| 符号说明 | 第5-10页 |
| 中文摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 1 前言 | 第17-37页 |
| 1.1 核质转运 | 第17-24页 |
| 1.1.1 核孔复合体的结构 | 第17-18页 |
| 1.1.2 核孔蛋白 | 第18-19页 |
| 1.1.3 核质转运受体 | 第19-20页 |
| 1.1.4 RanGTP蛋白 | 第20-21页 |
| 1.1.5 核定位信号 | 第21-22页 |
| 1.1.6 经典的核输入路径 | 第22-23页 |
| 1.1.7 拟南芥核核质转运受体的研究进展 | 第23-24页 |
| 1.2 Moonlighting蛋白 | 第24-27页 |
| 1.2.1 Moonlighting蛋白产生的机制 | 第24-26页 |
| 1.2.2 核质转运相关蛋白的Moonlighting研究 | 第26-27页 |
| 1.3 茉莉酸 | 第27-36页 |
| 1.3.1 茉莉酸的化学结构 | 第27页 |
| 1.3.2 茉莉酸的生物合成 | 第27-30页 |
| 1.3.2.1 氧脂素的合成 | 第28页 |
| 1.3.2.2 茉莉酸合成路径 | 第28-29页 |
| 1.3.2.3 茉莉酸合成路径 | 第29-30页 |
| 1.3.3 茉莉酸的代谢产物 | 第30-31页 |
| 1.3.4 茉莉酸信号 | 第31-36页 |
| 1.3.4.1 茉莉酸信号的传递 | 第31-32页 |
| 1.3.4.2 JAZ互作转录因子 | 第32-34页 |
| 1.3.4.3 茉莉酸信号的负调因子 | 第34-36页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第36-37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-60页 |
| 2.1 材料 | 第37-41页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第37页 |
| 2.1.2 载体与菌株 | 第37页 |
| 2.1.3 其它材料 | 第37-38页 |
| 2.1.4 实验引物 | 第38-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-60页 |
| 2.2.1 CTAB法提取拟南芥基因组DNA | 第41页 |
| 2.2.2 植物基因组的纯化 | 第41页 |
| 2.2.3 RNA的提取 | 第41-42页 |
| 2.2.3.1 利用TRIZOL法提取RNA | 第41-42页 |
| 2.2.3.2 RNA中基因组DN A的去除 | 第42页 |
| 2.2.3.3 RNA反转录 | 第42页 |
| 2.2.4 DNA片段的扩增与载体的构建 | 第42-44页 |
| 2.2.4.1 DNA片段的扩增 | 第42-43页 |
| 2.2.4.2 平末端片段加A | 第43页 |
| 2.2.4.3 连接反应 | 第43页 |
| 2.2.4.4 酶切反应 | 第43-44页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR | 第44页 |
| 2.2.6 大肠杆菌DH5α 感受态的制备及转化 | 第44-45页 |
| 2.2.6.1 大肠杆菌DH5α 感受态的制备 | 第44-45页 |
| 2.2.6.2 大肠杆菌细胞的转化 | 第45页 |
| 2.2.7 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第45-46页 |
| 2.2.7.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第45-46页 |
| 2.2.7.2 农杆菌的转化 | 第46页 |
| 2.2.8 小量碱法提取大肠杆菌中的质粒 | 第46页 |
| 2.2.9 拟南芥转化及转基因鉴定 | 第46-47页 |
| 2.2.9.1 拟南芥的转化 | 第46-47页 |
| 2.2.9.2 转基因拟南芥的鉴定 | 第47页 |
| 2.2.10 农杆菌介导的烟草瞬时转化 | 第47-48页 |
| 2.2.11 双荧光素酶报告系统 | 第48页 |
| 2.2.12 双分子荧光 | 第48-49页 |
