摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第11-33页 |
1.1 生物传感器 | 第11-18页 |
1.1.1 生物传感器的简介 | 第11页 |
1.1.2 生物传感器的原理 | 第11页 |
1.1.3 生物传感器的分类 | 第11-12页 |
1.1.4 生物传感器的应用 | 第12页 |
1.1.5 DNA生物传感器 | 第12-18页 |
1.1.5.1 DNA生物传感器的原理 | 第12页 |
1.1.5.2 DNA生物传感器的分类 | 第12-17页 |
1.1.5.2.1 光学DNA生物传感器 | 第13-15页 |
1.1.5.2.2 电化学DNA生物传感器 | 第15-17页 |
1.1.5.3 DNA生物传感器的应用 | 第17-18页 |
1.2 肿瘤与肿瘤标志物 | 第18-23页 |
1.2.1 肿瘤的简介 | 第18-19页 |
1.2.1.1 肿瘤的定义 | 第18页 |
1.2.1.2 肿瘤的分类 | 第18-19页 |
1.2.2 肿瘤标志物的简介 | 第19页 |
1.2.2.1 肿瘤标志物的定义 | 第19页 |
1.2.2.2 肿瘤标志物的分类 | 第19页 |
1.2.3 ATP | 第19-21页 |
1.2.3.1 ATP的定义 | 第19-20页 |
1.2.3.2 ATP的理化性质 | 第20页 |
1.2.3.3 ATP的研究意义 | 第20页 |
1.2.3.4 ATP的检测方法 | 第20-21页 |
1.2.4 microRNA | 第21-23页 |
1.2.4.1 microRNA的简介 | 第21页 |
1.2.4.2 microRNA-21 | 第21-23页 |
1.2.4.2.1 microRNA-21 的简介 | 第21-22页 |
1.2.4.2.2 miRNA-21 与肿瘤的关系 | 第22页 |
1.2.4.2.3 miRNA-21 为靶标的肿瘤治疗 | 第22-23页 |
1.3 生物酶 | 第23-27页 |
1.3.1 生物酶的简介 | 第23-24页 |
1.3.1.1 DNA聚合酶 | 第23页 |
1.3.1.2 核酸外切酶 | 第23-24页 |
1.3.1.3 限制性核酸内切酶 | 第24页 |
1.3.2 酶促循环放大反应 | 第24-27页 |
1.3.2.1 基于聚合酶的酶促循环放大反应 | 第24-25页 |
1.3.2.2 基于核酸外切酶的酶促循环放大反应 | 第25-26页 |
1.3.2.3 基于核酸内切酶的酶促循环放大反应 | 第26-27页 |
1.4 纳米材料 | 第27-31页 |
1.4.1 纳米材料的简介 | 第27页 |
1.4.2 纳米材料的性能 | 第27-28页 |
1.4.3 纳米材料的发展现状 | 第28页 |
1.4.4 聚多巴胺纳米微球(PDANSs) | 第28-30页 |
1.4.4.1 PDANSs的合成 | 第28页 |
1.4.4.2 PDANSs的表征 | 第28-29页 |
1.4.4.3 PDANSs的应用 | 第29-30页 |
1.4.5 金纳米粒子(AuNPs) | 第30-31页 |
1.4.5.1 AuNPs的合成 | 第30页 |
1.4.5.2 AuNPs的表征 | 第30-31页 |
1.4.5.3 AuNPs的应用 | 第31页 |
1.5 立题依据与主要内容 | 第31-33页 |
第二章 基于酶促循环放大反应和聚多巴胺纳米微球荧光检测ATP | 第33-51页 |
2.1 引言 | 第33-34页 |
2.2 实验部分 | 第34-36页 |
2.2.1 试剂与仪器 | 第34-35页 |
2.2.1.1 实验试剂 | 第34页 |
2.2.1.2 实验仪器 | 第34-35页 |
2.2.2 实验方法 | 第35-36页 |
2.2.2.1 缓冲溶液的配制与DNA的预处理 | 第35页 |
2.2.2.2 聚多巴胺纳米微球(PDANSs)的合成 | 第35页 |
2.2.2.3 Signal/PDANS纳米复合物的制备 | 第35-36页 |
2.2.2.4 MBs-T的制备 | 第36页 |
2.2.2.5 ATP的检测 | 第36页 |
2.3 结果与分析 | 第36-48页 |
2.3.1 荧光检测ATP的原理 | 第36-37页 |
2.3.2 PDANSs表征 | 第37-39页 |
2.3.2.1 扫描电子显微镜(SEM)表征 | 第37-38页 |
