| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-22页 |
| 1 穴蚁蛉幼虫的研究进展 | 第9-11页 |
| ·穴蚁蛉幼虫简介 | 第9-10页 |
| ·药用价值 | 第10-11页 |
| ·功能基因研究 | 第11页 |
| 2 全长均一化cDNA文库的构建 | 第11-18页 |
| ·cDNA文库的特点及分类 | 第11-13页 |
| ·全长均一化cDNA文库的方法及原理 | 第13-17页 |
| ·cDNA文库的应用及缺点 | 第17-18页 |
| 3 EST技术研究概况 | 第18-21页 |
| ·EST的概念及原理 | 第18-19页 |
| ·EST的应用 | 第19-21页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 大肠杆菌免疫刺激蚁狮全长均一化cDNA文库的构建 | 第22-42页 |
| 1 实验材料、试剂及设备 | 第22-23页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第23-34页 |
| ·大肠杆菌免疫刺激蚁狮 | 第24页 |
| ·蚁狮血淋巴抑菌试验 | 第24页 |
| ·总RNA的提取及mRNA分离 | 第24-26页 |
| ·cDNA的合成 | 第26-27页 |
| ·cDNA的均一化 | 第27-31页 |
| ·Sfi I酶处理并回收 | 第31-32页 |
| ·cDNA与载体pDNR-LIB连接 | 第32页 |
| ·电转化 | 第32-33页 |
| ·原始均一文库滴度的测定 | 第33页 |
| ·原始文库的扩增及扩增文库滴度的测定 | 第33-34页 |
| ·文库插入片段检测 | 第34页 |
| ·随机挑选单克隆进行5'端EST测序 | 第34页 |
| 3 实验结果 | 第34-39页 |
| ·蚁狮血淋巴抑菌试验 | 第35页 |
| ·总RNA的提取及mRNA分离 | 第35-36页 |
| ·全长cDNA的合成 | 第36页 |
| ·均一化 | 第36-37页 |
| ·均一化cDNA后第二次扩增 | 第37-38页 |
| ·文库滴度计算 | 第38页 |
| ·插入片段长度和重组率的检测 | 第38-39页 |
| ·部分单克隆EST测序及文库重组率 | 第39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| ·蚁狮诱导 | 第39页 |
| ·RNA的提取及mRNA分离 | 第39页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第39-40页 |
| ·克隆数目和重组率的鉴定 | 第40-41页 |
| 5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 部分单克隆EST测序及分析 | 第42-57页 |
| 1 材料与方法 | 第42-44页 |
| ·实验材料 | 第42页 |
| ·测序 | 第42页 |
| ·软件 | 第42-43页 |
| ·数据库 | 第43页 |
| ·分析方法 | 第43-44页 |
| ·EST分析流程 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-53页 |
| ·EST序列信息处理及结果 | 第44-46页 |
| ·功能基因预测及GO注释 | 第46-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| ·EST批量注释与功能分类 | 第54页 |
| ·EST功能基因的预测 | 第54-55页 |
| 4 本章总结 | 第55-57页 |
| 第四章 展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 附表1 EST序列GenBank登录码 | 第66-73页 |
| 硕士期间发表论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |