| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 英文缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-36页 |
| 1.1 PCBs污染现状及危害 | 第14-15页 |
| 1.2 国内外PCBs污染土壤修复研究现状 | 第15-33页 |
| 1.2.1 微生物修复技术研究进展 | 第16-20页 |
| 1.2.2 植物修复技术研究进展 | 第20-24页 |
| 1.2.3 植物修复技术存在的问题 | 第24-26页 |
| 1.2.4 提高植物修复PCBs效能的策略 | 第26-33页 |
| 1.2.4.1 诱导好氧和厌氧降解 | 第26-27页 |
| 1.2.4.2 外源添加营养物质和电子受体 | 第27-29页 |
| 1.2.4.3 转基因植物修复 | 第29-31页 |
| 1.2.4.4 加入表面活性剂 | 第31-32页 |
| 1.2.4.5 微生物强化技术 | 第32-33页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第33页 |
| 1.4 研究内容与技术路线 | 第33-36页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第33-35页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第35-36页 |
| 第二章 转bphC.B基因苜蓿的选育 | 第36-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-39页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第37页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第37-38页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第38-39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-43页 |
| 2.2.1 bphC.B基因的克隆 | 第39-40页 |
| 2.2.2 植物表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 2.2.3 苜蓿遗传转化和转基因植株的筛选 | 第41-43页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第43-48页 |
| 2.3.1 bphC.B基因的克隆及鉴定 | 第43-44页 |
| 2.3.2 植物表达载体的构建及鉴定 | 第44-45页 |
| 2.3.3 农杆菌介导法转化苜蓿 | 第45-46页 |
| 2.3.4 苜蓿转化植株的抗性筛选 | 第46-48页 |
| 2.4 小结 | 第48-50页 |
| 第三章 转bphC.B苜蓿的鉴定及其对PCBs耐受性研究 | 第50-70页 |
| 3.1 实验材料 | 第50-53页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第50页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第50-51页 |
| 3.1.3 主要试剂配制 | 第51-52页 |
| 3.1.4 菌株 | 第52页 |
| 3.1.5 实验动物 | 第52-53页 |
| 3.2 实验方法 | 第53-60页 |
| 3.2.1 转基因苜蓿的PCR检测方法 | 第53-54页 |
| 3.2.2 转基因苜蓿的RT -PCR检测方法 | 第54-55页 |
| 3.2.3 转 bphC.B苜蓿 Western blot 检测方法 | 第55-58页 |
| 3.2.4 转基因苜蓿对联苯的耐受性分析 | 第58页 |
| 3.2.5 转基因苜蓿体内bphC.B酶活检测 | 第58页 |
| 3.2.6 转基因苜蓿对PCBs的耐受性分析 | 第58-60页 |
| 3.2.7 数据的统计与分析 | 第60页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第60-69页 |
| 3.3.1 转基因苜蓿的分子鉴定 | 第60-64页 |
| 3.3.2 转基因苜蓿对联苯耐受性 | 第64-65页 |
| 3.3.3 转基因苜蓿体内酶活 | 第65-66页 |
| 3.3.4 转基因苜蓿对PCBs的耐受性 | 第66-69页 |
| 3.4 小结 | 第69-70页 |
| 第四章 AlnA基因的克隆表达及其对PCBs增溶性能研究 | 第70-96页 |
| 4.1 实验材料 | 第70-73页 |
| 4.1.1 菌株及载体 | 第70-71页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第71页 |
| 4.1.3 主要试验仪器 | 第71页 |
| 4.1.4 主要培养基与试剂配制 | 第71-72页 |
| 4.1.5 PCBs及其污染的土壤制备 | 第72-73页 |
| 4.2 实验方法 | 第73-80页 |
| 4.2.1 AlnA基因的克隆 | 第73-74页 |
| 4.2.2 原核表达载体的构建 | 第74-75页 |
| 4.2.3 AlnA的原核表达 | 第75-76页 |
| 4.2.4 蛋白AlnA的表面张力测定 | 第76-77页 |
| 4.2.5 蛋白AlnA对PCBs晶体溶解活性检测 | 第77页 |
| 4.2.6 测定蛋白AlnA的吸附特性和解析能力 | 第77-78页 |
| 4.2.7 检测蛋白AlnA对苜蓿吸收土壤中PCB促进作用 | 第78-79页 |
| 4.2.8 PCBs的提取及定量分析 | 第79页 |
| 4.2.9 AlnA蛋白对PCBs溶解机制研究 | 第79-80页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第80-94页 |
| 4.3.1 AlnA 基因的PCR克隆及序列分析 | 第80-81页 |
| 4.3.2 构建重组质粒pET28a-AlnA及其酶切验证 | 第81页 |
| 4.3.3 AlnA原核表达及鉴定 | 第81-83页 |
| 4.3.4 AlnA蛋白对PCBs的溶解活性 | 第83-85页 |
| 4.3.5 蛋白AlnA的表面活性和吸附特性 | 第85-86页 |
| 4.3.6 AlnA蛋白对土壤中PCBs的解析能力 | 第86-87页 |
| 4.3.7 AlnA蛋白促进苜蓿吸收土壤中PCBs能力 | 第87-90页 |
| 4.3.8 分子模拟解析AlnA蛋白与PCBs互作机制 | 第90-94页 |
| 4.4 小结 | 第94-96页 |
| 第五章 转bphC苜蓿-乳化蛋白AlnA联合修复PCBs污染土壤 | 第96-114页 |
| 5.1 实验材料 | 第96-98页 |
| 5.1.1 供试植物及乳化蛋白AlnA | 第96-97页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第97页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第97页 |
| 5.1.4 主要试剂配制 | 第97-98页 |
| 5.1.5 供试土壤 | 第98页 |
| 5.2 实验方法 | 第98-103页 |
| 5.2.1 实验设计 | 第98页 |
| 5.2.2 植物的生理性状测定 | 第98-99页 |
| 5.2.3 PCBs的提取及定量分析 | 第99-100页 |
| 5.2.4 Real-time PCR检测土壤中PCBs降解基因丰度 | 第100-102页 |
| 5.2.5 土壤中酶活性测定 | 第102-103页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第103-112页 |
| 5.3.1 PCBs对植物的生理性状影响 | 第103-105页 |
| 5.3.2 土壤及植株体内PCBs含量分析 | 第105-108页 |
| 5.3.3 土壤中PCBs降解基因丰度变化 | 第108-109页 |
| 5.3.4 土壤中酶活性变化 | 第109-112页 |
| 5.4 小结 | 第112-114页 |
| 第六章 结论与建议 | 第114-118页 |
| 6.1 结论 | 第114-116页 |
| 6.2 建议 | 第116-118页 |
| 参考文献 | 第118-140页 |
| 攻读博士期间所取得的科研成果 | 第140-141页 |
| 致谢 | 第141页 |
