| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 1 实验材料 | 第13-16页 |
| 1.1 主要试剂 | 第13-14页 |
| 1.2 实验器材 | 第14页 |
| 1.3 常用溶液的配制 | 第14-16页 |
| 2 实验方法 | 第16-28页 |
| 2.1 人脐带间充质干细胞的分离和培养 | 第16-18页 |
| 2.1.1 hU-MSCs的分离 | 第16页 |
| 2.1.2 hU-MSCs的传代 | 第16-17页 |
| 2.1.3 hU-MSCs的冻存 | 第17-18页 |
| 2.1.4 hU-MSCs的复苏 | 第18页 |
| 2.2 人脐带间充质干细胞生物学特性鉴定 | 第18-19页 |
| 2.2.1 hU-MSCs形态学观察 | 第18页 |
| 2.2.2 hU-MSCs标准曲线的制作 | 第18-19页 |
| 2.2.3 hU-MSCs生长曲线的制作 | 第19页 |
| 2.2.4 流式细胞仪检测hU-MSCs的细胞表面标记物 | 第19页 |
| 2.3 人脐带间充质干细胞中检测S1P受体mRNA的表达谱 | 第19-24页 |
| 2.3.1 培养hU-MSCs提取细胞总RNA | 第19-20页 |
| 2.3.2 去除总RNA中的基因组DNA | 第20页 |
| 2.3.3 获得hU-MSCs的cDNA模板 | 第20-21页 |
| 2.3.4 Real Time PCR检测正常条件下hU-MSCs中S1PRs的mRNA表达谱 | 第21-23页 |
| 2.3.5 Real Time PCR检测S1P刺激后hU-MSCs中S1PRs的mRNA表达谱 | 第23-24页 |
| 2.4 S1P对人脐带间充质干细胞生物功能的影响 | 第24-27页 |
| 2.4.1 MTT法检测S1P对hU-MSCs的增殖作用 | 第24页 |
| 2.4.2 Micro chemotoxic chamber法检测S1P对hU-MSCs迁移功能的影响 | 第24-25页 |
| 2.4.3 MTT法检测脂多糖(LPS)对hU-MSCs的诱导凋亡作用 | 第25-26页 |
| 2.4.4 S1P对脂多糖(LPS)诱导的hU-MSCs有抗凋亡作用 | 第26-27页 |
| 2.4.5 检测S1PR2拮抗剂(JTE-013)对hU-MSCs抗凋亡的作用 | 第27页 |
| 2.5 统计学处理 | 第27-28页 |
| 3 实验结果与分析 | 第28-39页 |
| 3.1 人脐带间充质干细胞的分离与鉴定 | 第28-32页 |
| 3.1.1 hU-MSCs形态学观察 | 第28-30页 |
| 3.1.2 hU-MSCs标准曲线的绘制 | 第30页 |
| 3.1.3 hU-MSCs生长曲线的绘制 | 第30-31页 |
| 3.1.4 hU-MSCs表面标记物的检测 | 第31-32页 |
| 3.2 人脐带间充质干细胞中S1P受体的mRNA表达谱 | 第32-34页 |
| 3.2.1 正常条件下hU-MSCs中5种S1PRs的mRNA表达量 | 第32-33页 |
| 3.2.2 S1P刺激后hU-MSCs中5种S1PRs的mRNA表达量 | 第33-34页 |
| 3.3 S1P对人脐带间充质干细胞生物功能的影响 | 第34-39页 |
| 3.3.1 S1P促进hU-MSCs的增殖 | 第34页 |
| 3.3.2 S1P抑制hU-MSCs的迁移 | 第34-36页 |
| 3.3.3 脂多糖(LPS)诱导hU-MSCs的凋亡 | 第36-37页 |
| 3.3.4 S1P抑制LPS诱导的hU-MSCs凋亡作用 | 第37-38页 |
| 3.3.5 S1PR2拮抗剂抑制S1P诱导的hU-MSCs增殖作用 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 文献综述 | 第42-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
