| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 英文缩略词表 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 1、实验材料 | 第11-14页 |
| 1.1 实验细胞 | 第11页 |
| 1.2 实验试剂 | 第11页 |
| 1.3 实验仪器 | 第11-12页 |
| 1.4 主要实验试剂的配制 | 第12-14页 |
| 1.4.1 小白菊内酯原液的配制 | 第12页 |
| 1.4.2 PBS缓冲液的配制 | 第12页 |
| 1.4.3 青、链霉素的配制 | 第12-13页 |
| 1.4.4 DMEM低糖培养基的配制 | 第13页 |
| 1.4.5 DMEM完全培养基的配制 | 第13页 |
| 1.4.6 胰蛋白酶的配制 | 第13页 |
| 1.4.7 MTT的配制 | 第13页 |
| 1.4.8 SDS的配制 | 第13页 |
| 1.4.9 MRNA引物的配制 | 第13-14页 |
| 2、实验方法 | 第14-19页 |
| 2.1 细胞准备 | 第14页 |
| 2.1.1 细胞培养 | 第14页 |
| 2.1.2 细胞计数 | 第14页 |
| 2.2 MTT法筛选PTL及DDP对A549细胞的增殖抑制作用的药物浓度 | 第14-15页 |
| 2.2.1 MTT法原理 | 第14页 |
| 2.2.2 实验分组 | 第14-15页 |
| 2.2.3 实验步骤 | 第15页 |
| 2.3 MTT法检测低、中、高浓度PTL联合DDP对A549细胞的增殖抑制作用 | 第15页 |
| 2.3.1 实验分组 | 第15页 |
| 2.3.2 实验步骤 | 第15页 |
| 2.4 流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布 | 第15-17页 |
| 2.4.1 细胞凋亡实验原理 | 第15-16页 |
| 2.4.2 细胞周期检测原理 | 第16页 |
| 2.4.3 实验分组 | 第16页 |
| 2.4.4 实验步骤 | 第16-17页 |
| 2.5 RT-PCR法测定BCL-2 和BAX的MRNA表达情况 | 第17-19页 |
| 2.5.1 试验原理 | 第17页 |
| 2.5.2 实验分组 | 第17页 |
| 2.5.3 细胞培养 | 第17页 |
| 2.5.4 总RNA提取 | 第17-18页 |
| 2.5.5 RNA纯度测定 | 第18页 |
| 2.5.6 RNA浓度测定 | 第18页 |
| 2.5.7 RNA的反转录 | 第18-19页 |
| 2.5.8 REAL TIME PCR | 第19页 |
| 3、统计学分析 | 第19-20页 |
| 4、实验结果 | 第20-26页 |
| 4.1 人肺腺癌A549细胞生长曲线及正常形态 | 第20-21页 |
| 4.2 人肺腺癌A549细胞凋亡情况 | 第21页 |
| 4.3 DDP及PTL作用于人肺腺癌A549细胞的有效浓度 | 第21-23页 |
| 4.4 PTL联合DDP对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用 | 第23-24页 |
| 4.5 流式细胞术检测PTL联合DDP对A549细胞的影响 | 第24-25页 |
| 4.6 实时荧光定量PCR结果 | 第25-26页 |
| 5、讨论 | 第26-33页 |
| 5.1 小白菊内酯联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的抗增殖作用 | 第26-30页 |
| 5.1.1 细胞增殖 | 第26-27页 |
| 5.1.2 小白菊内酯有效浓度的筛选 | 第27-28页 |
| 5.1.3 顺铂有效干预浓度的选取 | 第28页 |
| 5.1.4 PTL联合DDP对A549细胞的增殖抑制作用 | 第28-29页 |
| 5.1.5 PTL联合DDP对A549细胞细胞周期的影响 | 第29-30页 |
| 5.2 小白菊内酯联合顺铂对人肺腺癌A549细胞的凋亡诱导作用 | 第30-32页 |
| 5.2.1 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第30-31页 |
| 5.2.2 凋亡抑制基因BCL-2 及凋亡基因BAX | 第31-32页 |
| 5.3 小白菊内酯与氧化应激 | 第32-33页 |
| 6、结语 | 第33-34页 |
| 6.1 结论 | 第33页 |
| 6.2 研究结果的意义 | 第33-34页 |
| 6.3 问题与展望 | 第34页 |
| 7、参考文献 | 第34-37页 |
| 8、附录 | 第37-44页 |
| 8.1 公式 | 第37页 |
| 8.1.1 协同计算公式 | 第37页 |
| 8.1.2 细胞活力计算公式 | 第37页 |
| 8.1.3 细胞抑制率计算公式 | 第37页 |
| 8.2 各MRNA引物参数 | 第37页 |
| 8.3 流式细胞术门框图 | 第37-38页 |
| 8.3.1 细胞周期门框图 | 第37-38页 |
| 8.3.2 细胞凋亡门框图 | 第38页 |
| 8.4 PCR溶解曲线图 | 第38-39页 |
| 8.5 IC_(50)统计结果 | 第39-41页 |
| 8.6 性关性分析结果 | 第41-42页 |
| 8.7 实验剪影 | 第42-44页 |
| 文献综述 | 第44-57页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57-59页 |
| 在学期间主要研究成果 | 第59页 |