| 2.2.13 花青素含量的测定 | 第49页 |
| 2.2.14 细胞质/细胞核的分离 | 第49-51页 |
| 2.2.15 原生质体转化 | 第51页 |
| 2.2.15.1 酶解液的配制 | 第51页 |
| 2.2.15.2 原生质体的制备 | 第51页 |
| 2.2.16 醋酸锂法制备并转化酵母感受态细胞 | 第51-52页 |
| 2.2.16.1 PEG/LiAc法制备酵母感受态细胞 | 第51-52页 |
| 2.2.16.2 小量法酵母转化 | 第52页 |
| 2.2.17 蛋白类实验 | 第52-55页 |
| 2.2.17.1 植物蛋白的提取 | 第52-53页 |
| 2.2.17.2 蛋白质浓度检测 | 第53-54页 |
| 2.2.17.3 试剂配制 | 第54-55页 |
| 2.2.18 蛋白纯化 | 第55-60页 |
| 2.2.18.1 原核表达 | 第55页 |
| 2.2.18.2 His标签蛋白纯化 | 第55-56页 |
| 2.2.18.3 Pull- Down及Co-IP | 第56页 |
| 2.2.18.4 蛋白质凝胶电泳 | 第56-57页 |
| 2.2.18.5 半干法蛋白转移 | 第57-58页 |
| 2.2.18.6 免疫反应及化学发光法检测蛋白含量 | 第58页 |
| 2.2.18.7 凝胶阻滞迁移（EMSA） | 第58-60页 |
| 3 结果与分析 | 第60-82页 |
| 3.1 转运受体IMPα1、IMPα2 和IMPα3 协同负调JA诱导的花青素合成 | 第60-65页 |
| 3.1.1 IMPα 突变体的鉴定以及多突变体的构建 | 第60-61页 |
| 3.1.2 茉莉酸对于impα 单突变和双突变体中根长的影响 | 第61-62页 |
| 3.1.3 JA显著诱导TM中花青素的合成 | 第62-63页 |
| 3.1.4 超表达IMPα1、IMPα2 和IMPα3 不影响JA诱导的花青素合成 | 第63-64页 |
| 3.1.5 蔗糖和细胞分裂素对三突变体中花青素合成的影响 | 第64-65页 |
| 3.2 三突变体对于系统性机械损伤的响应 | 第65-68页 |
| 3.3 IMPα1、IMPα2 和IMPα3 互作蛋白的鉴定 | 第68-72页 |
| 3.3.1 IMPα1、IMPα2 和IMPα3 与MYC2在细胞核中互作 | 第68-69页 |
| 3.3.2 鉴定MYC2的互作结构域 | 第69-70页 |
| 3.3.3 鉴定IMPα2 互作的结构域 | 第70-71页 |
| 3.3.4 IMPα1、IMPα2 和IMPα3 阻断了MYC2与JAZ蛋白的互作 | 第71-72页 |
| 3.4 IMPα1、IMPα2 和IMPα3 与MYB转录因子互作 | 第72-74页 |
| 3.5 IMPα 抑制转录因子的转录活性 | 第74-75页 |
| 3.5.1 IMPα1、IMPα2 和IMPα3 抑制MYC2的激活活性 | 第74-75页 |
| 3.5.2 IMPα1、IMPα2 和IMPα3 抑制MYB75的激活活性 | 第75页 |
| 3.6 IMPα 抑制转录因子的DNA结合活性 | 第75-78页 |
| 3.6.1 IMPα1、IMPα2 和IMPα3 抑制MYC2的二聚化 | 第75-76页 |
| 3.6.2 IMPα1、IMPα2 和IMPα3 抑制MYC2与G-box结合 | 第76-77页 |
| 3.6.3 IMPα1、IMPα2 和IMPα3 抑制MYB75的DNA结合活性 | 第77-78页 |
| 3.7 IMPα 干扰转录复合体的形成 | 第78-80页 |
| 3.7.1 IMPα 抑制MYC2与MED25的结合 | 第78-79页 |
| 3.7.2 IMPα 干扰WD-Repeat/bHLH/MYB复合体的形成 | 第79-80页 |
| 3.8 TTG1的突变抑制了impα1impα2impα3 对JA敏感的表型 | 第80-82页 |
| 3.8.1 四突变体ttg1-lmimpα1impα2impα3 的构建 | 第80-81页 |
| 3.8.2 四突变体表型鉴定 | 第81-82页 |
| 4 讨论 | 第82-86页 |
| 5 结论 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 攻读学位期间发表的论文及成果 | 第104页 |
