| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 英文缩略词 | 第12-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-31页 |
| 1.1 紫草简介 | 第13页 |
| 1.2 紫草化学成分研究进展 | 第13-22页 |
| 1.2.1 萘醌类化合物 | 第14-17页 |
| 1.2.2 单萜苯酚及苯醌类化合物 | 第17-18页 |
| 1.2.3 酚酸类及其盐类 | 第18-19页 |
| 1.2.4 脂肪族和酯类化合物 | 第19-20页 |
| 1.2.5 生物碱及其他类化合物 | 第20-22页 |
| 1.3 紫草素类化合物药理作用研究进展 | 第22-26页 |
| 1.3.1 抗炎作用 | 第22页 |
| 1.3.2 抗病毒作用 | 第22-23页 |
| 1.3.3 抑制脂肪形成 | 第23页 |
| 1.3.4 抗雌激素作用 | 第23页 |
| 1.3.5 抗肿瘤作用 | 第23-26页 |
| 1.4 紫草素类化合物生物合成的研究进展 | 第26-31页 |
| 1.4.1 PHBA的合成 | 第27页 |
| 1.4.2 GPP的合成 | 第27-29页 |
| 1.4.3 对羟基苯甲酸-香叶基转移酶(PGT) | 第29-31页 |
| 第2章 基于新疆紫草转录组的对羟基苯甲酸香叶基转移酶基因的挖掘及生物信息学分析 | 第31-44页 |
| 2.1 前言 | 第31页 |
| 2.2 实验材料 | 第31-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-33页 |
| 2.3.1 新疆紫草PGT基因的分离 | 第32页 |
| 2.3.2 新疆紫草PGT基因结构分析 | 第32页 |
| 2.3.3 新疆紫草PGT蛋白的生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 2.3.4 新疆紫草PGT蛋白的系统进化树分析 | 第33页 |
| 2.4 实验结果及分析 | 第33-42页 |
| 2.4.1 新疆紫草PGT基因的分离 | 第33-34页 |
| 2.4.2 新疆紫草PGT基因结构和表达分析 | 第34-35页 |
| 2.4.3 新疆紫草PGT蛋白特性分析 | 第35-37页 |
| 2.4.4 新疆紫草PGT蛋白结构分析 | 第37-38页 |
| 2.4.5 氨基酸序列多重比对分析 | 第38-41页 |
| 2.4.6 新疆紫草PGT蛋白系统进化树分析 | 第41-42页 |
| 2.5 实验小结与讨论 | 第42-44页 |
| 第3章 新疆紫草对羟基苯甲酸香叶基转移酶基因的克隆及功能鉴定 | 第44-63页 |
| 3.1 前言 | 第44页 |
| 3.2 实验材料 | 第44-47页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第44-45页 |
| 3.2.2 载体和菌株 | 第45页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第45-46页 |
| 3.2.4 主要仪器 | 第46-47页 |
| 3.3 实验方法 | 第47-56页 |
| 3.3.1 新疆紫草悬浮细胞培养 | 第47页 |
| 3.3.2 茉莉酸甲酯诱导处理新疆紫草悬浮细胞 | 第47-48页 |
| 3.3.3 RNA提取和检测 | 第48页 |
| 3.3.4 逆转录PCR | 第48页 |
| 3.3.5 新疆紫草PGT基因全长克隆 | 第48-49页 |
| 3.3.6 DNA连接反应 | 第49-50页 |
| 3.3.7 大肠杆菌转化 | 第50页 |
| 3.3.8 大肠杆菌阳性克隆鉴定 | 第50页 |
| 3.3.9 小量质粒DNA提取 | 第50页 |
| 3.3.10 表达载体构建 | 第50-52页 |
| 3.3.11 酵母LiAc法转化 | 第52-53页 |
| 3.3.12 酵母外源基因诱导表达 | 第53页 |
| 3.3.13 小量酵母表达蛋白微粒体蛋白提取(玻璃珠法) | 第53-54页 |
| 3.3.14 小批量酵母发酵产物中GBA的抽提及检测 | 第54页 |
| 3.3.15 体外酶促反应 | 第54-55页 |
| 3.3.16 体外酶促反应产物抽提及检测 | 第55页 |
| 3.3.17 实时荧光定量PCR引物设计 | 第55页 |
| 3.3.18 实时荧光定量PCR检测基因表达 | 第55-56页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第56-62页 |
| 3.4.1 新疆紫草悬浮细胞样品RNA提取及检测 | 第56-57页 |
| 3.4.2 新疆紫草PGT基因全长克隆 | 第57页 |
| 3.4.3 AePGTs在红色悬浮细胞系及白色悬浮细胞系基因表达差异分析 | 第57-58页 |
| 3.4.4 AePGTs在新疆紫草植株的地上部分与地下部分基因表达差异分析 | 第58页 |
| 3.4.5 小批量酵母发酵 | 第58-59页 |
| 3.4.6 体外酶促反应验证催化功能 | 第59-60页 |
| 3.4.7 MeJA诱导对AePGTs基因表达量的影响 | 第60-62页 |
| 3.5 实验小结与讨论 | 第62-63页 |
| 第4章 嵌合PGT序列编码蛋白的功能鉴定及AePGTs蛋白亚细胞定位 | 第63-73页 |
| 4.1 前言 | 第63页 |
| 4.2 实验材料 | 第63-64页 |
| 4.2.1 植物材料 | 第63页 |
| 4.2.2 载体和菌株 | 第63-64页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第64页 |
| 4.3 实验方法 | 第64-67页 |
| 4.3.1 嵌合PGT序列编码蛋白的功能鉴定 | 第64-65页 |
| 4.3.2 AePGTs蛋白亚细胞定位 | 第65-67页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第67-71页 |
| 4.4.1 嵌合PGT蛋白功能鉴定 | 第67-69页 |
| 4.4.2 AePGTs蛋白亚细胞定位 | 第69-71页 |
| 4.5 实验小结与讨论 | 第71-73页 |
| 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 硕士期间文章情况 | 第86-87页 |
| 附录 | 第87-94页 |
