| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词 | 第10-11页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-26页 |
| 1. 转座子的概述 | 第11-13页 |
| 1.1 转座子的定义 | 第11页 |
| 1.2 转座子的分类 | 第11-12页 |
| 1.3 转座子的家族 | 第12-13页 |
| 2. 基因捕获概述 | 第13-17页 |
| 2.1 基因捕获的定义 | 第13-14页 |
| 2.2 基因捕获载体分类和应用 | 第14-17页 |
| 3. PB转座子的研究进展 | 第17-19页 |
| 3.1 PB转座子的发现与结构 | 第17-18页 |
| 3.2 PB转座子的作用机制 | 第18页 |
| 3.3 PB转座子的应用 | 第18-19页 |
| 4. SB转座子的研究进展 | 第19-21页 |
| 4.1 SB转座子的发现与结构 | 第19-20页 |
| 4.2 SB转座子的作用机制 | 第20-21页 |
| 4.3 SB转座子的应用 | 第21页 |
| 5. Tol2转座子的研究进展 | 第21-23页 |
| 5.1 Tol2转座子的发现与结构 | 第21-23页 |
| 5.2 Tol2转座子的作用机制 | 第23页 |
| 5.3 Tol2转座子的应用 | 第23页 |
| 6. 模式动物斑马鱼的研究 | 第23-26页 |
| 6.1 斑马鱼简介 | 第23-25页 |
| 6.2 斑马鱼的实验研究进展 | 第25-26页 |
| 第二篇 试验研究 | 第26-80页 |
| 前言 | 第26-28页 |
| 第一章 SB、PB和Tol2转座子介导基因转移效率比较 | 第28-45页 |
| 前言 | 第28-29页 |
| 1 材料与方法 | 第29-35页 |
| 1.1 实验试剂 | 第29-30页 |
| 1.2 仪器设备 | 第30页 |
| 1.3 生物信息学网站与生物分析软件 | 第30-31页 |
| 1.4 载体准备 | 第31页 |
| 1.5 pTn-FAG-GFP载体构建策略 | 第31-33页 |
| 1.5.1 引物的设计与合成 | 第31页 |
| 1.5.2 PolyA片段的克隆 | 第31-32页 |
| 1.5.3 pGBT-RP2-PA载体的构建 | 第32页 |
| 1.5.4 pTn-FAG-GFP载体的构建 | 第32-33页 |
| 1.6 基因转移斑马鱼的实验方法 | 第33-35页 |
| 1.6.1 斑马鱼显微注射方案 | 第33-34页 |
| 1.6.2 斑马鱼胚胎检测 | 第34-35页 |
| 1.6.3 斑马鱼生殖系传递效率比较 | 第35页 |
| 2 实验结果 | 第35-43页 |
| 2.1 PolyA片段的克隆 | 第35-36页 |
| 2.2 pTn-FAG-GFP载体的构建结果 | 第36-37页 |
| 2.2.1 pGBT-RP2-PA载体的构建 | 第36-37页 |
| 2.2.2 pTn-FAG-GFP载体的构建 | 第37页 |
| 2.3 PB、SB和Tol2转座子介导的转基因斑马鱼注射浓度筛选结果 | 第37-40页 |
| 2.3.1 PB、SB和Tol2转座子介导的转基因斑马鱼阳性率比较 | 第37-39页 |
| 2.3.2 PB、SB和Tol2转座子介导的转基因斑马鱼成活率比较 | 第39-40页 |
| 2.4 PB、SB和Tol2转座子介导的基因转移效率比较 | 第40-41页 |
| 2.5 PB、SB和Tol2转座子介导的基因转移生殖系传递效率比较 | 第41-43页 |
| 2.5.1 PB、SB和Tol2转座子介导的转基因斑马鱼生殖系传递效率比较 | 第41-42页 |
| 2.5.2 PB、SB和Tol2转座子介导的转基因斑马鱼斑马鱼F1代阳性率比较 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第二章 SB、PB和Tol2转座子介导的增强子捕获效率比较 | 第45-61页 |
| 前言 | 第46-47页 |
| 1 材料与方法 | 第47-52页 |
| 1.1 实验试剂 | 第47页 |
| 1.2 仪器设备 | 第47-48页 |
| 1.3 生物学分析软件及数据统计分析方法 | 第48-49页 |
| 1.4 pTn-krt4-GFP载体的构建 | 第49-51页 |
| 1.4.1 krt4基础启动子的获得 | 第49-50页 |
| 1.4.2 krt4-GFP-PolyA的获得 | 第50页 |
