摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
研究背景 | 第13-15页 |
材料和方法 | 第15-40页 |
1 实验材料 | 第15-21页 |
1.1 主要试剂 | 第15-17页 |
1.2 动物及细胞株 | 第17页 |
1.3 实验仪器 | 第17-18页 |
1.4 溶液配制 | 第18-21页 |
2.实验方法 | 第21-40页 |
2.1 细胞的复苏 | 第21页 |
2.2 细胞的培养及传代 | 第21-22页 |
2.3 Western-blot检测蛋白的表达 | 第22-24页 |
2.4 逆转录PCR检测mRNA的转录情况 | 第24-26页 |
2.5 实时荧光定量PCR (real time PCR) | 第26-27页 |
2.6 细胞活力检测(CCK-8 法) | 第27页 |
2.7 激光共聚焦显微镜观察EGFP-LC3、GFP-RFP-LC3 点状聚集及多巴胺D2、D3受体的分布情况 | 第27-28页 |
2.8 大鼠中脑原代神经元培养 | 第28页 |
2.9 免疫荧光观察大鼠原代多巴胺能细胞LC3 点状聚集情况 | 第28-29页 |
2.10 透射电镜观察自噬体 | 第29-30页 |
2.11 细胞内相对钙含量检测 | 第30页 |
2.12 质粒的扩增 | 第30-31页 |
2.13 质粒DNA小量提取 | 第31页 |
2.14 siRNA和质粒的瞬时转染 | 第31-32页 |
2.15 免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP) | 第32-34页 |
2.16 染色质免疫沉淀(chromatin immunopreciptation,CHIP) | 第34-37页 |
2.17 重组荧光素酶报告基因的构建 | 第37页 |
2.18. 双荧光素酶活性测定 | 第37-38页 |
2.19 病毒转染 | 第38页 |
2.20 A53T小鼠基因鉴定 | 第38-39页 |
2.21 统计方法 | 第39-40页 |
结果 | 第40-60页 |
1、多巴胺D2样受体激动剂诱导多巴胺能细胞自噬水平增加 | 第40-43页 |
2、Beclin 1 蛋白的表达增加在多巴胺D2样激动剂诱导的自噬中起关键作用 | 第43-46页 |
3. 多巴胺D2/D3受体介导了普拉克索诱导的自噬增加 | 第46-48页 |
4、c-Fos可直接结合BECN1 转录调控区而促进其转录 | 第48-50页 |
5、c-Fos蛋白表达上调在普拉克索诱导的自噬激活中发挥重要作用 | 第50-51页 |
6、普拉克索诱导的c-Fos表达增加和自噬激活继发于Ca2+/ CaMKIV信号通路 | 第51-54页 |
7、普拉克索通过诱导自噬促进PC12 细胞内 α-synuclein及亨廷顿蛋白的降解 | 第54-57页 |
8、普拉克索对野生及A53T-SNCA转基因小鼠脑内自噬活性及 α-synuclein蛋白蓄积的影响 | 第57-60页 |
讨论 | 第60-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-70页 |
综述 | 第70-79页 |
参考文献 | 第73-79页 |
攻读学位期间公开发表的论文及科研成果 | 第79-80页 |
中英文对照缩略词表 | 第80-84页 |
致谢 | 第84-85页 |