| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 引言 | 第9-19页 |
| 1.1 基因组印记研究进展 | 第9-12页 |
| 1.1.1 基因组印记 | 第9页 |
| 1.1.2 印记基因的特征 | 第9-10页 |
| 1.1.3 印记基因主要的调控方式 | 第10-12页 |
| 1.2 DNA甲基化技术 | 第12-15页 |
| 1.2.1 DNA甲基化概述 | 第12-13页 |
| 1.2.2 DNA甲基化的检测方法 | 第13-15页 |
| 1.3 所研究的基因 | 第15-18页 |
| 1.3.1 Cdkn1c/Kcnq1ot1 印记域的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.3.2 Ascl2 基因的研究现状 | 第16-17页 |
| 1.3.3 Tssc4 基因的研究现状 | 第17-18页 |
| 1.3.4 Osbpl5 基因的研究现状 | 第18页 |
| 1.4 研究内容及意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 获取牛组织样本 | 第19页 |
| 2.1.2 实验药品 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.4 试剂配制 | 第20页 |
| 2.1.5 生物信息学网站和分析软件 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-28页 |
| 2.2.1 牛Ascl2 基因生物信息学分析 | 第21页 |
| 2.2.232 头牛基因组DNA的提取及检测 | 第21-22页 |
| 2.2.3 牛Ascl2、Tssc4 和Osbpl5 基因杂合子个体筛选 | 第22-23页 |
| 2.2.4 杂合子牛待测组织总RNA的提取及检测 | 第23页 |
| 2.2.5 反转录合成cDNA | 第23页 |
| 2.2.6 基因组织特异性表达的RT-PCR分析 | 第23-25页 |
| 2.2.7 牛Ascl2、Tssc4 和Osbpl5 基因印记状态分析 | 第25页 |
| 2.2.8 Ascl2 基因等位基因特异的甲基化状态分析 | 第25-27页 |
| 2.2.9 数据分析 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-40页 |
| 3.1 牛Ascl2 基因生物信息分析 | 第28-30页 |
| 3.2 牛肝脏、肺脏和肾脏基因组DNA的检测 | 第30-31页 |
| 3.3 筛选牛Ascl2、Tssc4 和Osbpl5 基因杂合子个体 | 第31页 |
| 3.4 杂合子个体待测组织RNA的检测结果及RT-PCR反应 | 第31-32页 |
| 3.5 牛Ascl2 基因 | 第32-33页 |
| 3.5.1 牛Ascl2 基因的组织特异性表达 | 第32页 |
| 3.5.2 牛Ascl2 基因的印记分析结果 | 第32-33页 |
| 3.6 牛Tssc4 基因 | 第33-34页 |
| 3.6.1 牛Tssc4 基因的组织特异性表达 | 第33页 |
| 3.6.2 牛Tssc4 基因的印记分析结果 | 第33-34页 |
| .3.7 牛Osbpl5 基因 | 第34-35页 |
| 3.7.1 牛Osbpl5 基因的组织特异性表达 | 第34页 |
| 3.7.2 牛Osbpl5 基因的印记分析结果 | 第34-35页 |
| 3.8 牛Ascl2 基因启动子区甲基化状态分析 | 第35-40页 |
| 3.8.1 BSP-PCR引物设计 | 第35-36页 |
| 3.8.2 巢式PCR扩增 | 第36页 |
| 3.8.3 Ascl2 等位基因特异的甲基化状态分析 | 第36-40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| 4.1 牛Ascl2 基因序列生物信息学分析 | 第40页 |
| 4.2 牛Ascl2、Tssc4 和Osbpl5 基因的组织特异性表达及印记状态分析 | 第40-41页 |
| 4.3 牛Ascl2 基因启动子区DNA甲基化状态在调控印记中的作用 | 第41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 在读期间发表论文 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
