接种菌剂对牛粪堆肥硝化和反硝化细菌群落影响的研究
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 农业固体废物的概述 | 第11页 |
| 1.2 堆肥技术的研究 | 第11-14页 |
| 1.2.1 堆肥定义 | 第11页 |
| 1.2.2 厌氧堆肥 | 第11-12页 |
| 1.2.3 好氧堆肥 | 第12页 |
| 1.2.4 堆肥腐熟度的判定 | 第12-14页 |
| 1.3 堆肥中添加菌剂的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 硝化作用 | 第15-16页 |
| 1.4.1 硝化作用机理 | 第15页 |
| 1.4.2 氨单加氧酶基因(amoA) | 第15-16页 |
| 1.5 反硝化作用 | 第16-17页 |
| 1.5.1 反硝化作用机理 | 第16页 |
| 1.5.2 反硝化作用的酶与编码基因 | 第16-17页 |
| 1.6 堆肥微生物多样性的研究方法 | 第17-19页 |
| 1.6.1 传统研究方法 | 第18页 |
| 1.6.2 分子生态学研究方法 | 第18-19页 |
| 1.7 本文的研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 1.8 本实验的技术路线图 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.1 堆肥材料 | 第21页 |
| 2.1.2 外源菌剂 | 第21页 |
| 2.2 实验设计 | 第21-23页 |
| 2.2.1 堆肥设置 | 第21页 |
| 2.2.2 样品采集 | 第21-22页 |
| 2.2.3 测定内容及方法 | 第22-23页 |
| 2.3 堆肥微生物群落结构及多样性的研究方法 | 第23-28页 |
| 2.3.1 样品总DNA的提取 | 第23页 |
| 2.3.2 粗提DNA的纯化 | 第23页 |
| 2.3.3 功能基因的PCR扩增 | 第23-25页 |
| 2.3.4 变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第25-26页 |
| 2.3.5 DGGE图谱分析 | 第26-27页 |
| 2.3.6 DGGE条带测序 | 第27页 |
| 2.3.7 系统发育分析 | 第27页 |
| 2.3.8 统计分析 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-53页 |
| 3.1 堆肥物理指标的变化 | 第28-29页 |
| 3.1.1 堆肥温度变化 | 第28页 |
| 3.1.2 堆肥水分含量变化 | 第28-29页 |
| 3.2 堆肥化学指标的变化 | 第29-32页 |
| 3.2.1 pH值变化 | 第29-30页 |
| 3.2.2 C/N变化 | 第30-31页 |
| 3.2.3 NH_4~+-N含量变化 | 第31页 |
| 3.2.4 NO_3~ˉ-N含量变化 | 第31-32页 |
| 3.3 堆肥生物指标的变化 | 第32-33页 |
| 3.3.1 种子发芽率变化 | 第32-33页 |
| 3.4 硝化细菌和反硝化细菌数量变化 | 第33-35页 |
| 3.4.1 硝化细菌数量变化 | 第33-34页 |
| 3.4.2 反硝化细菌数量变化 | 第34-35页 |
| 3.5 硝化和反硝化细菌与理化因素相关性分析 | 第35页 |
| 3.6 堆肥微生物群落结构及多样性的分析 | 第35-53页 |
| 3.6.1 基因组DNA的提取、纯化 | 第35-36页 |
| 3.6.2 功能基因的PCR扩增 | 第36-38页 |
| 3.6.3 DGGE图谱及系统发育分析 | 第38-53页 |
| 4 讨论 | 第53-57页 |
| 4.1 菌剂对硝化细菌数量的影响 | 第53页 |
| 4.2 菌剂对反硝化细菌数量的影响 | 第53页 |
| 4.3 菌剂对amoA基因多样性的影响 | 第53-54页 |
| 4.4 菌剂对narG基因多样性的影响 | 第54页 |
| 4.5 菌剂对napA基因多样性的影响 | 第54页 |
| 4.6 菌剂对nirK和nirS基因多样性的影响 | 第54页 |
| 4.7 菌剂对nosZ基因多样性的影响 | 第54-55页 |
| 4.8 菌剂对氨氧化细菌群落结构的影响 | 第55页 |
| 4.9 菌剂对反硝化细菌群落结构的影响 | 第55-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67页 |
