| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 文献综述 | 第8-16页 |
| 1.1 表皮生长因子的研究进展 | 第8-9页 |
| 1.1.1 表皮生长因子的结构与特性 | 第8-9页 |
| 1.1.2 表皮生长因子的调控 | 第9页 |
| 1.2 表皮生长因子受体 | 第9-11页 |
| 1.2.1 受体的分布 | 第10页 |
| 1.2.2 受体活化与信号转导机制 | 第10页 |
| 1.2.3 JAK-STAT信号通路 | 第10-11页 |
| 1.3 表皮生长因子的功能 | 第11-13页 |
| 1.3.1 EGF在胚胎发育中的表达 | 第12页 |
| 1.3.2 EGF在组织再生中的表达变化 | 第12-13页 |
| 1.4 表皮生长因子临床上的应用 | 第13-15页 |
| 1.4.1 对上皮细胞的作用及临床应用 | 第13页 |
| 1.4.2 对肿瘤的作用 | 第13页 |
| 1.4.3 在肝损伤修复和再生中的作用 | 第13-14页 |
| 1.4.4 对呼吸系统的作用与临床应用 | 第14页 |
| 1.4.5 EGF对生殖系统的作用 | 第14页 |
| 1.4.6 与糖尿病的关系及继发病理变化 | 第14页 |
| 1.4.7 在角膜中的生物活性及与相关疾病 | 第14页 |
| 1.4.8 在神经系统的作用 | 第14页 |
| 1.4.9 在消化系统的作用及临床应用 | 第14-15页 |
| 1.5 在其他方面的应用 | 第15-16页 |
| 2 引言 | 第16-18页 |
| 2.1 研究的目的及意义 | 第16页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第16-17页 |
| 2.2.1 家蚕EGF基因的克隆 | 第16页 |
| 2.2.2 家蚕EGF基因转录水平的研究 | 第16页 |
| 2.2.3 家蚕EGF基因的原核表达 | 第16-17页 |
| 2.3 技术路线 | 第17-18页 |
| 3 材料与方法 | 第18-28页 |
| 3.1 实验材料 | 第18页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第18-21页 |
| 3.2.1 主要实验仪器 | 第18页 |
| 3.2.2 主要生化试剂 | 第18-19页 |
| 3.2.3 常用溶液的配置 | 第19-21页 |
| 3.3 实验方法 | 第21-28页 |
| 3.3.1 家蚕的饲养 | 第21页 |
| 3.3.2 家蚕组织的收集 | 第21页 |
| 3.3.3 家蚕基因组RNA的提取 | 第21-22页 |
| 3.3.4 第一链cDNA的合成 | 第22页 |
| 3.3.5 家蚕EGF基因cDNA的扩增 | 第22-23页 |
| 3.3.6 PCR扩增后目的产物的纯化 | 第23-24页 |
| 3.3.7 感受态细胞的制备 | 第24页 |
| 3.3.8 目的片段的连接和转化 | 第24页 |
| 3.3.9 提取的总RNA的质量检测 | 第24-25页 |
| 3.3.10 家蚕EGF基因的生物信息学分析 | 第25页 |
| 3.3.11 家蚕EGF基因的原核表达 | 第25-26页 |
| 3.3.12 Western blot分析 | 第26-27页 |
| 3.3.13 家蚕EGF转录水平的研究 | 第27-28页 |
| 4 结果与分析 | 第28-38页 |
| 4.1 家蚕总RNA的检测 | 第28页 |
| 4.2 第一链cDNA浓度的测定 | 第28页 |
| 4.3 BmEGF基因PCR扩增结果 | 第28页 |
| 4.4 BmEGF基因序列的测定和分析 | 第28-29页 |
| 4.5 BmEGF的生物信息学分析 | 第29-33页 |
| 4.5.1 氨基酸同源性与系统进化树的分析 | 第29-31页 |
| 4.5.2 蛋白质基本理化性质分析 | 第31页 |
| 4.5.3 亲疏水性预测 | 第31-32页 |
| 4.5.4 跨膜区域结果预测 | 第32页 |
| 4.5.5 BmEGF蛋白的信号肽分析 | 第32-33页 |
| 4.5.6 蛋白定位的预测 | 第33页 |
| 4.6 BmEGF基因转录水平的研究 | 第33-36页 |
| 4.6.1 qRT-PCR扩增条件的确定 | 第33-34页 |
| 4.6.2 不同组织中的表达差异分析 | 第34页 |
| 4.6.3 不同发育阶段中的表达差异分析 | 第34页 |
| 4.6.4 微生物处理后的表达差异分析 | 第34-36页 |
| 4.7 原核表达载体的构建 | 第36页 |
| 4.8 BmEGF基因在大肠杆菌中的表达 | 第36-37页 |
| 4.9 不同条件下的原核表达 | 第37-38页 |
| 4.9.1 IPTG不同诱导浓度的原核表达 | 第37-38页 |
| 5 讨论 | 第38-40页 |
| 5.1 BmEGF基因cDNA的一级结构及特性 | 第38页 |
| 5.2 荧光定量PCR | 第38-39页 |
| 5.2.1 BmEGF在家蚕不同发育时期及其组织中的转录水平 | 第38页 |
| 5.2.2 病原微生物刺激后BmEGF在家蚕组织中的转录水平 | 第38-39页 |
| 5.3 BmEGF的原核表达 | 第39-40页 |
| 6 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 个人简介 | 第47页 |