摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
中英文缩略词表 | 第8-9页 |
第1章 引言 | 第9-12页 |
第2章 材料和方法 | 第12-22页 |
2.1 实验材料 | 第12-13页 |
2.1.1 细胞株 | 第12页 |
2.1.2 主要仪器 | 第12页 |
2.1.3 主要试剂及材料 | 第12-13页 |
2.2 实验方法 | 第13-21页 |
2.2.1 人结肠癌HCT116细胞株的培养 | 第13-14页 |
2.2.2 miR-320a mimics转染HCT116结肠癌细胞 | 第14-15页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR检测miR-320a表达量 | 第15-16页 |
2.2.4 平板克隆形成实验 | 第16-17页 |
2.2.5 CCK-8 法检测细胞增殖 | 第17页 |
2.2.6 Transwell细胞侵袭实验 | 第17页 |
2.2.7 生物信息学预测miR-320 靶基因 | 第17-18页 |
2.2.8 荧光素酶报告基因试验 | 第18-19页 |
2.2.9 实时定量PCR检测转染后结肠癌细胞基因mRNA表达量 | 第19页 |
2.2.10 Western blotting | 第19-21页 |
2.3 统计分析 | 第21-22页 |
第3章 结果 | 第22-28页 |
3.1 荧光显微镜下观察HCT116癌细胞的转染效率 | 第22页 |
3.2 实时定量PCR验证结肠癌细胞转染效率 | 第22-23页 |
3.3 miR-320a对结肠癌细胞增殖的影响 | 第23-24页 |
3.3.1 克隆形成实验 | 第23页 |
3.3.2 CCK法检测细胞活力 | 第23-24页 |
3.4 miR-320a对结肠癌细胞侵袭能力的影响 | 第24-25页 |
3.5 miR-320a在结肠癌细胞中与FOXQ1之间的相互关系 | 第25-28页 |
3.5.1 FOXQ13’UTR双荧光素酶报告基因建立 | 第25页 |
3.5.2 荧光素酶活性检测验证FOXQ1为miR-320a的靶基因 | 第25-26页 |
3.5.3 实时定量PCR检测HCT116细胞中FOXQ1 mRNA的表达水平 | 第26-27页 |
3.5.4 Western blot检测HCT116细胞中FOXQ1蛋白水平的表达情况 | 第27-28页 |
第4章 讨论 | 第28-31页 |
第5章 结论 | 第31-32页 |
致谢 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-35页 |
攻读学位期间发表论文、奖励 | 第35-36页 |
综述 | 第36-42页 |
参考文献 | 第41-42页 |