摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-23页 |
1.1 花青苷的生物合成 | 第13-16页 |
1.2 MYB-bHLH-WD40(MBW)转录因子对花青苷合成调控的研究 | 第16-18页 |
1.2.1 MYB转录因子 | 第17页 |
1.2.2 bHLH转录因子 | 第17-18页 |
1.2.3 WD40转录因子 | 第18页 |
1.3 其他转录因子对花青苷合成调控的研究 | 第18-19页 |
1.4 HD-Zip转录因子的研究进展 | 第19-22页 |
1.4.1 HD-Zip转录因子家族分类 | 第19-20页 |
1.4.2 HD-Zip Ⅰ转录因子的研究进展 | 第20-21页 |
1.4.3 HD-Zip转录因子与花青苷的研究 | 第21-22页 |
1.5 研究的目的与意义 | 第22-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-41页 |
2.1 材料 | 第23-24页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 质粒载体和菌株 | 第23页 |
2.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
2.2 MdHB1及其启动子的克隆与分析 | 第24-25页 |
2.3 定量RT-PCR | 第25页 |
2.4 亚细胞定位 | 第25-26页 |
2.5 GUS染色确定农杆菌瞬时转化的侵染范围 | 第26-29页 |
2.5.1 GUS染色液的配置 | 第26页 |
2.5.2 苹果果片GUS染色方法 | 第26-27页 |
2.5.3 GUS蛋白定量 | 第27-29页 |
2.6 基因瞬时沉默 | 第29-32页 |
2.6.1 TRV载体构建 | 第29页 |
2.6.2 MdHB1沉默片段筛选 | 第29-32页 |
2.6.3 瞬时沉默MdHB1 | 第32页 |
2.6.4 瞬时沉默MdHB1和MdMYB10 | 第32页 |
2.7 在苹果中瞬时过表达MdHB1 | 第32-33页 |
2.8 在烟草中稳定过表达MdHB1 | 第33-35页 |
2.9 花青苷含量测定 | 第35页 |
2.9.1 高效液相色谱法 | 第35页 |
2.9.2 分光光度计法 | 第35页 |
2.10 荧光素酶检测 | 第35-37页 |
2.10.1 双荧光素酶载体构建 | 第35-36页 |
2.10.2 双荧光素酶实验流程 | 第36页 |
2.10.3 萤火虫荧光素酶活力图像采集 | 第36-37页 |
2.11 GUS实验鉴定启动子转录活性 | 第37页 |
2.11.1 GUS载体构建 | 第37页 |
2.11.2 烟草叶片GUS染色方法及GUS蛋白定量 | 第37页 |
2.12 酵母单杂交实验 | 第37-38页 |
2.12.1 酵母单杂交载体构建 | 第37-38页 |
2.12.2 酵母单杂交实验流程 | 第38页 |
2.13 酵母双杂交实验 | 第38-39页 |
2.13.1 酵母双杂交载体构建 | 第38页 |
2.13.2 酵母双杂交实验流程 | 第38-39页 |
2.14 双分子荧光互补实验 | 第39-40页 |
2.14.1 双分子荧光互补载体构建 | 第39页 |
2.14.2 双分子荧光互补实验流程 | 第39-40页 |
2.15 数据统计与图像绘制 | 第40-41页 |
第三章 结果与分析 | 第41-66页 |
3.1 MdHB1基因克隆与分析 | 第41-44页 |
3.2 MdHB1亚细胞定位 | 第44-45页 |
3.3 MdHB1瞬时沉默在白肉苹果‘澳洲青苹’果实中的表型鉴定 | 第45-52页 |
3.4 MdHB1瞬时过表达在红肉苹果‘芭蕾’果实中的表型鉴定 | 第52-53页 |
3.5 MdHB1过表达的转基因‘NC89’烟草表型观察 | 第53-56页 |
3.6 MdHB1和MdMYB10拮抗调控MdDFR和MdUFGT的表达 | 第56-60页 |
3.7 MdHB1和MdMYB10共沉默对‘澳洲青苹’果肉着色的影响 | 第60-64页 |
3.8 MdHB1与MBW转录因子间的结合 | 第64-66页 |
第四章 讨论 | 第66-70页 |
4.1 MdHB1负调控‘澳洲青苹’果肉中花青苷的合成 | 第66-67页 |
4.2 MdMYB10对‘澳洲青苹’果肉着色具有重要意义 | 第67-68页 |
4.3 MdHB1负调控花青苷合成的推测机制 | 第68-70页 |
第五章 结论与创新点 | 第70-72页 |
5.1 结论 | 第70-71页 |
5.2 创新点 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-81页 |
附录 | 第81-101页 |
附录1 载体图谱及相应引物 | 第81-92页 |
附录2 ‘澳洲青苹’中转录因子及启动子序列 | 第92-98页 |
附录3 培养基与试剂 | 第98-99页 |
附录4 文中所用缩略词 | 第99-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
作者简介 | 第102页 |