| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 引言 | 第12-22页 |
| 1.1 HIV相关概述 | 第12-14页 |
| 1.2 中草药用于抗HIV的治疗 | 第14-16页 |
| 1.3 CCR5共受体 | 第16-17页 |
| 1.4 广谱中和抗体 | 第17-19页 |
| 1.5 哺乳动物双杂交系统 | 第19-22页 |
| 第二章 作用于CCR5受体的抗HIV-1中草药的筛选 | 第22-28页 |
| 2.1 材料 | 第22页 |
| 2.1.1 细胞 | 第22页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2.2 细胞加药 | 第23页 |
| 2.2.3 流式细胞术检测中药对CCR5表达的影响 | 第23-24页 |
| 2.3 结果 | 第24-25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-28页 |
| 第三章 CCR5抗体PRO140的表达载体的构建 | 第28-40页 |
| 3.1 材料 | 第28-31页 |
| 3.1.1 细胞、菌株与质粒 | 第28页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第29-31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-35页 |
| 3.2.1 菌液扩大培养 | 第31页 |
| 3.2.2 质粒提取 | 第31-32页 |
| 3.2.3 酶切 | 第32-33页 |
| 3.2.4 琼脂糖电泳 | 第33页 |
| 3.2.5 切胶回收目的片段 | 第33-34页 |
| 3.2.6 连接 | 第34页 |
| 3.2.7 转化 | 第34页 |
| 3.2.8 酶切验证、测序 | 第34-35页 |
| 3.3 结果 | 第35-38页 |
| 3.3.1 酶切获得目的片段 | 第35-36页 |
| 3.3.2 重组质粒酶切验证 | 第36-37页 |
| 3.3.3 测序验证阳性质粒 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 HIV-1共受体CCR5在真核细胞中的表达 | 第40-56页 |
| 4.1 材料 | 第40-43页 |
| 4.1.1 细胞、菌株与质粒 | 第40页 |
| 4.1.2 主要试剂及耗材 | 第40-41页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第41页 |
| 4.1.4 western blot常用溶液的配置 | 第41-43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-51页 |
| 4.2.1 表达CCR5载体的构建 | 第43-47页 |
| 4.2.2 CHO细胞培养基本操作 | 第47-48页 |
| 4.2.3 转染 | 第48-49页 |
| 4.2.4 蛋白提取 | 第49页 |
| 4.2.5 Western Blot | 第49-51页 |
| 4.3 结果 | 第51-54页 |
| 4.3.1 PCR扩增CCR5片段 | 第51页 |
| 4.3.2 菌落PCR验证连接后的单克隆 | 第51-53页 |
| 4.3.3 酶切验证阳性克隆 | 第53页 |
| 4.3.4 Western Blot检测CCR5的表达 | 第53-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 哺乳动物双杂交系统验证CCR5与PRO140的相互作用 | 第56-64页 |
| 5.1 材料 | 第56-57页 |
| 5.1.1 试剂 | 第56页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第56页 |
| 5.1.3 细胞和质粒 | 第56-57页 |
| 5.2 试验方法 | 第57-59页 |
| 5.2.1 CHO细胞培养铺板 | 第57页 |
| 5.2.2 共转染 | 第57-58页 |
| 5.2.3 SEAP试剂盒检测相互作用 | 第58-59页 |
| 5.3 结果 | 第59-60页 |
| 5.4 讨论 | 第60-64页 |
| 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 附录 | 第68-72页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
