致谢 | 第6-8页 |
缩略词表 | 第8-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-14页 |
文献综述 | 第19-63页 |
1 TE1-like RNA结合蛋白的研究进展 | 第19-38页 |
1.1 引言 | 第19-21页 |
1.2 植物中的RNA结合蛋白及其功能 | 第21-22页 |
1.3 Mei2蛋白 | 第22-25页 |
1.4 TEL基因及其功能 | 第25-30页 |
1.4.1 TEL基因的发现 | 第25-27页 |
1.4.2 TEL基因的功能 | 第27-29页 |
1.4.3 TEL基因与植物激素 | 第29-30页 |
1.5 小结与展望 | 第30-33页 |
参考文献 | 第33-38页 |
2 禾本科作物产量相关性状及其分子基础 | 第38-63页 |
2.1 引言 | 第38页 |
2.2 产量相关性状 | 第38-39页 |
2.3 产量相关性状的分子调控 | 第39-54页 |
2.3.1 株高 | 第41-43页 |
2.3.2 分蘖数 | 第43-47页 |
2.3.3 穗子分支模式和种子数量 | 第47-51页 |
2.3.4 种子大小和灌浆 | 第51-53页 |
2.3.5 收获指数(HI) | 第53-54页 |
2.4 小结与展望 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
研究论文 | 第63-134页 |
引言 | 第63-65页 |
1 材料与方法 | 第65-89页 |
1.1 植物材料 | 第65页 |
1.2 菌株和质粒载体 | 第65页 |
1.3 主要工具酶 | 第65页 |
1.4 常用试剂、核酸、蛋白分子质量及试剂盒 | 第65页 |
1.5 引物 | 第65-66页 |
1.6 各种培养基的配置 | 第66页 |
1.7 常用生化试剂和仪器 | 第66页 |
1.8 基本分子生物学克隆操作 | 第66-72页 |
1.8.1 基因组DNA提取 | 第66页 |
1.8.2 PCR技术 | 第66-68页 |
1.8.3 凝胶回收 | 第68页 |
1.8.4 高保真酶扩增产物加A反应 | 第68页 |
1.8.5 连接反应 | 第68-69页 |
1.8.6 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第69-70页 |
1.8.7 质粒微量提取 | 第70页 |
1.8.8 酶切反应 | 第70-71页 |
1.8.9 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第71-72页 |
1.9 Southern blot | 第72-74页 |
1.10 突变体HSA-20外源T-DNA插入位点确定 | 第74-75页 |
1.11 蛋白质SDS-PAGE电泳 | 第75-76页 |
1.12 总RNA提取、纯化和cDNA第一链的合成 | 第76-77页 |
1.13 RT-PCR和qRT-PCR | 第77-78页 |
1.13.1 RT-PCR | 第77-78页 |
1.13.2 qRT-PCR | 第78页 |
1.14 OsTEL基因的系统发育分析 | 第78-79页 |
1.15 过表达OsTEL基因和其它相关基因的转化载体的构建 | 第79-82页 |
1.15.1 OsTEL基因过量表达载体的构建 | 第79-80页 |
1.15.2 OsGAP基因过量表达载体(eOsGAP)的构建 | 第80页 |
1.15.3 TE1基因过量表达载体(eTE1)的构建 | 第80页 |
1.15.4 OsTEL中RRMs及其旁侧序列过表达载体的构建 | 第80-81页 |
1.15.5 OML基因过量表达载体的构建 | 第81-82页 |
1.15.6 绿藻和杨树中TEL基因过表达载体的构建 | 第82页 |
1.16 农杆菌介导转基因水稻方法 | 第82-83页 |
1.17 农艺性状和产量的统计分析 | 第83页 |
1.18 eOsTEL中OsTEL基因的转录和表达水平分析 | 第83-85页 |
1.18.1 OsTEL基因转录水平的检测 | 第83页 |
1.18.2 OsTEL蛋白质表达水平分析 | 第83-85页 |
1.19 p35S的增强子的GUS染色分析 | 第85-86页 |
1.19.1 GUS系列载体构建 | 第85页 |
1.19.2 转基因植株染色分析 | 第85-86页 |
1.20 eOsTEL转基因植株的组织学分析 | 第86页 |
1.21 成熟水稻种子的SEM(扫描电镜)分析 | 第86页 |
1.22 OsTEL-GFP融合蛋白在烟草叶片细胞中的亚细胞定位 | 第86-87页 |
1.22.1 OsTEL-GFP融合蛋白表达载体构建 | 第86-87页 |