2.3.2.2 傅里叶变换红外光谱(FTIR)表征 | 第38页 |
2.3.2.3 紫外(UV)表征 | 第38-39页 |
2.3.3 可行性验证 | 第39-40页 |
2.3.4 实验条件的优化 | 第40-44页 |
2.3.4.1 PDANSs浓度的优化 | 第40-41页 |
2.3.4.2 缓冲溶液pH的优化 | 第41-42页 |
2.3.4.3 反应温度的优化 | 第42-43页 |
2.3.4.4 反应时间的优化 | 第43页 |
2.3.4.5 酶用量的优化 | 第43-44页 |
2.3.5 ATP的检测 | 第44-47页 |
2.3.5.1 无酶促循环放大过程检测ATP | 第44-45页 |
2.3.5.2 第二次酶促循环放大过程检测ATP | 第45-46页 |
2.3.5.3 双重酶促循环放大过程检测ATP | 第46-47页 |
2.3.6 实验方案的重现性 | 第47页 |
2.3.7 实验方案的精确度 | 第47-48页 |
2.3.8 实验方案的选择性 | 第48页 |
2.4 小结 | 第48-51页 |
第三章 基于酶促循环放大反应和金纳米粒子可视化检测ATP | 第51-67页 |
3.1 引言 | 第51-52页 |
3.2 实验部分 | 第52-55页 |
3.2.1 试剂与仪器 | 第52页 |
3.2.1.1 实验试剂 | 第52页 |
3.2.1.2 实验仪器 | 第52页 |
3.2.2 实验方法 | 第52-55页 |
3.2.2.1 溶液的配制与DNA的预处理 | 第52-53页 |
3.2.2.2 金纳米粒子(AuNPs)的制备 | 第53-54页 |
3.2.2.3 AuNPs表面修饰巯基DNA | 第54页 |
3.2.2.4 MBs-T的制备 | 第54页 |
3.2.2.5 ATP的检测 | 第54-55页 |
3.3 结果与分析 | 第55-64页 |
3.3.1 可视化检测ATP的原理 | 第55页 |
3.3.2 AuNPs表面修饰DNA的表征 | 第55-56页 |
3.3.3 可行性验证 | 第56-58页 |
3.3.4 实验条件的优化 | 第58-60页 |
3.3.4.1 酶用量的优化 | 第58-59页 |
3.3.4.2 反应时间的优化 | 第59-60页 |
3.3.5 ATP的检测 | 第60-64页 |
3.3.5.1 无酶促循环放大过程检测ATP | 第60-62页 |
3.3.5.2 酶促循环放大过程检测ATP | 第62-64页 |
3.3.6 实验方案的选择性 | 第64页 |
3.4 小结 | 第64-67页 |
第四章 基于双重酶促循环放大反应荧光检测microRNA-21 | 第67-79页 |
4.1 引言 | 第67页 |
4.2 实验部分 | 第67-70页 |
4.2.1 试剂与仪器 | 第67-68页 |
4.2.1.1 实验试剂 | 第67-68页 |
4.2.1.2 实验仪器 | 第68页 |
4.2.2 实验方法 | 第68-70页 |
4.2.2.1 缓冲溶液的配制与DNA的预处理 | 第68-69页 |
4.2.2.2 MBs-T1和MBs-T2的制备 | 第69页 |
4.2.2.3 Klenow聚合酶催化的酶促循环放大反应 | 第69-70页 |
4.2.2.4 Nb.Bsm I内切酶催化的酶促循环放大反应 | 第70页 |
4.2.2.5 MiRNA-21 的检测 | 第70页 |
4.3 结果与分析 | 第70-78页 |
4.3.1 荧光检测miRNA-21 的原理 | 第70-71页 |
4.3.2 可行性验证 | 第71-73页 |
4.3.3 实验条件的优化 | 第73-76页 |
4.3.3.1 缓冲溶液pH的优化 | 第73页 |
4.3.3.2 反应温度的优化 | 第73-74页 |
4.3.3.3 反应时间的优化 | 第74-75页 |
4.3.3.4 酶用量的优化 | 第75-76页 |
4.3.4 miRNA-21 的检测 | 第76-77页 |
4.3.5 实验方案的重现性 | 第77页 |
4.3.6 实验方案的选择性 | 第77-78页 |
4.4 小结 | 第78-79页 |
结论 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-89页 |
致谢 | 第89-91页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第91-92页 |