| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-19页 |
| 1.1 基因传递简介 | 第8-9页 |
| 1.1.1 基因治疗 | 第8页 |
| 1.1.2 研究背景 | 第8页 |
| 1.1.3 基因治疗的发展 | 第8-9页 |
| 1.1.4 基因载体的作用 | 第9页 |
| 1.2 非病毒基因载体 | 第9-15页 |
| 1.2.1 阳离子脂质体(Liposome) | 第9页 |
| 1.2.2 聚乙烯亚胺(PEI) | 第9-11页 |
| 1.2.3 聚赖氨酸(PLL) | 第11-12页 |
| 1.2.4 壳聚糖(Chitosan) | 第12页 |
| 1.2.5 聚甲基丙烯酸-N,N'-二甲氨基乙酯(PDMAEMA) | 第12-15页 |
| 1.3 聚阳离子基因载体的基因传递过程及面临的障碍 | 第15-16页 |
| 1.4 提高聚阳离子基因载体的基因传递效率的方法 | 第16-18页 |
| 1.4.1 提高血液循环稳定性 | 第16页 |
| 1.4.2 引入靶向基团 | 第16-17页 |
| 1.4.3 提高内涵体逃逸能力 | 第17页 |
| 1.4.4 提高基因在细胞质内的释放 | 第17-18页 |
| 1.4.5 提高基因在细胞核内的运输能力 | 第18页 |
| 1.5 本课题的研究思路 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-30页 |
| 2.1 主要原料 | 第19-20页 |
| 2.2 主要设备 | 第20页 |
| 2.3 原料的纯化 | 第20-21页 |
| 2.3.1 CuBr的纯化 | 第20页 |
| 2.3.2 DMAEMA的纯化 | 第20-21页 |
| 2.3.3 吡啶的无水处理 | 第21页 |
| 2.4 PDMAEMA的制备 | 第21-22页 |
| 2.5 PEG-b-PDMAEMA的制备 | 第22-24页 |
| 2.5.1 大分子引发剂PEG-Br的制备 | 第22页 |
| 2.5.2 不同DMAEMA链长的PEG-b-PDMAEMA的制备 | 第22-24页 |
| 2.6 质粒DNA的获得 | 第24-25页 |
| 2.6.1 大肠杆菌的培养 | 第24-25页 |
| 2.6.2 质粒DNA的提取 | 第25页 |
| 2.7 细胞铺板 | 第25-26页 |
| 2.8 细胞转染 | 第26页 |
| 2.9 细胞裂解 | 第26-27页 |
| 2.10 Western Blot免疫印迹法检测flag蛋白表达操作步骤 | 第27-29页 |
| 2.11 MTT细胞活性检测 | 第29-30页 |
| 3 结果与讨论 | 第30-49页 |
| 3.1 PDMAEMA均聚物性能研究 | 第30-34页 |
| 3.1.1 反应机理 | 第30-31页 |
| 3.1.2 结构表征 | 第31-33页 |
| 3.1.3 温敏性研究 | 第33-34页 |
| 3.2 PEG-b-PDMAEMA嵌段共聚物性能研究 | 第34-41页 |
| 3.2.1 反应机理 | 第34-35页 |
| 3.2.2 结构表征 | 第35-37页 |
| 3.2.3 温敏性研究 | 第37-41页 |
| 3.3 PDMAEMA质子缓冲能力 | 第41-43页 |
| 3.4 聚合物/DNA复合物形貌研究 | 第43页 |
| 3.5 Western Blot免疫印迹法检测flag蛋白表达 | 第43-47页 |
| 3.5.1 不同聚合物/DNA的转染效率分析 | 第44-45页 |
| 3.5.2 不同氮磷比条件下PEG_(45)-b-PDMAEMA_(218)/DNA的转染效率分析 | 第45-47页 |
| 3.6 MTT法检测细胞毒性 | 第47-49页 |
| 3.6.1 不同聚合物/DNA的细胞毒性检测 | 第47页 |
| 3.6.2 不同氮磷比条件下PEG_(45)-b-PDMAEMA_(218)/DNA的细胞毒性检测 | 第47-49页 |
| 4 结论 | 第49-50页 |
| 5 展望 | 第50-51页 |
| 6 参考文献 | 第51-58页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第58-59页 |
| 8 致谢 | 第59页 |