| 1.4.3 pTn-krt4-GFP系列载体的构建 | 第50-51页 |
| 1.5 斑马鱼胚胎实验方法 | 第51-52页 |
| 1.5.1 斑马鱼胚胎注射方案 | 第51页 |
| 1.5.2 斑马鱼胚胎检测 | 第51-52页 |
| 1.5.3 斑马鱼生殖系传递效率比较 | 第52页 |
| 2 实验结果 | 第52-60页 |
| 2.1 增强子捕获系列载体构建结果 | 第52-54页 |
| 2.1.1 Krt4基础启动子的克隆 | 第52-53页 |
| 2.1.2 krt4-GFP-PolyA片段的结果 | 第53页 |
| 2.1.3 pTn-krt4-GFP载体的构建结果 | 第53-54页 |
| 2.2 PB、SB和Tol2介导的增强子捕获效率比较 | 第54-55页 |
| 2.2.1 PB、SB和Tol2介导的增强子捕获F0代斑马鱼成活率比较 | 第54页 |
| 2.2.2 PB、SB和Tol2介导的增强子捕获F0代斑马鱼阳性率比较 | 第54-55页 |
| 2.3 PB、SB和Tol2介导的增强子捕获生殖系传递效率比较 | 第55-57页 |
| 2.3.1 PB、SB和Tol2介导的增强子捕获斑马鱼生殖系传递效率比较 | 第55-56页 |
| 2.3.2 PB、SB和Tol2介导的增强子捕获斑马鱼F1代阳性率比较 | 第56-57页 |
| 2.4 PB、SB和Tol2介导的增强子捕获斑马鱼F1代表达模式比较 | 第57-60页 |
| 3 讨论 | 第60-61页 |
| 第三章 IRES元件对转座子介导的基因捕获的影响 | 第61-71页 |
| 前言 | 第61-62页 |
| 1 材料与方法 | 第62-66页 |
| 1.1 实验试剂 | 第62-63页 |
| 1.2 仪器设备 | 第63页 |
| 1.3 生物学分析软件及数据统计分析方法 | 第63页 |
| 1.4 IRES功能比较载体构建 | 第63-65页 |
| 1.4.1 IRES元件的引物的设计 | 第63-64页 |
| 1.4.2 IRES元件的克隆 | 第64页 |
| 1.4.3 pTol2-GTrap载体构建 | 第64-65页 |
| 1.5 基因捕获斑马鱼胚胎的验证方法 | 第65-66页 |
| 1.5.1 斑马鱼胚胎注射方案 | 第65页 |
| 1.5.2 斑马鱼胚胎检测方案 | 第65-66页 |
| 2 实验结果 | 第66-69页 |
| 2.1 IRES元件的克隆与鉴定 | 第66页 |
| 2.2 pTol2-RG-Trap和pTol2-GTrap载体构建与鉴定 | 第66-67页 |
| 2.3 斑马鱼胚胎的验证 | 第67-69页 |
| 2.3.1 pTol2-RG-Trap和pTol2-Gtrap基因捕获效率比较 | 第67-68页 |
| 2.3.2 pTol2-RG-Trap和pTol2-Gtrap胚胎成活率比较 | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 第四章 PB、SB和Tol2转座子介导的基因捕获效率比较 | 第71-80页 |
| 前言 | 第71-72页 |
| 1 材料与方法 | 第72-75页 |
| 1.1 实验试剂 | 第72页 |
| 1.2 仪器设备 | 第72-73页 |
| 1.3 生物学分析软件及数据统计分析方法 | 第73页 |
| 1.4 pTn-GTrap系列载体的构建 | 第73-74页 |
| 1.5 基因捕获斑马鱼胚胎的验证方法 | 第74-75页 |
| 1.5.1 斑马鱼胚胎注射方案 | 第74-75页 |
| 1.5.2 斑马鱼胚胎检测方案 | 第75页 |
| 2 实验结果 | 第75-78页 |
| 2.1 pTn-GTrap系列载体的构建结果 | 第75-76页 |
| 2.1.1 pTol2-GTrap的构建和IRES-RFP-GFP-IRES-Trap片段的获得 | 第75-76页 |
| 2.1.2 pSB-GTrap和pPB-GTrap载体的构建 | 第76页 |
| 2.2 PB、SB和Tol2转座子介导的基因捕获效率的比较 | 第76-78页 |
| 2.2.1 PB、SB和Tol2介导的基因捕获斑马鱼阳性率比较 | 第76-78页 |
| 2.2.2 PB、SB和Tol2介导的基因捕获斑马鱼成活率比较 | 第78页 |
| 3 讨论 | 第78-80页 |
| 全文结论 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-90页 |
| 致谢 | 第90-92页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第92-93页 |
