摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 植物叶片衰老的研究进展 | 第10-13页 |
1.1.1 植物叶片衰老的概念 | 第10页 |
1.1.2 植物叶片衰老的分子机制 | 第10-11页 |
1.1.3 植物叶片衰老的影响因素 | 第11-12页 |
1.1.4 棉花叶片衰老的生理生化指标 | 第12-13页 |
1.2 植物microRNA的研究进展 | 第13-17页 |
1.2.1 植物microRNA的生物合成 | 第13-14页 |
1.2.2 植物miRNA的特征 | 第14页 |
1.2.3 植物miRNA的作用机制 | 第14-15页 |
1.2.4 植物miRNA对基因表达的调控作用 | 第15-17页 |
1.3 棉花叶片衰老的研究现状 | 第17页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
1.4.1 研究目的 | 第17-18页 |
1.4.2 研究意义 | 第18-19页 |
第二章 Ghr-miR160的生物学分析 | 第19-24页 |
2.1 试验工具 | 第19页 |
2.2 试验方法 | 第19页 |
2.3 结果与分析 | 第19-22页 |
2.3.1 植物miR160多重序列比对结果 | 第19-20页 |
2.3.2 植物pre-miR160系统发育分析 | 第20-22页 |
2.4 讨论 | 第22-24页 |
第三章 棉花miR160的表达模式分析 | 第24-31页 |
3.1 材料 | 第24页 |
3.1.1 试验材料 | 第24页 |
3.1.2 仪器设备 | 第24页 |
3.1.3 试剂与耗材 | 第24页 |
3.2 试验方法 | 第24-29页 |
3.2.1 棉花子叶的取样 | 第24页 |
3.2.2 RNA、miRNA的提取及其反转录 | 第24-27页 |
3.2.3 荧光定量PCR | 第27-29页 |
3.3 结果与分析 | 第29-30页 |
3.3.1 自然衰老的CCRI10和Liao4086子叶 | 第29页 |
3.3.2 Ghr-miR160及靶基因RRP41L在棉花子叶中的表达模式 | 第29-30页 |
3.4 讨论 | 第30-31页 |
第四章 Ghr-miR160转拟南芥验证 | 第31-44页 |
4.1 材料 | 第31页 |
4.1.1 试验材料 | 第31页 |
4.1.2 实验设备 | 第31页 |
4.1.3 试剂与耗材 | 第31页 |
4.2 试验方法 | 第31-40页 |
4.2.1 Ghr-miR160过表达载体设计 | 第31页 |
4.2.2 Ghr-miR160过表达载体克隆 | 第31-32页 |
4.2.3 PCR产物胶回收及连接克隆载体 | 第32-33页 |
4.2.4 转化及提取阳性质粒 | 第33-34页 |
4.2.5 构建pBI121-miR160过表达载体 | 第34-35页 |
4.2.6 转化农杆菌 | 第35-36页 |
4.2.7 种植拟南芥 | 第36页 |
4.2.8 转化拟南芥 | 第36-37页 |
4.2.9 转基因拟南芥种子的消毒 | 第37页 |
4.2.10 转基因拟南芥的阳性检测 | 第37-38页 |
4.2.11 转基因拟南芥相关基因表达量检测 | 第38-39页 |
4.2.12 拟南芥叶片叶绿素含量测定 | 第39-40页 |
4.3 结果与分析 | 第40-42页 |
4.3.1 转基因拟南芥阳性鉴定结果 | 第40页 |
4.3.2 转基因拟南芥ghr-miR160表达量检测 | 第40-41页 |
4.3.3 转基因拟南芥表型观察 | 第41页 |
4.3.4 拟南芥衰老相关基因SAG12表达量检测 | 第41-42页 |
4.3.5 拟南芥叶绿素含量检测 | 第42页 |
4.4 讨论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
作者简介 | 第49页 |