| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-22页 |
| ·病原学 | 第15-18页 |
| ·分类 | 第15页 |
| ·形态结构与理化性质 | 第15-16页 |
| ·培养特性 | 第16页 |
| ·流行病学调查 | 第16-18页 |
| ·TTV 分子生物学 | 第18-19页 |
| ·TTV 基因组特征 | 第18-19页 |
| ·猪输血传播病毒诊断技术的研究进展 | 第19-21页 |
| ·病原学诊断方法 | 第19-20页 |
| ·血清学诊断方法 | 第20-21页 |
| ·电镜技术 | 第21页 |
| ·研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 猪输血传播病毒与猪圆环病毒混合感染的检测及PTTV 遗传变异分析 | 第22-30页 |
| ·材料和方法 | 第23-25页 |
| ·病料 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·样品处理及DNA 提取 | 第23页 |
| ·PTTV1、PTTV2、PCV1 和PCV2 的PCR 检测 | 第23-24页 |
| ·PTTV1 和PTTV2 全基因组扩增 | 第24页 |
| ·病毒基因组克隆及质粒鉴定 | 第24页 |
| ·病毒基因组测序及分析 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-29页 |
| ·临床送检病料检测 | 第25-26页 |
| ·PTTV1 和PTTV2 基因序列扩增 | 第26-27页 |
| ·PTTV1 和PTTV2 基因组同源性分析 | 第27页 |
| ·PTTV1 和PTTV2 系统进化树构建 | 第27-28页 |
| ·PTTV1 和PTTV2 不同毒株遗传变异分析 | 第28页 |
| ·PTTV1 和PTTV2 基因结构分析 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 猪输血传播病毒2 型重组Cap 蛋白在杆状病毒中的表达 | 第30-37页 |
| ·材料和方法 | 第30-31页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的构建 | 第31页 |
| ·DNA 转染和病毒蚀斑克隆 | 第31页 |
| ·重组蛋白质表达分析 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-36页 |
| ·PTTV2-ORF1 基因的扩增与克隆 | 第31-32页 |
| ·重组质粒序列分析 | 第32页 |
| ·重组杆状病毒的克隆筛选 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第33-35页 |
| ·重组蛋白的免疫活性鉴定 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 猪输血传播病毒2 型（PTTV2）ORF1 基因的原核表达 | 第37-42页 |
| ·材料方法 | 第37-39页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37-38页 |
| ·表达质粒的构建 | 第38页 |
| ·重组质粒在Rosetta（DE3）感受态细胞里的诱导表达 | 第38页 |
| ·重组蛋白的Western-blot 分析 | 第38页 |
| ·重组蛋白的包涵体纯化 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-41页 |
| ·PTTV2-ORF1 基因的扩增及重组质粒酶切鉴定 | 第39页 |
| ·重组质粒序列分析 | 第39页 |
| ·重组蛋白SDS-PAGE 及Western-blot 检测 | 第39-40页 |
| ·PTTV2-Cap 融合表达蛋白的纯化 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 第五章 猪输血传播病毒2 型感染性克隆的构建及病毒拯救 | 第42-48页 |
| ·材料和方法 | 第42-44页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·样品处理及DNA 提取 | 第43页 |
| ·引物设计及PCR 扩增 | 第43页 |
| ·融合PCR 构建PTTV2 基因组 | 第43-44页 |
| ·DNA 转染和细胞传代 | 第44页 |
| ·细胞培养物DNA 提取及PCR 检测 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-47页 |
| ·PTTV2 基因组分段扩增及其电泳结果 | 第44-45页 |
| ·融合长片段的获得 | 第45页 |
| ·PTTV2 基因组的获得及其重组质粒的构建 | 第45-46页 |
| ·PTTV 基因组体外环化及转染PK-15 细胞和ST 细胞 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| 第六章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 附录1 | 第52-55页 |
| 附录2 | 第55-56页 |
| 附录3 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简历 | 第58页 |
