中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第11-12页 |
前言 | 第12-15页 |
研究现状、成果 | 第12-14页 |
研究目的、方法 | 第14-15页 |
一、自噬在LncRNA HULC调节肝癌细胞上皮间质转化中的作用 | 第15-35页 |
1.1 对象和方法 | 第15-27页 |
1.1.1 标本收集 | 第15页 |
1.1.2 细胞系 | 第15页 |
1.1.3 主要试剂 | 第15-17页 |
1.1.4 主要溶液配制 | 第17页 |
1.1.5 主要仪器设备 | 第17-18页 |
1.1.6 细胞培养 | 第18页 |
1.1.7 细胞分组及处理 | 第18-19页 |
1.1.8 细胞活性检测 | 第19页 |
1.1.9 转染mRFP-GFP-LC3腺病毒 | 第19页 |
1.1.10 蛋白印迹技术检测 | 第19-21页 |
1.1.11 Transwell实验 | 第21-22页 |
1.1.12 细胞免疫荧光检测 | 第22-23页 |
1.1.13 总RNA提取及质检 | 第23-24页 |
1.1.14 实时定量RT-PCR | 第24-25页 |
1.1.15 病理学检测 | 第25-27页 |
1.1.16 统计学处理 | 第27页 |
1.2 结果 | 第27-32页 |
1.2.1 肝癌细胞系活力检测 | 第27-28页 |
1.2.2 mRFP-GFP-LC3腺病毒检测结果 | 第28页 |
1.2.3 Westernblot结果 | 第28-29页 |
1.2.4 Transwell实验结果结果 | 第29-30页 |
1.2.5 细胞免疫荧光检测 | 第30页 |
1.2.6 临床标本RT-PCR检测结果 | 第30-31页 |
1.2.7 临床标本病理学检测 | 第31-32页 |
1.3 讨论 | 第32-34页 |
1.4 小结 | 第34-35页 |
二、LncRNA HULC通过特异性结合miR-137 调节肝癌细胞自噬活性和上皮间质转化 | 第35-43页 |
2.1 对象和方法 | 第35-38页 |
2.1.1 细胞系 | 第35页 |
2.1.2 引物设计与合成 | 第35页 |
2.1.3 主要试剂 | 第35页 |
2.1.4 主要溶液配制 | 第35-36页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第36-37页 |
2.1.6 肝癌细胞处理和分组 | 第37页 |
2.1.7 实时荧光定量聚合酶链反应 | 第37页 |
2.1.8 蛋白印迹技术检测( Western blot) | 第37-38页 |
2.1.9 统计学处理 | 第38页 |
2.2 结果 | 第38-40页 |
2.2.1 HULC作为ceRNA特异性结合miR-137 | 第38-39页 |
2.2.2 miR-137 通过调控 Atg7 抑制肝癌细胞自噬水平,进而影响其上皮间质转化 | 第39-40页 |
2.3 讨论 | 第40-42页 |
2.4 小结 | 第42-43页 |
三、动物体内LncRNA HULC对肝癌细胞自噬和侵袭转移的影响 | 第43-50页 |
3.1 对象和方法 | 第43-45页 |
3.1.1 细胞系 | 第43页 |
3.1.2 引物设计与合成 | 第43页 |
3.1.3 主要试剂 | 第43页 |
3.1.4 主要溶液配制 | 第43页 |
3.1.5 主要仪器设备 | 第43页 |
3.1.6 稳定细胞系的建立和分组 | 第43-44页 |
3.1.7 动物体内成瘤实验分组及方法 | 第44-45页 |
3.1.8 实时荧光定量聚合酶链反应 | 第45页 |
3.1.9 蛋白印迹技术检测 | 第45页 |
3.1.10 免疫组织化学检测 | 第45页 |
3.1.11 统计学处理 | 第45页 |
3.2 结果 | 第45-48页 |
3.2.1 皮下移植瘤模型结果 | 第45-47页 |
3.2.2 原位移植瘤模型结果 | 第47-48页 |
3.3 讨论 | 第48-49页 |
3.4 小结 | 第49-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第57-59页 |
附录 | 第59-60页 |
综述 长链非编码RNA与细胞自噬调控 | 第60-71页 |
综述参考文献 | 第65-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
个人简历 | 第72页 |