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海水鱼类病原菌迟缓爱德华氏菌和海豚链球菌的致病机制

致谢第4-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 前言第12-42页
    1.1 迟缓爱德华氏菌第12-16页
        1.1.1 迟缓爱德华氏菌研究概况第12页
        1.1.2 迟缓爱德华氏菌的生物学危害第12-13页
        1.1.3 迟缓爱德华氏菌的感染及毒力因子的相互作用第13-15页
        1.1.4 毒力机制和发病机理第15-16页
        1.1.5 迟缓爱德华氏菌致病机制的调控和干扰第16页
    1.2 溶菌酶抑制因子第16-26页
        1.2.1 溶菌酶第17-18页
        1.2.2 细菌溶菌酶抑制因子的特性和系统发育第18-21页
        1.2.3 溶菌酶抑制因子的结构及与溶菌酶的相互作用第21-23页
        1.2.4 溶菌酶抑制因子的生物学功能第23-26页
    1.3 补体系统第26-31页
        1.3.1 补体系统的组成第26-27页
        1.3.2 补体激活途径第27-29页
        1.3.3 鱼类补体系统第29-30页
        1.3.4 补体的生物学功能第30-31页
    1.4 海豚链球菌第31-36页
        1.4.1 海豚链球菌的分布第31-32页
        1.4.2 海豚链球菌宿主范围第32页
        1.4.3 鉴别和归类第32-33页
        1.4.4 海豚链球菌疾病第33-35页
        1.4.5 海豚链球菌病的预防与治疗第35-36页
    1.5 细菌素第36-40页
        1.5.1 细菌素的产生第36页
        1.5.2 细菌素的分布和特点第36-39页
        1.5.3 细菌素的分子特征第39页
        1.5.4 细菌素的作用模式第39-40页
        1.5.5 细菌素在食品中的应用第40页
    1.6 本论文研究目的与意义第40-42页
第二章 迟缓爱德华氏菌溶菌酶抑制因子MliC功能的研究第42-74页
    2.1 材料、方法及仪器设备第42-56页
        2.1.1 实验材料及仪器设备第42-43页
        2.1.2 序列分析第43页
        2.1.3 迟缓爱德华氏菌TX01 MliC家族基因的获得第43-47页
        2.1.4 MliC表达载体的构建第47-48页
        2.1.5 pETMliCEt在大肠杆菌中的表达第48-50页
        2.1.6 重组突变蛋白rMliCC33S和rMliCW79A的制备第50-51页
        2.1.7 迟缓爱德华氏菌敲除株TXΔmliC、TXΔmliCivy和互补株TXΔmliC+mliC的构建第51-52页
        2.1.8 双敲除株TXΔmliCivy的获得第52页
        2.1.9 互补菌株TXΔmliC+mliC的获得第52页
        2.1.10 重组蛋白r MliC抗体的制备第52-53页
        2.1.11 免疫印迹Western blot分析第53页
        2.1.12 溶菌酶抑制活性分析第53-54页
        2.1.13 rMliC对于迟缓爱德华氏菌在体内感染中的作用第54页
        2.1.14 组织侵染和致死率分析第54页
        2.1.15 抗血清能力分析第54-55页
        2.1.16 细菌在头肾单核细胞(HKM)中的胞内能力分析第55页
        2.1.17 酸性磷酸酶分析第55-56页
    2.2 结果第56-69页
        2.2.1 MliCEt序列分析第56-58页
        2.2.2 rMliC的溶菌酶抑制活性第58-59页
        2.2.3 rMliC对于迟缓爱德华氏菌存活的作用第59-62页
        2.2.4 rMliCEt的胞外产生第62页
        2.2.5 rMliC保守氨基酸功能的重要性第62-64页
        2.2.6 在不同方面比较迟缓爱德华氏菌野生株和突变株的感染能力第64-69页
    2.3 讨论第69-74页
第三章 迟缓爱德华氏菌通过阻止补体旁路途径的激活逃逸血清杀伤作用的研究第74-84页
    3.1 材料、方法及仪器设备第74-76页
        3.1.1 实验材料及仪器设备第74页
        3.1.2 血清中存活率分析第74-75页
        3.1.3 与细菌孵育后血清溶血和杀菌活性检测第75页
        3.1.4 趋化实验分析第75-76页
    3.2 结果与讨论第76-84页
        3.2.1 迟缓爱德华氏菌在鱼血清中的存活第76-78页
        3.2.2 与迟缓爱德华氏菌孵育后剩余血清补体活性第78-80页
        3.2.3 与迟缓爱德华氏菌孵育后剩余血清补体活性第80-82页
        3.2.4 失活的迟缓爱德华氏菌对于补体激活的作用第82-84页
第四章 海豚链球菌细菌素Sil抑菌功能和免疫调节功能的研究第84-103页
    4.1 材料、方法及仪器设备第84-88页
        4.1.1 实验材料及仪器设备第84-85页
        4.1.2 序列分析第85页
        4.1.3 海豚链球菌Sil基因的获得。第85页
        4.1.4 海豚链球菌rSil重组蛋白及抗体制备第85-86页
        4.1.5 免疫印迹对rSil进行定位分析第86页
        4.1.6 rSil抗细菌作用分析第86页
        4.1.7 海豚链球菌SF1上清的抑菌作用分析第86页
        4.1.8 rSil与细菌相互作用第86-87页
        4.1.9 rSil对于海豚链球菌感染大菱鲆头肾单核细胞的作用第87页
        4.1.10 rSil与大菱鲆头肾单核细胞相互作用第87页
        4.1.11 酸性磷酸酶分析第87-88页
        4.1.12 rSil抗体对于海豚链球菌感染大菱鲆头肾单核细胞的作用第88页
        4.1.13 rSil在海豚链球菌体内感染中的作用第88页
    4.2 结果第88-100页
        4.2.1 Sil序列分析第88-89页
        4.2.2 Sil的胞外产生第89-91页
        4.2.3 rSil的抗细菌作用第91-92页
        4.2.4 海豚链球菌上清的抑菌作用第92-93页
        4.2.5 rSil与靶细菌结合第93-95页
        4.2.6 rSil与头肾单核细胞结合和抑制细胞免疫方面的作用第95-98页
        4.2.7 rSil抗体对于海豚链球菌感染细胞的作用第98-99页
        4.2.8 rSil对于海豚链球菌在鱼组织内侵染情况的影响第99-100页
    4.3 讨论第100-103页
结论第103-104页
参考文献第104-120页
附录 常见溶液的配制第120-124页
作者简历第124-125页
博士期间发表的文章与研究成果第125-126页

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