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增强Terminal Ear1-Like基因的表达提高水稻产量

致谢第6-8页
缩略词表第8-11页
摘要第11-13页
Abstract第13-14页
文献综述第19-63页
    1 TE1-like RNA结合蛋白的研究进展第19-38页
        1.1 引言第19-21页
        1.2 植物中的RNA结合蛋白及其功能第21-22页
        1.3 Mei2蛋白第22-25页
        1.4 TEL基因及其功能第25-30页
            1.4.1 TEL基因的发现第25-27页
            1.4.2 TEL基因的功能第27-29页
            1.4.3 TEL基因与植物激素第29-30页
        1.5 小结与展望第30-33页
        参考文献第33-38页
    2 禾本科作物产量相关性状及其分子基础第38-63页
        2.1 引言第38页
        2.2 产量相关性状第38-39页
        2.3 产量相关性状的分子调控第39-54页
            2.3.1 株高第41-43页
            2.3.2 分蘖数第43-47页
            2.3.3 穗子分支模式和种子数量第47-51页
            2.3.4 种子大小和灌浆第51-53页
            2.3.5 收获指数(HI)第53-54页
        2.4 小结与展望第54-56页
        参考文献第56-63页
研究论文第63-134页
    引言第63-65页
    1 材料与方法第65-89页
        1.1 植物材料第65页
        1.2 菌株和质粒载体第65页
        1.3 主要工具酶第65页
        1.4 常用试剂、核酸、蛋白分子质量及试剂盒第65页
        1.5 引物第65-66页
        1.6 各种培养基的配置第66页
        1.7 常用生化试剂和仪器第66页
        1.8 基本分子生物学克隆操作第66-72页
            1.8.1 基因组DNA提取第66页
            1.8.2 PCR技术第66-68页
            1.8.3 凝胶回收第68页
            1.8.4 高保真酶扩增产物加A反应第68页
            1.8.5 连接反应第68-69页
            1.8.6 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第69-70页
            1.8.7 质粒微量提取第70页
            1.8.8 酶切反应第70-71页
            1.8.9 农杆菌感受态细胞的制备及转化第71-72页
        1.9 Southern blot第72-74页
        1.10 突变体HSA-20外源T-DNA插入位点确定第74-75页
        1.11 蛋白质SDS-PAGE电泳第75-76页
        1.12 总RNA提取、纯化和cDNA第一链的合成第76-77页
        1.13 RT-PCR和qRT-PCR第77-78页
            1.13.1 RT-PCR第77-78页
            1.13.2 qRT-PCR第78页
        1.14 OsTEL基因的系统发育分析第78-79页
        1.15 过表达OsTEL基因和其它相关基因的转化载体的构建第79-82页
            1.15.1 OsTEL基因过量表达载体的构建第79-80页
            1.15.2 OsGAP基因过量表达载体(eOsGAP)的构建第80页
            1.15.3 TE1基因过量表达载体(eTE1)的构建第80页
            1.15.4 OsTEL中RRMs及其旁侧序列过表达载体的构建第80-81页
            1.15.5 OML基因过量表达载体的构建第81-82页
            1.15.6 绿藻和杨树中TEL基因过表达载体的构建第82页
        1.16 农杆菌介导转基因水稻方法第82-83页
        1.17 农艺性状和产量的统计分析第83页
        1.18 eOsTEL中OsTEL基因的转录和表达水平分析第83-85页
            1.18.1 OsTEL基因转录水平的检测第83页
            1.18.2 OsTEL蛋白质表达水平分析第83-85页
        1.19 p35S的增强子的GUS染色分析第85-86页
            1.19.1 GUS系列载体构建第85页
            1.19.2 转基因植株染色分析第85-86页
        1.20 eOsTEL转基因植株的组织学分析第86页
        1.21 成熟水稻种子的SEM(扫描电镜)分析第86页
        1.22 OsTEL-GFP融合蛋白在烟草叶片细胞中的亚细胞定位第86-87页
            1.22.1 OsTEL-GFP融合蛋白表达载体构建第86-87页
