中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
前言 | 第12-19页 |
1 基因传递载体的研究进展 | 第12-17页 |
2 本文设计新型基因传递系统的思路和基本方法 | 第17-19页 |
第一章 基因传递载体的筛选、处方优化及制备 | 第19-47页 |
第一节 基因传递载体材料的筛选及处方优化 | 第19-31页 |
1 材料与方法 | 第19-21页 |
·材料与仪器 | 第19-20页 |
·Langmuir 膜天平测定π-A 等温线 | 第20-21页 |
2 结果和讨论 | 第21-31页 |
·单分子膜性质研究 | 第21-26页 |
·混合单分子膜性质考察用于处方筛选 | 第26-31页 |
第二节 质粒DNA 的扩增和提取 | 第31-36页 |
1 材料和方法 | 第31-34页 |
·仪器和材料 | 第31-32页 |
·质粒DNA 的转化、扩增与提取 | 第32-34页 |
2 结果和讨论 | 第34-36页 |
第三节 阳离子脂/DNA 复合物的制备 | 第36-46页 |
1 材料和方法 | 第36-39页 |
·仪器与材料 | 第36页 |
·传统脂质体/DNA 复合物的制备 | 第36-37页 |
·新方法制备脂质/DNA 复合物 | 第37-39页 |
2 结果与讨论 | 第39-46页 |
·脂质/DNA 复合物制备方法的选择 | 第39-40页 |
·琼脂糖凝胶电泳表征阳离子脂质体/DNA 复合物的结合 | 第40-41页 |
·粒径和Zeta 电位的测定 | 第41-44页 |
·脂质/DNA 复合物的外观形态 | 第44-46页 |
本章小结 | 第46-47页 |
第二章 脂质/DNA 复合物的生物学研究 | 第47-63页 |
第一节 细胞培养 | 第47-50页 |
1 材料和方法 | 第47-49页 |
·材料与仪器 | 第47-48页 |
·细胞复苏及传代培养 | 第48-49页 |
2 结果与讨论 | 第49-50页 |
第二节 脂质/DNA 复合物体外基因转染 | 第50-57页 |
1 材料和方法 | 第50-53页 |
·材料与仪器 | 第50页 |
·脂质/DNA 复合物的制备 | 第50-51页 |
·体外细胞转染(以NIH3T3 细胞为例) | 第51页 |
·细胞因素对转染效率的影响 | 第51-52页 |
·血清因素对转染效率的影响 | 第52页 |
·结果统计处理 | 第52-53页 |
2. 结果与讨论 | 第53-57页 |
第三节 脂质/DNA 复合物基因传递机制研究 | 第57-60页 |
1 材料和方法 | 第57-58页 |
·材料与仪器 | 第57页 |
·制备含FITC 的DNA 载体 | 第57页 |
·细胞吞噬考察 | 第57-58页 |
·细胞融合考察 | 第58页 |
2 结果 | 第58-60页 |
第四节 脂质/DNA 复合物的细胞毒性试验 | 第60-62页 |
1 材料和方法 | 第60-61页 |
·材料与仪器 | 第60页 |
·脂质/DNA 复合物的细胞毒性试验 | 第60-61页 |
2 结果与讨论 | 第61-62页 |
本章小结 | 第62-63页 |
第三章 脂质/DNA 复合物的体内探索研究 | 第63-74页 |
第一节 脂质复合物介导的体外siRNA 干扰试验 | 第63-67页 |
1 材料和方法 | 第63-65页 |
·材料和仪器 | 第63-64页 |
·特异siRNA 序列的合成参照文献[47] | 第64页 |
·HBV 的siRNA 干扰试验 | 第64页 |
·ELISA 检测表抗与核抗及RT-PCR 检测HBV DNA 的表达 | 第64-65页 |
2 结果与讨论 | 第65-67页 |
·乙肝表面抗原及核心抗原检测 | 第65-66页 |
·RT-PCR 定量检测HBV DNA 的表达 | 第66-67页 |
第二节 肝靶向脂质复合物的活体成像 | 第67-73页 |
1 材料和方法 | 第67-69页 |
·材料和仪器 | 第67页 |
·Langmuir 技术考察基因载体处方 | 第67-68页 |
·装载Cy5.5 的脂质复合物的制备 | 第68页 |
·活体成像 | 第68-69页 |
2 结果与讨论 | 第69-73页 |
·复合物的处方及制备 | 第69-70页 |
·活体成像 | 第70-73页 |
本章小结 | 第73-74页 |
结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-79页 |
附录 个人简历 | 第79-81页 |
致谢 | 第81-83页 |
综述 | 第83-90页 |
参考文献 | 第89-90页 |