1.22.2 GFP在烟草叶片中的瞬时表达和观察 | 第87页 |
1.23 eOsTEL转基因植株的RNA测序和分析 | 第87-89页 |
2 结果与分析 | 第89-123页 |
2.1 突变体株系HSA-20与转基因受体株系有显著的表型差异 | 第89-91页 |
2.1.1 HSA-20株高变高和分蘖减少 | 第89-90页 |
2.1.2 谷粒变大以及千粒重增加 | 第90页 |
2.1.3 穗型变大和单穗粒数增多 | 第90-91页 |
2.2 突变体表型的分子机制分析 | 第91-94页 |
2.2.1 HSA-20的表型和表达HSA的T-DNA共分离 | 第91-93页 |
2.2.2 HSA-20中T-DNA的插入位点的确定 | 第93页 |
2.2.3 HSA-20中OsTEL基因的表达量被显著上调 | 第93-94页 |
2.3 HSA-20中T-DNA旁侧序列过量表达分析 | 第94-97页 |
2.3.1 引言 | 第94页 |
2.3.2 构建过量表达OsTEL基因的双元载体 | 第94-95页 |
2.3.3 eOsTEL在侵染后组织培养过程中有明显的表型差异 | 第95-96页 |
2.3.4 转基因植株eOsTEL的种子和株高有显著变化 | 第96页 |
2.3.5 过量表达OsGAP的转基因植株没有表型变化 | 第96-97页 |
2.4 eOsTEL转基因植株的表型分析 | 第97-100页 |
2.5 eOsTEL中OsTEL基因的转录水平和表达量都显著上调 | 第100-102页 |
2.6 eOsTEL转基因植株有显著的增产潜力 | 第102-104页 |
2.7 其它品种中OsTEL基因的表达情况 | 第104-106页 |
2.8 eOsTEL植株的组织和细胞水平分析 | 第106-111页 |
2.8.1 eOsTEL节间距变长 | 第106-107页 |
2.8.2 eOsTEL茎干和花轴的组织学分析 | 第107-108页 |
2.8.3 eOsTEL种子的组织和细胞水平分析 | 第108-109页 |
2.8.4 eOsTEL小穗的组织学分析 | 第109-111页 |
2.9 不同启动子调控OsTEL基因表达的转基因水稻的表型 | 第111-113页 |
2.10 GFP-OsTEL融合蛋白的定位 | 第113页 |
2.11 eOsTEL植株的RNA测序分析 | 第113-114页 |
2.12 eOsTEL中其它产量相关基因的表达情况 | 第114-116页 |
2.12.1 eOsTEL中调控分蘖数和种子粒数的基因的表达分析 | 第114-115页 |
2.12.2 eOsTEL中调控种子大小的基因的表达分析 | 第115-116页 |
2.13 eOsTEL中PLA1基因和PLA3基因的表达情况 | 第116页 |
2.14 OsTEL蛋白质不同结构域的功能鉴定 | 第116-117页 |
2.15 OsTEL基因的系统发育分析 | 第117-119页 |
2.16 水稻中其它Mei2-like基因和其它物种的TEL基因的功能分析 | 第119-123页 |
2.16.1 水稻中其它Mei2-like基因的过表达分析 | 第119-120页 |
2.16.2 其它物种中的TEL基因的过表达分析 | 第120-123页 |
3 讨论与展望 | 第123-131页 |
3.1 TEL基因的功能 | 第123-124页 |
3.2 增强OsTEL基因的表达对水稻组织和细胞的影响 | 第124页 |
3.3 OsTEL基因的应用前景 | 第124-125页 |
3.4 OsTEL基因对相关产量性状调控的机制 | 第125-129页 |
3.4.1 OsTEL基因的表达量和植株表型的关系 | 第125-126页 |
3.4.2 OsTEL蛋白质的亚细胞定位 | 第126页 |
3.4.3 OsTEL基因和其它产量相关基因的关系 | 第126页 |
3.4.4 OsTEL基因和其它PLA基因的关系 | 第126-127页 |
3.4.5 OsTEL基因和RNA相关pathway | 第127页 |
3.4.6 OsTEL基因和KNOX基因 | 第127-128页 |
3.4.7 OsTEL基因和激素 | 第128-129页 |
3.5 OsTEL蛋白质的结构域的功能分析 | 第129页 |
3.6 OsTEL的同源基因的功能分析 | 第129-130页 |
3.7 展望 | 第130-131页 |
参考文献 | 第131-134页 |
附录A 引物 | 第134-137页 |
附录B 核酸序列 | 第137-140页 |
附录C 载体结构示意图 | 第140-141页 |
附录D 本研究中用来构建系统发育树的基因 | 第141-143页 |
附录E Pathway显著性富集分析 | 第143-144页 |
附录F 常用培养基配方 | 第144-145页 |
附录G 主要生化试剂和仪器 | 第145页 |