摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-20页 |
1.1 梨树栽培模式 | 第12页 |
1.2 梨树矮化机理研究进展 | 第12页 |
1.3 Katanin微管切割蛋白 | 第12-15页 |
1.3.1 微管 | 第12-13页 |
1.3.2 微管切割蛋白Katanin的结构及功能 | 第13-15页 |
1.4 Katanin作用影响因素 | 第15-16页 |
1.4.1 ATP和Ca2+ | 第15页 |
1.4.2 光信号诱导 | 第15-16页 |
1.4.3 植物激素赤霉素(GA)和生长素(Auxin) | 第16页 |
1.4.4 微管形态 | 第16页 |
1.5 Katanin生物学功能 | 第16-18页 |
1.5.1 Katanin与细胞形态结构 | 第16-17页 |
1.5.2 Katanin与细胞分裂 | 第17-18页 |
1.5.3 Katanin与细胞迁移 | 第18页 |
1.6 Katanin功能异常与病变 | 第18-19页 |
1.7 展望 | 第19页 |
1.8 本研究目的及意义 | 第19-20页 |
第二章 梨树枝条长度观测及解剖结构分析 | 第20-24页 |
2.1 试验材料 | 第20页 |
2.2 试验方法 | 第20-21页 |
2.2.1 枝条长度统计 | 第20页 |
2.2.2 石蜡切片的制备与观察 | 第20-21页 |
2.2.2.1 切片制备 | 第20-21页 |
2.2.2.2 切片染色 | 第21页 |
2.2.2.3 切片观察 | 第21页 |
2.3 结果与分析 | 第21-23页 |
2.3.1 梨枝条生长情况分析 | 第21-22页 |
2.3.2 梨枝条石蜡切片观察分析 | 第22-23页 |
2.4 讨论 | 第23-24页 |
第三章 梨LUE1基因克隆及序列与表达分析 | 第24-33页 |
3.1 试验材料 | 第24页 |
3.2 试验方法 | 第24-26页 |
3.2.1 总RNA的提取及逆转录反应 | 第24-25页 |
3.2.2 梨LUE1基因编码序列全长扩增 | 第25页 |
3.2.3 生物信息学分析 | 第25页 |
3.2.4 PcLUE1基因的荧光定量表达分析 | 第25-26页 |
3.3 结果与分析 | 第26-32页 |
3.3.1 ‘中矮1号’LUE1基因cDNA全长序列获得 | 第26-27页 |
3.3.2 ‘中矮1号’LUE1基因生物信息学分析 | 第27-29页 |
3.3.3 ‘中矮1号’LUE1基因的氨基酸序列系统进化树分析 | 第29页 |
3.3.4 PcLUE1蛋白质高级结构预测分析 | 第29-30页 |
3.3.5 不同梨品种LUE1基因的克隆及比较分析 | 第30页 |
3.3.6 不同梨品种PcLUE1基因的qRT-PCR分析 | 第30-32页 |
3.4 讨论 | 第32-33页 |
第四章 PcLUE1基因的遗传转化与功能分析 | 第33-42页 |
4.1 材料与方法 | 第33-34页 |
4.1.1 培养基的制备 | 第33页 |
4.1.2 载体的构建 | 第33-34页 |
4.1.2.1 PcLUE1克隆载体的制备 | 第33页 |
4.1.2.2 重组载体的构建 | 第33-34页 |
4.2 根癌农杆菌感受态的制备及转化 | 第34-35页 |
4.2.1 根癌农杆菌感受态的制备 | 第34-35页 |
4.2.2 根癌农杆菌感受态转化 | 第35页 |
4.3 遗传转化 | 第35-37页 |
4.3.1 烟草叶片预培养 | 第35页 |
4.3.2 农杆菌菌液的制备 | 第35页 |
4.3.3 农杆菌菌液侵染烟草叶片 | 第35-36页 |
4.3.4 转化烟草的扩繁与成苗 | 第36页 |
4.3.5 Sourthern blot | 第36-37页 |
4.3.6 转化烟草植株表型观察 | 第37页 |
4.4 结果与分析 | 第37-41页 |
4.4.1 载体的构建 | 第37-38页 |
4.4.2 烟草转化芽成苗及验证 | 第38-39页 |
4.4.3 转基因烟草表型鉴定 | 第39-41页 |
4.5 讨论 | 第41-42页 |
第五章 全文结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
作者简历 | 第49页 |