            1.22.2 GFP在烟草叶片中的瞬时表达和观察第87页
        1.23 eOsTEL转基因植株的RNA测序和分析第87-89页
    2 结果与分析第89-123页
        2.1 突变体株系HSA-20与转基因受体株系有显著的表型差异第89-91页
            2.1.1 HSA-20株高变高和分蘖减少第89-90页
            2.1.2 谷粒变大以及千粒重增加第90页
            2.1.3 穗型变大和单穗粒数增多第90-91页
        2.2 突变体表型的分子机制分析第91-94页
            2.2.1 HSA-20的表型和表达HSA的T-DNA共分离第91-93页
            2.2.2 HSA-20中T-DNA的插入位点的确定第93页
            2.2.3 HSA-20中OsTEL基因的表达量被显著上调第93-94页
        2.3 HSA-20中T-DNA旁侧序列过量表达分析第94-97页
            2.3.1 引言第94页
            2.3.2 构建过量表达OsTEL基因的双元载体第94-95页
            2.3.3 eOsTEL在侵染后组织培养过程中有明显的表型差异第95-96页
            2.3.4 转基因植株eOsTEL的种子和株高有显著变化第96页
            2.3.5 过量表达OsGAP的转基因植株没有表型变化第96-97页
        2.4 eOsTEL转基因植株的表型分析第97-100页
        2.5 eOsTEL中OsTEL基因的转录水平和表达量都显著上调第100-102页
        2.6 eOsTEL转基因植株有显著的增产潜力第102-104页
        2.7 其它品种中OsTEL基因的表达情况第104-106页
        2.8 eOsTEL植株的组织和细胞水平分析第106-111页
            2.8.1 eOsTEL节间距变长第106-107页
            2.8.2 eOsTEL茎干和花轴的组织学分析第107-108页
            2.8.3 eOsTEL种子的组织和细胞水平分析第108-109页
            2.8.4 eOsTEL小穗的组织学分析第109-111页
        2.9 不同启动子调控OsTEL基因表达的转基因水稻的表型第111-113页
        2.10 GFP-OsTEL融合蛋白的定位第113页
        2.11 eOsTEL植株的RNA测序分析第113-114页
        2.12 eOsTEL中其它产量相关基因的表达情况第114-116页
            2.12.1 eOsTEL中调控分蘖数和种子粒数的基因的表达分析第114-115页
            2.12.2 eOsTEL中调控种子大小的基因的表达分析第115-116页
        2.13 eOsTEL中PLA1基因和PLA3基因的表达情况第116页
        2.14 OsTEL蛋白质不同结构域的功能鉴定第116-117页
        2.15 OsTEL基因的系统发育分析第117-119页
        2.16 水稻中其它Mei2-like基因和其它物种的TEL基因的功能分析第119-123页
            2.16.1 水稻中其它Mei2-like基因的过表达分析第119-120页
            2.16.2 其它物种中的TEL基因的过表达分析第120-123页
    3 讨论与展望第123-131页
        3.1 TEL基因的功能第123-124页
        3.2 增强OsTEL基因的表达对水稻组织和细胞的影响第124页
        3.3 OsTEL基因的应用前景第124-125页
        3.4 OsTEL基因对相关产量性状调控的机制第125-129页
            3.4.1 OsTEL基因的表达量和植株表型的关系第125-126页
            3.4.2 OsTEL蛋白质的亚细胞定位第126页
            3.4.3 OsTEL基因和其它产量相关基因的关系第126页
            3.4.4 OsTEL基因和其它PLA基因的关系第126-127页
            3.4.5 OsTEL基因和RNA相关pathway第127页
            3.4.6 OsTEL基因和KNOX基因第127-128页
            3.4.7 OsTEL基因和激素第128-129页
        3.5 OsTEL蛋白质的结构域的功能分析第129页
        3.6 OsTEL的同源基因的功能分析第129-130页
        3.7 展望第130-131页
    参考文献第131-134页
附录A 引物第134-137页
附录B 核酸序列第137-140页
附录C 载体结构示意图第140-141页
附录D 本研究中用来构建系统发育树的基因第141-143页
附录E Pathway显著性富集分析第143-144页
附录F 常用培养基配方第144-145页
附录G 主要生化试剂和仪器第145页

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