| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-34页 |
| 第一章 卵母细胞减数分裂机制研究进展 | 第13-24页 |
| ·减数分裂概述 | 第13-14页 |
| ·与卵母细胞减数分裂相关的复合物 | 第14-24页 |
| ·成熟促进因子 | 第14-18页 |
| ·MPF 的结构 | 第15页 |
| ·MPF 的功能 | 第15-16页 |
| ·MPF 活性的调节 | 第16-18页 |
| ·泛素-蛋白酶体复合体 | 第18-19页 |
| ·泛素-蛋白酶体的组成与功能 MPF 活性的调节 | 第18-19页 |
| ·泛素-蛋白酶体与细胞分裂 | 第19页 |
| ·后期促进复合物 | 第19-21页 |
| ·APC/C的结构与功能 | 第19-20页 |
| ·APC/C对底物的识别 | 第20页 |
| ·APC/C的调控 | 第20-21页 |
| ·纺锤体检查点 | 第21-24页 |
| ·纺锤体检查点结构与功能 | 第21-23页 |
| ·异常的纺锤体检查点 | 第23-24页 |
| 第二章 CDC20研究进展 | 第24-34页 |
| ·CDC20概述 | 第24-26页 |
| ·CDC20的结构与功能 | 第24-26页 |
| ·CDC20与有丝分裂 | 第26-27页 |
| ·CDC20与卵母细胞减数分裂 | 第27-28页 |
| ·CDC20与肿瘤发生 | 第28页 |
| ·CDC20表达与调控 | 第28-34页 |
| ·CDC20的表达 | 第28-29页 |
| ·CDC20与 APC/C | 第29-30页 |
| ·CDC20与纺锤体检查点 | 第30-31页 |
| ·CDC20与 Emi 1 和 Emi 2 | 第31-33页 |
| ·CDC20的其他调控 | 第33-34页 |
| 第二部分 试验研究 | 第34-65页 |
| 第三章 牛 cdc20基因克隆及其真核表达载体构建 | 第34-42页 |
| ·材料与方法 | 第34-38页 |
| ·仪器设备 | 第34-35页 |
| ·材料和试剂 | 第35-38页 |
| ·牛 cdc20基因克隆及序列鉴定 | 第35-36页 |
| ·pcdc20-venus真核表达载体构建 | 第36-37页 |
| ·pcdc20-venus转染 Hela 细胞 | 第37页 |
| ·RT-PCR 鉴定 pcdc20-venus在 Hela 细胞表达情况 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-40页 |
| ·cdc20基因的克隆与载体构建 | 第38-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| ·cdc20基因克隆与真核表达载体构建 | 第41页 |
| ·pcdc20-venus质粒转染 Hela 细胞 | 第41-42页 |
| 第四章 mRNA 的制备及 Morpholino 干扰效率测定与牛卵内源 mRNA 检测 | 第42-50页 |
| ·材料与方法 | 第43-45页 |
| ·仪器设备 | 第43页 |
| ·材料和试剂 | 第43页 |
| ·cdc20-venus与 venusmRNA 的制备 | 第43页 |
| ·牛卵母细胞培养 | 第43-44页 |
| ·实时定量 PCR 测定牛卵内源性 mRNA | 第44页 |
| ·显微注射 | 第44-45页 |
| ·数据统计 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-48页 |
| ·体外培养不同时期卵母细胞中 cdc20mRNA 水平测定 | 第45-46页 |
| ·cdc20-venus与 venusmRNA 的制备 | 第46页 |
| ·cdc20-venus与 venusmRNA 在牛卵母细胞中的表达 | 第46-47页 |
| ·Morpholino 的干扰效率 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| ·体外转录制备 mRNA | 第49页 |
| ·体外转录产物向卵母细胞的注射 | 第49页 |
| ·干扰效率测定 | 第49-50页 |
| 第五章 异常表达 cdc20对牛卵母细胞对第一极体的排出的影响 | 第50-59页 |
| ·材料与方法 | 第50-51页 |
| ·仪器设备 | 第50页 |
| ·材料和试剂 | 第50页 |
| ·牛卵母细胞培养 | 第50页 |
| ·显微注射 | 第50-51页 |
| ·数据统计 | 第51页 |
| ·免疫荧光染色 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-55页 |
| ·mRNA 在卵母细胞内的表达情况 | 第51-52页 |
| ·超表达 cdc20对第一极体排出率的影响 | 第52-53页 |
| ·干扰 cdc20对第一极体排出率的影响 | 第53-54页 |
| ·干扰 cdc20对纺锤体影响 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| ·超表达 cdc20对第一极体排出率的影响 | 第58页 |
| ·干扰 cdc20使第一极体排出率极显著下降 | 第58页 |
| ·干扰 cdc20使纺锤体受损 | 第58-59页 |
| 第六章 异常表达 cdc20对牛卵母细胞卵裂的影响 | 第59-65页 |
| ·材料与方法 | 第59-61页 |
| ·仪器设备 | 第59页 |
| ·材料和试剂 | 第59页 |
| ·牛卵母细胞的培养 | 第59页 |
| ·显微注射 | 第59-60页 |
| ·孤雌激活及孤雌胚胎培养 | 第60页 |
| ·Hoechst33342染色观察 | 第60-61页 |
| ·数据统计 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-64页 |
| ·超表达 cdc20 对卵裂率的影响 | 第61-62页 |
| ·干扰 cdc20 对卵裂率的影响 | 第62-64页 |
| ·讨论 | 第64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| ·超表达 cdc20 对卵裂率的影响 | 第64页 |
| ·干扰 cdc20 对卵裂率的影响 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65页 |
| 本研究的创新点与进一步研究的课题 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 缩略词对照 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77-78页 |
