响 | 第58-59页 |
| 3.4 TNF-α、Ang Ⅱ对HUVEC AT1、AT2受体敏感化及GRK2蛋白表达的变化 | 第59-60页 |
| 4 小结 | 第60-61页 |
| 三、讨论 | 第61-65页 |
| 四、本研究的创新点 | 第65页 |
| 五、参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 综述 | 第75-84页 |
| 参考文献 | 第80-84页 |
