| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 前言 | 第16-30页 |
| ·氧化应激对HSP70的诱导作用 | 第16-20页 |
| ·HSP70的基因表达调控 | 第17-18页 |
| ·GRP78的基因表达调控 | 第18-20页 |
| ·GRP75的基因表达调控 | 第20页 |
| ·HSP70家族在神经细胞损伤中的作用 | 第20-26页 |
| ·HSP70的神经保护作用 | 第20-23页 |
| ·GRP78在神经细胞损伤中的作用 | 第23-25页 |
| ·GRP75在神经细胞损伤中的作用 | 第25-26页 |
| ·课题的提出及研究方案 | 第26-30页 |
| ·研究背景 | 第26-28页 |
| ·研究内容 | 第28-29页 |
| ·技术路线 | 第29-30页 |
| 1.HSP70在H_2O_2致SH-SY5Y细胞氧化损伤中的作用 | 第30-59页 |
| ·H_2O_2致SH-SY5Y细胞氧化应激模型的建立 | 第31-46页 |
| ·实验材料 | 第31-33页 |
| ·实验方法 | 第33-35页 |
| ·细胞培养 | 第33页 |
| ·细胞处理 | 第33-34页 |
| ·MTT测试细胞活力 | 第34页 |
| ·电子自旋共振(ESR)检测ROS的动态变化 | 第34页 |
| ·免疫印迹检测蛋白表达 | 第34-35页 |
| ·Hoechst 33258荧光染色 | 第35页 |
| ·统计学处理 | 第35页 |
| ·实验结果 | 第35-42页 |
| ·H_2O_2诱导SH-SY5Y神经细胞氧化应激中度损伤模型的建立 | 第35-37页 |
| ·ESR检测细胞内ROS的动态变化 | 第37-38页 |
| ·H_2O_2致SH-SY5Y细胞氧化应激损伤后胞内应激蛋白HSP70的变化 | 第38-39页 |
| ·GGA和quercetin预处理对SH-SY5Y细胞Hsp70表达的影响 | 第39-40页 |
| ·GGA和quercetin预处理对氧化损伤SH-SY5Y细胞活性的影响 | 第40页 |
| ·GGA和quercetin预处理对H_2O_2致SH-SY5Y细胞凋亡的影响 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| ·结论 | 第45-46页 |
| ·HSP70在H_2O_2致SH-SY5Y细胞凋亡中的调控作用 | 第46-59页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-49页 |
| ·细胞培养与处理 | 第46页 |
| ·Annexin Ⅴ-PI染色法检测细胞凋亡 | 第46-47页 |
| ·免疫印迹检测蛋白表达 | 第47页 |
| ·RT-PCR检测GADD45βmRNA和GADD153mRNA表达 | 第47-49页 |
| ·统计学处理 | 第49页 |
| ·实验结果 | 第49-55页 |
| ·H_2O_2对SH-SY5Y细胞MAPK活性的影响 | 第49-51页 |
| ·MAPK通路在H_2O_2致氧化应激细胞凋亡中的作用 | 第51-52页 |
| ·HSP70对氧化损伤SH-SY5Y细胞MAPK通路的影响 | 第52-53页 |
| ·H_2O_2对SH-SY5Y细胞GADD45βmRNA和GADD153mRNA的影响 | 第53-54页 |
| ·HSP70对损伤SH-SY5Y细胞GADD45βmRNA和GADD153mRNA的影响 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| ·结论 | 第58-59页 |
| 2.内质网应激在H_2O_2致SH-SY5Y细胞凋亡中的作用 | 第59-73页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-62页 |
| ·细胞培养与处理 | 第60页 |
| ·透射电镜观察内质网超微结构 | 第60-61页 |
| ·免疫印迹检测蛋白表达 | 第61页 |
| ·细胞活性测定 | 第61页 |
| ·Hoechst33258核染色样本制备 | 第61-62页 |
| ·荧光显微镜细胞内ROS检测 | 第62页 |
| ·统计学处理 | 第62页 |
| ·结果 | 第62-69页 |
| ·H_2O_2对SH-SY5Y细胞内质网超微结构的变化 | 第62-63页 |
| ·H_2O_2对SH-SY5Y细胞内质网应激蛋白GRP78和CHOP表达的影响 | 第63-64页 |
| ·NAC和4-PBA对氧化损伤SH-SY5Y细胞活性和细胞凋亡的影响 | 第64-65页 |
| ·NAC和4-PBA预处理对氧化损伤SH-SY5Y细胞ROS水平的影响 | 第65-66页 |
| ·NAC和4-PBA预处理对氧化损伤SH-SY5Y细胞GRP78、CHOP表达的影响 | 第66-67页 |
| ·NAC和4-PBA预处理对氧化损伤SH-SY5Y细胞内JNK活性的影响 | 第67-68页 |
| ·NAC和4-PBA预处理对氧化损伤SH-SY5Y细胞内Bcl-2的作用 | 第68-69页 |
| ·讨论 | 第69-72页 |
| ·结论 | 第72-73页 |
| 3.海洋活性物质扇贝多肽的神经保护作用研究 | 第73-94页 |
| ·PCF对SH-SY5Y细胞的抗氧化保护作用 | 第74-88页 |
| ·主要材料 | 第74页 |
| ·实验方法 | 第74-77页 |
| ·细胞培养与分组 | 第74页 |
| ·细胞活力检测 | 第74-75页 |
| ·ESR检测ROS的动态变化 | 第75页 |
| ·细胞内ROS检测 | 第75页 |
| ·免疫荧光染色法检测8-oxo-dG水平 | 第75-76页 |
| ·酶生化法测定细胞内MDA含量 | 第76页 |
| ·酶生化法测定细胞内抗氧化指标 | 第76-77页 |
| ·统计学处理 | 第77页 |
| ·结果 | 第77-83页 |
| ·PCF对H_2O_2损伤SH-SY5Y细胞活性的影响 | 第77-79页 |
| ·PCF对H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞内ROS水平的影响 | 第79-81页 |
| ·PCF对H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞内DNA氧化产物的影响 | 第81-82页 |
| ·PCF对H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞内脂质过氧化和抗氧化指标的影响 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-87页 |
| ·结论 | 第87-88页 |
| ·扇贝多肽对H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的抑制作用 | 第88-94页 |
| ·主要材料 | 第88页 |
| ·实验方法 | 第88-89页 |
| ·细胞培养与分组 | 第88页 |
| ·细胞凋亡的检测 | 第88页 |
| ·免疫印迹检测蛋白表达 | 第88页 |
| ·统计学处理 | 第88-89页 |
| ·结果 | 第89-91页 |
| ·PCF对H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响 | 第89-90页 |
| ·PCF对H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞HSP70蛋白表达的影响 | 第90-91页 |
| ·PCF对H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞GRP78和CHOP表达的影响 | 第91页 |
| ·PCF对H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞内Bcl-2表达的影响 | 第91页 |
| ·讨论 | 第91-93页 |
| ·结论 | 第93-94页 |
| 总结 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-113页 |
| 中英文缩略词表 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 个人简历 | 第115页 |
| 发表的学术论文 | 第115页 |
