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RNA解旋酶Rig-I对巨噬细胞的影响及作用机制研究

摘要第5-6页
英文摘要第6-9页
中英文缩略词对照表第12-15页
第一部分 Rig-I对巨噬细胞的数量及凋亡的影响第15-32页
    1. 引言第15-17页
    2. 实验材料第17-20页
        2.1 主要生化与分子细胞生物学试剂第17-18页
        2.2 主要溶液配方第18页
        2.3 主要仪器设备第18-19页
        2.4 实验动物第19页
        2.5 PCR引物设计与合成第19-20页
    3. 实验方法第20-25页
        3.1 鼠尾DNA的提取第20页
        3.2 Rig-I基因敲除老鼠的鉴定第20-21页
        3.3 小鼠腹腔巨噬细胞的提取和培养第21-22页
        3.4 腹腔巨噬细胞的凋亡第22页
        3.5 腹腔巨噬细胞比例的检测第22页
        3.6 腹腔巨噬细胞的分群第22-23页
        3.7 RT-PCR检测凋亡相关基因的表达水平第23-25页
        3.8 统计分析第25页
    4. 实验结果第25-29页
        4.1 Rig-I基因增加腹腔巨噬细胞的比例第25-26页
        4.2 Rig-I基因抑制腹腔巨噬细胞的凋亡第26-27页
        4.3 Rig-I基因对腹腔巨细胞的分群发挥重要作用第27-29页
    5. 讨论第29-31页
    6. 本部分总结第31-32页
第二部分 Rig-I对LPS诱导的巨噬细胞增殖,凋亡及功能的作用研究第32-62页
    1. 引言第32-39页
    2. 实验材料第39-42页
        2.1 材料第39页
        2.2 主要化学与分子生物学实验试剂第39-40页
        2.3 主要试剂配方第40页
        2.4 PCR引物设计与合成第40-41页
        2.5 实验仪器第41-42页
    3. 实验方法第42-48页
        3.1 细胞复苏,培养,冻存和计数第42页
        3.2 质粒提取,纯化和酶切鉴定第42-44页
        3.3 Rig-I基因沉默Raw264.7 细胞株构建第44页
        3.4 Rig-I高表达Raw264.7 细胞株构建第44页
        3.5 LPS处理Raw264.7 细胞株第44-45页
        3.6 细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK8 )检测细胞增殖第45页
        3.7 流式细胞术检测细胞凋亡第45页
        3.8 qPCR检测细胞因子的表达量第45-46页
        3.9 细胞迁移实验第46页
        3.10 细胞粘附试验第46-47页
        3.11 Western Blot第47页
        3.12 统计分析第47-48页
    4. 结果第48-58页
        4.1 Rig-I基因促进巨噬细胞的增殖第48-49页
        4.2 Rig-I基因抑制LPS诱导的巨噬细胞凋亡第49-50页
        4.3 Rig-I促进LPS诱导的巨噬细胞细胞因子的表达第50-52页
        4.4 Rig-I促进LPS诱导的巨噬细胞的迁移第52-53页
        4.5 Rig-I促进LPS诱导的巨噬细胞与细胞外基质的粘附作用第53-55页
        4.6 Rig-I促进LPS诱导的AKT磷酸化和下游NF-κB通路的激活第55-58页
    5. 讨论第58-61页
    6. 本部分结论第61-62页
参考文献第62-68页
致谢第68-71页
攻读硕士期间发表的学术论文第71页

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