| 个人简历 | 第3-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-21页 |
| 第一部分 高表达CTSS蛋白人肝癌细胞系的筛选 | 第21-49页 |
| 前言 | 第21-22页 |
| 1 材料和方法 | 第22-40页 |
| 1.1 材料 | 第22-29页 |
| 1.2 方法 | 第29-40页 |
| 2 实验结果 | 第40-44页 |
| 2.1 RNA纯度及质量鉴定 | 第40-41页 |
| 2.2 荧光定量PCR | 第41-43页 |
| 2.3 Western blot | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-49页 |
| 第二部分 慢病毒介导的RNA干扰及过表达CTSS基因的人肝癌细胞MHCC97H稳定株制备 | 第49-91页 |
| 前言 | 第49-50页 |
| 1 材料和方法 | 第50-62页 |
| 1.1 材料 | 第50-51页 |
| 1.2 方法 | 第51-62页 |
| 2 实验结果 | 第62-86页 |
| 2.1 重组质粒的双酶切及鉴定 | 第62-64页 |
| 2.2 阳性克隆鉴定 | 第64-66页 |
| 2.3 阳性克隆测序结果分析 | 第66-75页 |
| 2.4 重组质粒转染293T细胞 | 第75-76页 |
| 2.5 慢病毒的包装 | 第76-77页 |
| 2.6 慢病毒感染预实验 | 第77-80页 |
| 2.7 慢病毒PLVT1150-L.V、干扰对照病毒PLVT8-L.V、PSB880-L.V、PSB53-L.V感染肝癌MHCC97H细胞 | 第80-83页 |
| 2.8 实时荧光定量PCR检测CTSS-RNAi-L.V有效靶点内源验证 | 第83-85页 |
| 2.9 Western blot检测CTSS-RNAi-L.V有效靶点内源验证 | 第85-86页 |
| 3 讨论 | 第86-91页 |
| 第三部分 沉默组织蛋白酶S对肝细胞癌MHCC97H凋亡及PAR2、NF-kappaB通路的影响 | 第91-105页 |
| 前言 | 第91-92页 |
| 1 材料和方法 | 第92-95页 |
| 1.1 材料 | 第92-93页 |
| 1.2 方法 | 第93-95页 |
| 2 实验结果 | 第95-101页 |
| 2.1 荧光定量PCR | 第95-97页 |
| 2.2 Western blot检测PAR2蛋白表达 | 第97-98页 |
| 2.3 Western blot检测沉默CTSS过表达PAR2稳定株 | 第98-99页 |
| 2.4 流式细胞仪检测慢病毒介导的沉默CTSS基因及沉默CTSS过表达PAR2的凋亡情况 | 第99-100页 |
| 2.5 Western blot检测Ikkα/β、IkBα、NF-κB蛋白及磷酸化蛋白表达情况 | 第100-101页 |
| 3 讨论 | 第101-105页 |
| 第四部分 沉默组织蛋白酶S后蜂毒素及多柔比星对人肝癌细胞系诱导凋亡敏感性的影响 | 第105-113页 |
| 前言 | 第105页 |
| 1 材料和方法 | 第105-107页 |
| 1.1 材料 | 第105-106页 |
| 1.2 方法 | 第106-107页 |
| 2 实验结果 | 第107-109页 |
| 2.1 流式细胞仪检测蜂毒素及多柔比星对沉默组织蛋白酶S的肝癌细胞凋亡敏感性 | 第107-108页 |
| 2.2 Western blot | 第108-109页 |
| 3 讨论 | 第109-113页 |
| 第五部分 沉默组织蛋白酶S的人肝癌MHCC97H细胞在裸鼠皮下荷瘤中生长及细胞凋亡的研究 | 第113-123页 |
| 前言 | 第113页 |
| 1 材料和方法 | 第113-116页 |
| 1.1 材料 | 第113-114页 |
| 1.2 方法 | 第114-116页 |
| 2 实验结果 | 第116-119页 |
| 3 讨论 | 第119-123页 |
| 全文小结 | 第123-129页 |
| 参考文献 | 第129-145页 |
| 附录 | 第145-149页 |
| 综述 | 第149-179页 |
| 参考文献 | 第166-179页 |
| 致谢 | 第179-181页 |
| 在校期间已发表的论文 | 第181-193页 |
