致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 前言 | 第12-42页 |
1.1 迟缓爱德华氏菌 | 第12-16页 |
1.1.1 迟缓爱德华氏菌研究概况 | 第12页 |
1.1.2 迟缓爱德华氏菌的生物学危害 | 第12-13页 |
1.1.3 迟缓爱德华氏菌的感染及毒力因子的相互作用 | 第13-15页 |
1.1.4 毒力机制和发病机理 | 第15-16页 |
1.1.5 迟缓爱德华氏菌致病机制的调控和干扰 | 第16页 |
1.2 溶菌酶抑制因子 | 第16-26页 |
1.2.1 溶菌酶 | 第17-18页 |
1.2.2 细菌溶菌酶抑制因子的特性和系统发育 | 第18-21页 |
1.2.3 溶菌酶抑制因子的结构及与溶菌酶的相互作用 | 第21-23页 |
1.2.4 溶菌酶抑制因子的生物学功能 | 第23-26页 |
1.3 补体系统 | 第26-31页 |
1.3.1 补体系统的组成 | 第26-27页 |
1.3.2 补体激活途径 | 第27-29页 |
1.3.3 鱼类补体系统 | 第29-30页 |
1.3.4 补体的生物学功能 | 第30-31页 |
1.4 海豚链球菌 | 第31-36页 |
1.4.1 海豚链球菌的分布 | 第31-32页 |
1.4.2 海豚链球菌宿主范围 | 第32页 |
1.4.3 鉴别和归类 | 第32-33页 |
1.4.4 海豚链球菌疾病 | 第33-35页 |
1.4.5 海豚链球菌病的预防与治疗 | 第35-36页 |
1.5 细菌素 | 第36-40页 |
1.5.1 细菌素的产生 | 第36页 |
1.5.2 细菌素的分布和特点 | 第36-39页 |
1.5.3 细菌素的分子特征 | 第39页 |
1.5.4 细菌素的作用模式 | 第39-40页 |
1.5.5 细菌素在食品中的应用 | 第40页 |
1.6 本论文研究目的与意义 | 第40-42页 |
第二章 迟缓爱德华氏菌溶菌酶抑制因子MliC功能的研究 | 第42-74页 |
2.1 材料、方法及仪器设备 | 第42-56页 |
2.1.1 实验材料及仪器设备 | 第42-43页 |
2.1.2 序列分析 | 第43页 |
2.1.3 迟缓爱德华氏菌TX01 MliC家族基因的获得 | 第43-47页 |
2.1.4 MliC表达载体的构建 | 第47-48页 |
2.1.5 pETMliCEt在大肠杆菌中的表达 | 第48-50页 |
2.1.6 重组突变蛋白rMliCC33S和rMliCW79A的制备 | 第50-51页 |
2.1.7 迟缓爱德华氏菌敲除株TXΔmliC、TXΔmliCivy和互补株TXΔmliC+mliC的构建 | 第51-52页 |
2.1.8 双敲除株TXΔmliCivy的获得 | 第52页 |
2.1.9 互补菌株TXΔmliC+mliC的获得 | 第52页 |
2.1.10 重组蛋白r MliC抗体的制备 | 第52-53页 |
2.1.11 免疫印迹Western blot分析 | 第53页 |
2.1.12 溶菌酶抑制活性分析 | 第53-54页 |
2.1.13 rMliC对于迟缓爱德华氏菌在体内感染中的作用 | 第54页 |
2.1.14 组织侵染和致死率分析 | 第54页 |
2.1.15 抗血清能力分析 | 第54-55页 |
2.1.16 细菌在头肾单核细胞(HKM)中的胞内能力分析 | 第55页 |
2.1.17 酸性磷酸酶分析 | 第55-56页 |
2.2 结果 | 第56-69页 |
2.2.1 MliCEt序列分析 | 第56-58页 |
2.2.2 rMliC的溶菌酶抑制活性 | 第58-59页 |
2.2.3 rMliC对于迟缓爱德华氏菌存活的作用 | 第59-62页 |
2.2.4 rMliCEt的胞外产生 | 第62页 |
2.2.5 rMliC保守氨基酸功能的重要性 | 第62-64页 |
2.2.6 在不同方面比较迟缓爱德华氏菌野生株和突变株的感染能力 | 第64-69页 |
2.3 讨论 | 第69-74页 |
第三章 迟缓爱德华氏菌通过阻止补体旁路途径的激活逃逸血清杀伤作用的研究 | 第74-84页 |
3.1 材料、方法及仪器设备 | 第74-76页 |
3.1.1 实验材料及仪器设备 | 第74页 |
3.1.2 血清中存活率分析 | 第74-75页 |
3.1.3 与细菌孵育后血清溶血和杀菌活性检测 | 第75页 |
3.1.4 趋化实验分析 | 第75-76页 |
3.2 结果与讨论 | 第76-84页 |
3.2.1 迟缓爱德华氏菌在鱼血清中的存活 | 第76-78页 |
3.2.2 与迟缓爱德华氏菌孵育后剩余血清补体活性 | 第78-80页 |
3.2.3 与迟缓爱德华氏菌孵育后剩余血清补体活性 | 第80-82页 |
3.2.4 失活的迟缓爱德华氏菌对于补体激活的作用 | 第82-84页 |
第四章 海豚链球菌细菌素Sil抑菌功能和免疫调节功能的研究 | 第84-103页 |
4.1 材料、方法及仪器设备 | 第84-88页 |
4.1.1 实验材料及仪器设备 | 第84-85页 |
4.1.2 序列分析 | 第85页 |
4.1.3 海豚链球菌Sil基因的获得。 | 第85页 |
4.1.4 海豚链球菌rSil重组蛋白及抗体制备 | 第85-86页 |
4.1.5 免疫印迹对rSil进行定位分析 | 第86页 |
4.1.6 rSil抗细菌作用分析 | 第86页 |
4.1.7 海豚链球菌SF1上清的抑菌作用分析 | 第86页 |
4.1.8 rSil与细菌相互作用 | 第86-87页 |
4.1.9 rSil对于海豚链球菌感染大菱鲆头肾单核细胞的作用 | 第87页 |
4.1.10 rSil与大菱鲆头肾单核细胞相互作用 | 第87页 |
4.1.11 酸性磷酸酶分析 | 第87-88页 |
4.1.12 rSil抗体对于海豚链球菌感染大菱鲆头肾单核细胞的作用 | 第88页 |
4.1.13 rSil在海豚链球菌体内感染中的作用 | 第88页 |
4.2 结果 | 第88-100页 |
4.2.1 Sil序列分析 | 第88-89页 |
4.2.2 Sil的胞外产生 | 第89-91页 |
4.2.3 rSil的抗细菌作用 | 第91-92页 |
4.2.4 海豚链球菌上清的抑菌作用 | 第92-93页 |
4.2.5 rSil与靶细菌结合 | 第93-95页 |
4.2.6 rSil与头肾单核细胞结合和抑制细胞免疫方面的作用 | 第95-98页 |
4.2.7 rSil抗体对于海豚链球菌感染细胞的作用 | 第98-99页 |
4.2.8 rSil对于海豚链球菌在鱼组织内侵染情况的影响 | 第99-100页 |
4.3 讨论 | 第100-103页 |
结论 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-120页 |
附录 常见溶液的配制 | 第120-124页 |
作者简历 | 第124-125页 |
博士期间发表的文章与研究成果 | 第125-126页 |