| 前言 | 第11-13页 |
| 第一篇 文献综述 | 第13-57页 |
| 第一章 马病毒性动脉炎研究进展 | 第13-45页 |
| 第二章 汉逊酵母表达体系研究进展 | 第45-57页 |
| 第二篇 研究内容 | 第57-141页 |
| 第一章 马动脉炎病毒结构蛋白GP5、M、N 基因的克隆、序列分析及原核表达研究 | 第57-83页 |
| 1 材料和方法 | 第58-63页 |
| 2 结果 | 第63-76页 |
| 2.1 病毒产生的细胞病变结果 | 第63-64页 |
| 2.2 GP5、M 和N 基因的RT-PCR 扩增结果 | 第64页 |
| 2.3 重组质粒的pUC18-GP5、pUC18-M、pMD18-T-N PCR 和酶切鉴定 | 第64页 |
| 2.4 基因的序列测定及其分析 | 第64-67页 |
| 2.5 GP5、M、N和M截短Mt基因片段的扩增及重组表达载体的构建和鉴定 | 第67-72页 |
| 2.6 目的蛋白在大肠杆菌中的诱导表达和SDS-PAGE 分析 | 第72页 |
| 2.7 Western-blotting 检测结果 | 第72-76页 |
| 3 讨论 | 第76-81页 |
| 4 小结 | 第81-83页 |
| 第二章 马动脉炎病毒结构蛋白及其串联表位在汉逊酵母中的表达研究 | 第83-105页 |
| 1 材料和方法 | 第84-95页 |
| 2 结果 | 第95-101页 |
| 2.1 全基因目的片段的PCR 扩增 | 第95-96页 |
| 2.2 酵母重组全基因载体的PCR 及酶切鉴定 | 第96-98页 |
| 2.3 全基因重组酵母工程菌的PCR鉴定 | 第98-99页 |
| 2.4 汉逊重组酵母GP5-M-N 工程菌的诱导表达产物的SDS-PAGE 与Western blot | 第99-101页 |
| 3 讨论 | 第101-104页 |
| 4 小结 | 第104-105页 |
| 第三章 马动脉炎病毒核酸疫苗表达载体的构建、表达与实验免疫研究 | 第105-123页 |
| 1 材料和方法 | 第106-111页 |
| 2 结果 | 第111-117页 |
| 2.1 重组表达载体的构建及鉴定 | 第111-113页 |
| 2.2 重组表达载体在BHK-21 细胞上的瞬时表达与检测 | 第113-114页 |
| 2.3 重组表达载体转录水平检测结果 | 第114-115页 |
| 2.4 基因疫苗免疫大鼠ELISA 抗体检测结果 | 第115-116页 |
| 2.5 基因疫苗免疫大鼠血清中和抗体检测结果 | 第116-117页 |
| 3 讨论 | 第117-121页 |
| 4 小结 | 第121-123页 |
| 第四章 马动脉炎病毒Real-Time PCR 检测方法的建立 | 第123-131页 |
| 1 材料和方法 | 第123-126页 |
| 2 结果 | 第126-129页 |
| 2.1 常规PCR 和TaqMan RT-PCR 的特异性分析 | 第126页 |
| 2.2 引物和探针浓度的筛选 | 第126-127页 |
| 2.3 TaqMan RT-PCR 的敏感性及标准曲线的建立 | 第127-128页 |
| 2.4 重复性和稳定性试验 | 第128-129页 |
| 3 讨论 | 第129-130页 |
| 4 小结 | 第130-131页 |
| 第五章 马动脉炎病毒核蛋白基因重组抗原间接ELISA检测方法的初步建立 | 第131-141页 |
| 1 材料和方法 | 第131-133页 |
| 2 结果 | 第133-137页 |
| 2.1 重组N蛋白的纯化效果 | 第133-134页 |
| 2.2 抗原最佳包被浓度与血清最佳稀释度的确定 | 第134-135页 |
| 2.3 封闭液的选择 | 第135页 |
| 2.4 判定标准的确定 | 第135-136页 |
| 2.5 特异性试验 | 第136页 |
| 2.6 重复性试验 | 第136-137页 |
| 3 讨论 | 第137-139页 |
| 4 小结 | 第139-141页 |
| 结论 | 第141-143页 |
| 参考文献 | 第143-163页 |
| 附录 | 第163-177页 |
| 攻博期间发表的学术论文及其他成果 | 第177-179页 |
| 致谢 | 第179-181页 |
| 导师及作者简介 | 第181-185页 |
| 中文摘要 | 第185-189页 |
| 英文摘要 | 第189页 |
