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多巴胺D2样受体激动对多巴胺能细胞自噬的调控及其机制研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
研究背景第13-15页
材料和方法第15-40页
    1 实验材料第15-21页
        1.1 主要试剂第15-17页
        1.2 动物及细胞株第17页
        1.3 实验仪器第17-18页
        1.4 溶液配制第18-21页
    2.实验方法第21-40页
        2.1 细胞的复苏第21页
        2.2 细胞的培养及传代第21-22页
        2.3 Western-blot检测蛋白的表达第22-24页
        2.4 逆转录PCR检测mRNA的转录情况第24-26页
        2.5 实时荧光定量PCR (real time PCR)第26-27页
        2.6 细胞活力检测(CCK-8 法)第27页
        2.7 激光共聚焦显微镜观察EGFP-LC3、GFP-RFP-LC3 点状聚集及多巴胺D2、D3受体的分布情况第27-28页
        2.8 大鼠中脑原代神经元培养第28页
        2.9 免疫荧光观察大鼠原代多巴胺能细胞LC3 点状聚集情况第28-29页
        2.10 透射电镜观察自噬体第29-30页
        2.11 细胞内相对钙含量检测第30页
        2.12 质粒的扩增第30-31页
        2.13 质粒DNA小量提取第31页
        2.14 siRNA和质粒的瞬时转染第31-32页
        2.15 免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)第32-34页
        2.16 染色质免疫沉淀(chromatin immunopreciptation,CHIP)第34-37页
        2.17 重组荧光素酶报告基因的构建第37页
        2.18. 双荧光素酶活性测定第37-38页
        2.19 病毒转染第38页
        2.20 A53T小鼠基因鉴定第38-39页
        2.21 统计方法第39-40页
结果第40-60页
    1、多巴胺D2样受体激动剂诱导多巴胺能细胞自噬水平增加第40-43页
    2、Beclin 1 蛋白的表达增加在多巴胺D2样激动剂诱导的自噬中起关键作用第43-46页
    3. 多巴胺D2/D3受体介导了普拉克索诱导的自噬增加第46-48页
    4、c-Fos可直接结合BECN1 转录调控区而促进其转录第48-50页
    5、c-Fos蛋白表达上调在普拉克索诱导的自噬激活中发挥重要作用第50-51页
    6、普拉克索诱导的c-Fos表达增加和自噬激活继发于Ca2+/ CaMKIV信号通路第51-54页
    7、普拉克索通过诱导自噬促进PC12 细胞内 α-synuclein及亨廷顿蛋白的降解第54-57页
    8、普拉克索对野生及A53T-SNCA转基因小鼠脑内自噬活性及 α-synuclein蛋白蓄积的影响第57-60页
讨论第60-64页
结论第64-65页
参考文献第65-70页
综述第70-79页
    参考文献第73-79页
攻读学位期间公开发表的论文及科研成果第79-80页
中英文对照缩略词表第80-84页
致谢第84-85页

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